重庆市教育委员会科学技术研究项目(Kj060308)
- 作品数：1 被引量：22H指数：1
- 相关作者：王洋任琛皮伟眭顺照蒋安更多>>
- 相关机构：西南大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 蜡梅花cDNA文库构建及其高频出现脂转移蛋白cDNA的表达被引量：22
- 2007年
- 目的构建蜡梅花cDNA文库,分析蜡梅脂转移蛋白基因的表达,为探索蜡梅冬季开花分子机理,分离克隆特色基因奠定基础。方法以蜡梅花器官为材料,用SMART cDNA Library Construction Kit构建文库,RT-PCR分析基因表达。结果经测定原始文库滴度达到1.4×106 pfu/ml,扩增总文库滴度约为1010pfu/ml,重组率达到96%,插入片段在0.5 kb以上,平均约1.1 kb,通过PCR检测,从总文库中检测到了表达丰度不同的蜡梅PI、AP3和LTP基因的特异片段,说明所构建的文库覆盖度高、代表性强,LTP基因具有内含子,而总文库中扩增出的LTP基因不含内含子,说明所构建的cDNA文库无基因组DNA污染,LTP基因在蜡梅开花各个时期均表现较高的转录水平,与EST分析时高频率出现LTP序列的情况相符,证实所构建的文库能够反映蜡梅开花过程基因表达的基本情况。结论已获得高质量的蜡梅花cDNA文库,可以用于进一步的基因克隆或EST测序分析,这是首次正式报道蜡梅cDNA文库的构建。LTP基因在蜡梅开花过程中可能具有重要的生物学功能,为探索蜡梅冬季开花分子机理提供了线索。
- 眭顺照李名扬蒋安王洋秦华皮伟任琛
- 关键词：蜡梅CDNA文库RT-PCR
