国家科技支撑计划(2012BAC01B07)
- 作品数：15 被引量：46H指数：4
- 相关作者：胥传来匡华陈秀金谭建锡周慧平更多>>
- 相关机构：江南大学河南科技大学中南林业科技大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划博士科研启动基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 基于磁性纳米粒子的粮油制品真伪鉴别技术研究被引量：2
- 2016年
- 通过PCR检测食用油中内源性DNA是鉴定食用植物油品种真实属性,检测食用油掺假的一种有效方法。然而由于精炼的食用油中DNA含量极低,如何有效富集食用油中的DNA是实现PCR鉴别粮油的关键。因此,作者研究了磁珠法富集食用油中的DNA并通过实时荧光PCR检测芝麻油、菜籽油、稻米油的内源基因。结果表明经过5次乳化后和磁珠进一步富集水相中的DNA,实时荧光PCR成功检测到了食用油中的内源性基因,琼脂糖凝胶电泳分析进一步证明实现了上述3种食用植物油的定性鉴定。
- 葛文亮王文彬胥传来
- 关键词：磁珠PCR食用油DNA提取
- 拟除虫菊酯类农药-抗体活性定量构效关系研究
- 2015年
- 目的：研究拟除虫菊酯类农药与其类特异性抗体的免疫识别机理。方法：采用逐步多重线性回归法研究了拟除虫菊酯类农药及其类似物和抗体活性（IC50：半数抑制浓度）之间的定量构效关系。在计算拟除虫菊酯及其类似物结构描述符的基础上,构建了二维定量构效模型,分析筛选影响抗体活性的主要因素,并用留一法交叉验证了模型的预测能力。同时,采用偏最小二乘法对计算所得拟除虫菊酯分子片段的结构参数进行了分析,建立了分子亚结构和抗体活性之间的全息定量构效模型,运用不同颜色编码来反映分子片段对抗体活性的贡献。结果：二维定量构效模型和全息定量构效模型的决定系数（R2）分别为0.920和0.917,二者的交叉验证系数（Q2）分别为0.875和0.660,表明两模型具有良好的预测能力。由二维定量构效模型还可得,拟除虫菊酯类农药的疏水性越小,往往和抗体的结合能力就越强。此外,在尝试了多种分子片段组合后,得到了最优全息定量构效模型,其分子片段的大小在4~10之间,分子片段的长度为61,优化的主成分为4,分子片段的类型为B/C/Ch;但拟除虫菊酯类农药指纹图谱的编码结果和试验结果不完全吻合。结论：拟除虫菊酯类农药的疏水性是影响抗体识别的主要因素。
- 陈秀金韩四海胥传来郭金英任国艳李道敏李松彪侯玉泽
- 关键词：拟除虫菊酯类农药抗体活性
- MALDI-TOF-MS鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌的方法研究被引量：3
- 2014年
- 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对3株水稻细菌性叶鞘褐腐病菌(Pseudomonas fuscovaginae)标准菌株进行蛋白质指纹图谱分析,将不同培养基、不同培养时间和不同样品处理方法等条件下所收集到的质谱峰进行比较,筛选出最佳实验方法,收集20张参考图谱与水稻常见病原细菌质谱峰进行比较,建立该病菌的蛋白质指纹图谱。结果显示用金氏B培养基分离纯化后经提取处理法进行MALDI-TOF-MS分析为最佳的实验方法。该方法对检测与鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌具有较高的灵敏度和重复性,且分析过程简单快速,有一定的应用价值。
- 黄迎波周慧平莫瑾谭建锡彭梓朱金国唐连飞
- 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱蛋白质指纹图谱
- ISSR指纹图谱技术在种质资源研究上的应用被引量：3
- 2013年
- ISSR指纹图谱技术是一种新的基于简单序列重复区间扩增多态性的分子标记技术。利用该技术能准确、快速地鉴定植物品种,目前已广泛应用于各种种质资源的鉴定,遗传关系和遗传多样性分析,以及种质资源指纹图谱的建立。对ISSR指纹图谱的基本原理及其在种质资源鉴定分析上的应用进行了简要概述。
- 贾媛李忠海黎继烈朱晓媛谭云
- 关键词：分子标记指纹图谱种质资源鉴定
- 变性高效液相色谱技术在大豆品种鉴定中的应用被引量：1
- 2015年
- 单核苷酸多态性(SNPs)和插入-删除标记(In Del)在基因组中广泛分布,日益成为主要作物的重要遗传标记。利用变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测大豆品种的SNP和In Del的多态性,可为大豆种质的品种鉴定提供一种新型的快速检测方法。基于公共数据库中的大豆基因信息,筛选了3条DNA序列作为目标分析片段,以大豆种质粤夏119作为参比基因型,利用DHPLC技术平台对10份大豆品种进行了鉴定。结果表明:混合参比DNA后的大豆样本产生DHPLC谱图均具有多态性,谱型与测序基因型一一对应。综合3条目标片段的DHPLC特征谱图可以区分所有大豆品种。试验结果验证了DHPLC应用于大豆品种鉴定的可行性和可靠性。由于DHPLC分辨率高、快速、操作简单、安全等优点,在大豆的品种鉴定中具有良好的应用前景。
