国家自然科学基金(30871207)
- 作品数：12 被引量：99H指数：7
- 相关作者：李永翔张尚鑫陆威闫强黄鸿武更多>>
- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院安徽医科大学安徽医科大学附属六安医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 驱动蛋白超家族18A在胃癌组织中的表达及其与患者预后的关系被引量：7
- 2016年
- 目的探讨驱动蛋白超家族（KIF）中kinesin．8家族中的KIFl8A基因蛋白在胃癌组织中的表达及其与患者预后的关系。方法20例胃癌患者的新鲜胃癌组织及相应癌旁正常组织（距离肿瘤〉5em）样本来自安徽医科大学第一附属医院普通外科2015年3—7月期间接受手术治疗者，运用实时荧光定量PCR方法，检测胃癌及相应癌旁组织中KIF18A的mRNA水平；另收集2006年11月至2008年5月期间在安徽医科大学第一附属医院普通外科治疗的129例胃癌患者的临床及随访资料，并将标本数据库中保存的该组患者石蜡包埋胃癌手术标本和23例随机挑选的正常组织（非癌旁胃组织）制成组织芯片，通过免疫组织化学（免疫组化）方法进行染色，并由病理医师确认结果后，检测KIFl8A蛋白在组织芯片中的表达情况，采用χ2检验或Fisher精确概率法分析其表达与胃癌患者临床病理特征及预后的关系；采用Kaplan．Meier法绘制生存曲线，并采用Log—rank检验进行生存比较，Cox比例风险模型进行预后危险因素分析。结果KIFl8AmRNA在20例胃癌新鲜样本中的表达水平中，有16例显示胃癌组织低于癌旁组织。组织芯片中，胃癌组织KIF18A蛋白表达阳性率亦明显低于正常胃组织[45．0％（58／129）比69．6％（16／23），P=0．041]。KIF18A蛋白表达与胃癌浸润深度（P=0．008）和TNM分期（P=0．032）有关。129例胃癌患者中位总生存时间为44．0（95％CI：39．8～49．2）月，其中KIF18A阳性与阴性表达者3年生存率分别为67．2％和36．6％，差异有统计学差异（P=0．020）。Cox回归分析显示，KIFl8A表达是胃癌患者预后的独立保护因素（tCR=0．570，95％C1：0．335．0．970）。结论KIF18A在胃癌组织中表达下调，提示其可能在胃癌的发生过程中具有重要作用；KIFl8A低表达的胃癌患者预后较差，可能是一个潜在的预后标志物。
- 王立杨松孙若川鲁明典吴友亮李永翔
- 关键词：胃肿瘤基因组织芯片预后
- EGFR和K-ras在结直肠癌中的表达及其临床意义被引量：6
- 2013年
- 【目的】检测结直肠癌中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和K-ras蛋白的表达情况,分析其在结直肠癌组织中表达与临床病理特征之间的关系。【方法】应用免疫组化SP法检测80例原发性结直肠癌及其相应的癌旁组织中EGFR和K-ras蛋白的表达情况。【结果】EGFR、K-ras蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达显著高于其在癌旁组织中的表达(P<0.01)。EGFR蛋白的表达与肿瘤病理分化程度、浸润深度以及肿瘤Dukes分期、有无淋巴转移有关,Dukes分期越晚(χ2=8.935,P=0.030),分化程度越低(χ2=11.757,P=0.001),浸润深度越深(χ2=6.888,P=0.009)及有淋巴结转移者(χ2=10.889,P=0.001),其表达越高,而与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位无关(P>0.05);K-ras蛋白仅与肿瘤的病理分化程度有关,分化程度越低(χ2=9.528,P=0.001),其阳性表达越多。结直肠癌组织中EGFR和K-ras蛋白的共表达呈正相关性(r=0.327,P=0.002)。【结论】EGFR和K-ras在结直肠癌中存在共表达现象,二者的高表达可能促进结直肠癌的发生、发展,检测二者可辅助判断患者的预后和转移情况以及指导临床治疗。
- 黄鸿武李永翔
- 关键词：表皮生长因子受体K-RAS结直肠肿瘤免疫组织化学
- 缺氧诱导因子1α在胃癌组织中的表达及其临床意义被引量：14
- 2016年
