国家自然科学基金(30540015)
- 作品数：3 被引量：14H指数：3
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- 相关机构：大连医科大学西安医学院更多>>
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- 香菇C_(91-3)菌丝发酵液中蛋白的分离纯化及其抗肿瘤机理研究被引量：3
- 2012年
- 目的研究香菇C91-3菌丝体发酵液中的粗蛋白LFP91-3的分离纯化方法,提取具有抗肿瘤活性的蛋白组分,并初步鉴定其药效及特性。方法 LFP91-3经盐析、透析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离。用考马斯亮蓝法测定各管收集液中的蛋白浓度,依此绘制洗脱曲线,按曲线对收集液分组;用MTT比色法分别测定各组蛋白收集液对肿瘤细胞的生长抑制作用。对抑瘤率最大的一组各管收集液分别做SDS-PAGE电泳银染,取电泳条带相对较单一的峰尖部数管收集液合并,即为本实验的提取蛋白,以MTT比色法测定其对肿瘤细胞的生长抑制作用。用考马斯亮蓝法和硫酸-苯酚定糖法测定提取蛋白中蛋白和糖的比例。流式细胞仪检测提取蛋白诱导肿瘤细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率;透射电镜观察经该蛋白作用的肿瘤细胞的凋亡形态。结果 LFP91-3经分离纯化,可得Ⅰ～Ⅳ共4组蛋白峰,且第3组的收集液抑瘤率最高。SDS-PAGE电泳结果显示第3峰顶部23～26管收集液主要含有19 kDa左右的蛋白,其他分子量的蛋白含量极低。测得该蛋白中蛋白和糖比例约为3∶1。MTT法显示提取蛋白在体外能明显抑制鼠肉瘤细胞株S180细胞的生长。流式细胞仪检测结果表明提取蛋白能在体外诱导S180细胞凋亡。透射电镜下,经提取蛋白作用的S180细胞,呈明显的凋亡形态。结论粗蛋白LFP91-3经盐析、透析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离共得到4组蛋白,第3组对S180细胞的抑制作用最强,其中第23～26管收集液主要含有分子量为19 kDa左右的蛋白,而且含有糖成分,提示可能为糖蛋白。该提取蛋白对S180细胞的生长具有较强的抑制作用,此作用与诱导肿瘤细胞凋亡有关。
- 武永红黄敏曹励民李萍
- 关键词：发酵液香菇蛋白
- 抗肿瘤真菌蛋白的研究进展被引量：7
- 2007年
- 药用真菌具有明显的抗癌作用。以往认为多糖是真菌抗肿瘤活性的主要成分,但真菌中分离出的真菌免疫调节蛋白、凝集素、核糖核酸酶等蛋白质,具有提高机体免疫、抑制细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡等抗肿瘤活性。真菌蛋白质是另一种重要的生物活性物质,对其抗肿瘤活性和机制的研究有广大的开发空间和挖掘潜力。
- 李星云黄敏宁安红钟民涛
- 关键词：真菌抗肿瘤药
- 香菇蛋白LFP91-3-A的分离纯化及其抗肿瘤机制被引量：4
- 2007年
- 香菇是食用兼药用真菌，其子实体、菌丝体及发酵液具抗癌、保肝、降胆固醇、提高机体免疫力的作用。国内外学者对香菇的抗肿瘤活性进行了大量的研究，认为起主要作用的有效物质是多糖。我们对香菇中蛋白质的生物学活性进行了初步研究。
- 李星云黄敏宁安红曹婧钟民涛
- 关键词：抗肿瘤机制香菇分离纯化机体免疫力生物学活性药用真菌