- 彭梓谭建锡周慧平袁小雅朱金国王利兵
- 关键词：SNPINDEL大豆变性高效液相色谱技术
- 氯氰菊酯手性拆分及其抗体立体选择性研究被引量：2
- 2013年
- 以HP-silica柱和Sino-Chiral OD手性柱为固定相,通过紫外检测器检测,采用Waters484型液相色谱仪对氯氰菊酯进行手性拆分和单体制备;并根据Sino-Chiral OD手性柱的分离结果和文献,对氯氰菊酯异构体进行构型鉴定;最后,研究了抗氯氰菊酯单克隆抗体对其8个异构体的抑制效果。研究表明:抗氯氰菊酯单克隆抗体仅对氯氰菊酯的2个异构体(CP1,1R-cis-αR和CP2,1R-cis-αS)有抑制作用;抗体对CP1的灵敏度比对CP2要高得多,对高杀虫活性CP2异构体的半数抑制浓度为23.62 ng/mL,为将来高活性氯氰菊酯异构体的免疫检测提供了依据。
- 陈秀金匡华刘丽强胥传来
- 关键词：氯氰菊酯手性拆分单克隆抗体
- RAPD分子标记技术在植物研究上的应用被引量：11
- 2013年
- RAPD分子标记技术是利用随机引物,通过PCR扩增来检测DNA多态性的技术。文中主要介绍了RAPD分子标记技术的概念、基本原理以及优缺点,总结了RAPD分子标记技术在植物研究上的应用现状,并对RAPD分子标记技术在植物遗传多样性分析、基因指纹图谱构建、亲缘关系分析、品种鉴定以及药用植物和珍稀植物等方面的研究前景进行了展望。
- 谭云李忠海黎继烈贾媛
- 关键词：RAPD
- MALDI-TOF-MS鉴定3种水稻细菌的方法
- 2016年
- 用哥伦比亚培养基培养了水稻细菌性谷枯病菌(NCPPB 2391,NCPPB 3591)、水稻细菌性条斑病菌(NCPPB 1585)、水稻细菌性褐斑病菌(NCPPB 2844),菌落采用乙醇/甲酸处理法处理后用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析其蛋白质指纹图谱。除水稻细菌性条斑病菌无匹配结果外,其它2种细菌均有正确的鉴定结果。用Bruker公司标准方法建立了水稻细菌性条斑病菌蛋白质指纹图谱库。采用水稻叶片作为空白样品添加了上述3种植物病菌,回收实验结果表明3种植物病菌均可以用本方法检测。该研究为应用MALDI-TOF-MS方法检测水稻细菌奠定了基础。
- 王文彬匡华徐丽广马伟刘丽强胥传来
- 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
- 双抗体夹心酶联免疫方法检测丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌被引量：2
- 2016年
- 丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌可以引起十字花科细菌性黑斑病,是侵染萝卜、白菜、花椰菜等农作物的重要病害之一。以灭活的丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌(NCPPB1820)为免疫原免疫小鼠,通过杂交瘤细胞技术,筛选最终获得6株产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。将辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)与抗体偶联,作为检测探针,分别将6种单克隆抗体作为包被抗体,进行两两配对筛选。结果表明,所制备的抗体特异性较好,对水稻细菌性谷枯病菌、水稻细菌性条斑病菌、玉米细菌性枯萎病菌、丁香假单胞菌丁香致病变种均没有交叉反应。以6号抗体作为检测抗体(6-HRP),以1号抗体作为包被抗体,建立酶联免疫分析法获得了最佳的敏感度。检测丁香假单胞杆菌斑点致病变种的最低检测限为1.5×105cfu/m L,定量限为4.12×105cfu/m L。基于双抗体夹心的酶免疫方法特异性好,便捷,可以实现对丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌高通量测定。
- 王文彬孔德昭唐丽娟马伟匡华
- 关键词：酶联免疫测定单克隆抗体
- 地衣腌菜中产广谱细菌素乳酸菌的筛选与鉴定被引量：7
- 2016年
- 采用滤纸片双层平板法从自制酸奶、市售散装腌菜和袋装榨菜中分离出乳酸菌,再对分离的乳酸菌进行抑菌试验、酸和过氧化氢抑制作用的排除、蛋白酶的敏感检测和抑菌谱测定,最后对所得菌株形态和生理生化特性进行鉴定。结果:从样品中筛选到5株具有较高抑菌活性的乳酸菌菌株,在排除了酸和过氧化氢干扰后,发酵上清液仍有很强的抑菌作用;经蛋白酶处理后,发酵液的抑菌活性显著下降,说明该抑菌物具有蛋白质性质,是一类细菌素。这5株菌对绿脓假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠埃希氏菌均有很强的抑菌活性,并选出抑菌活性最强的菌株E2-2,初步鉴定其为戊糖乳杆菌。
- 陈秀金马丽苹曹力任国艳李智丽李兆周胥传来
- 关键词：细菌素乳酸菌