- 目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）在胃癌组织中的表达和细胞定位以及其与临床病理和临床预后的关系。方法收集2015年7至9月安徽医科大学第-附属医院普外八病区胃癌患者的27对新鲜配对的胃癌组织及癌旁正常组织，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western印迹方法检测胃癌组织和癌旁正常组织中HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平。收集2006年12月至2008年9月安徽医科大学第-附属医院普外科胃癌患者的191份胃癌组织和46份单纯随机抽样法抽取的癌旁正常组织，采用免疫组化方法检测胃癌组织和癌旁正常组织中HIF-1α蛋白的表达及描述微血管密度（MVD）计数的CD34的表达，并且分析HIF-1α在胃癌组织中胞质、胞核的不同定位与MVD、临床病理和临床预后之间的关系。结果PCR定量结果显示，HIF-1αmRNA在胃癌组织中的相对表达量高于癌旁正常组织（0．625±0．170比0．218±0．036，t=2．336，P=0．023）。Western印迹结果显示，HIF-1α蛋白在胃癌组织中的表达强度明显高于癌旁正常组织。免疫组化结果显示，胃癌组织HIF-1d阳性率显著高于癌旁正常组织（67．54％比45．65％，P=0．006）；其中，胃癌组织中的胞质定位阳性率与癌旁正常组织比较差异无统计学意义（35．08％比45．65％，P=0．138）；胞核定位阳性高于癌旁正常组织（37．17％比2．17％，P〈0．001）。组织高分化和TNM临床早期（Ⅰ＋Ⅱ期）患者胃癌组织中胞质HIF-1α的表达阳性率显著高于组织低分化患者（P=0．008）和TNM临床中晚期（Ⅲ＋Ⅳ期）患者（P=0．019）；组织低分化患者胃癌组织中胞核HIF-1α的表达阳性率显著高于组织高分化患者（P=0．043）。胃癌组织中胞核HIF-1α阳性者的MVD平均数（115．6±7．8）显著高于胞质HIF-1α阳性者（93．1±7．5，t=2．077，P=0．040）。中位随访56个月（3—81个月），Kaplan—Meier生存分析L
- 吴友亮胡玲娜郑成德孙若川张尚鑫闫强李永翔
- 关键词：胃肿瘤缺氧诱导因子1Α亚基预后
- 携带Foxp3基因慢病毒载体的构建
- 2011年
- 目的构建携带叉头样转录因子p3(Foxp3)基因的重组慢病毒载体PWPXL-MOD-Foxp3,并包装成慢病毒,为体外获得CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5 Tregs)奠定基础。方法采用双酶切法构建慢病毒表达载体PWPXL-MOD-Foxp3,用磷酸钙沉淀法将包装慢病毒所需的四质粒系统共转染人胚肾细胞293T,慢病毒系统转染48h后收集病毒上清液,纯化、浓缩后采用流式细胞术测定慢病毒滴度。结果重组的慢病毒载体滴度为3.3×108IU/ml。结论成功构建了含有Foxp3基因的高滴度的慢病毒载体,为体外获得CD 4+CD 2+5 Tregs奠定基础。
- 陈春李永翔罗庆礼
- 关键词：慢病毒基因治疗
- HIF-1α、MACC1、FOXO4与胃癌病理和预后的关系被引量：15
- 2015年
- 目的探究低氧诱导因子-1(HIF-1α)、结肠癌转移相关基因1(MACC1)和转录因子FOXO4在胃癌中的表达及与胃癌的临床病理特征和预后的关系。方法收集2006年12月至2008年5月安徽医科大学第一附属医院外科手术切除的原发性胃癌石蜡包埋标本110份,和距癌灶边缘5cm以上且经病理检查确定为正常胃黏膜的癌旁组织标本46份,进行HIF-1α、MACC1和FOXO4蛋白免疫组织化学检测。统计标本来源患者的信息进行HIF-1α、MACC1和FOXO4蛋白与胃癌及转移淋巴结相关性分析。用Kaplan-Meier法分析术后胃癌患者的5年生存率和用Cox法进行生存率多因素回归分析。结果免疫组织化学法检测发现HIF-1α(P<0.001)和MACC1(P<0.001)蛋白在癌灶细胞中的表达明显高于癌旁组织,而FOXO4蛋白在癌灶细胞中的表达明显低于癌旁组织(P<0.001)。统计分析发现细胞分化程度越低、浸润程度越大、伴随着淋巴结转移和TNM分期越高,HIF-1α和MACC1的阳性表达也越高,而FOXO4因子的表达降低。胃癌组织中3种因子的表达存在显著相关性。HIF-1α、MACC1和FOXO4 3种因子的表达明显影响患者术后5年的生存率,而且是决定胃癌患者预后的独立因素。结论 HIF-1α、MACC1和FOXO4在胃癌组织中存在异常表达,与胃癌的临床病理特征和胃癌患者的预后密切相关。
- 付彪李永翔赵志杰
- 关键词：胃癌低氧诱导因子-1
- 大鼠CD4~＋CD25-T细胞的Foxp3基因转染及其表达
- 2012年
- 背景:调节性T细胞在维持机体免疫应答稳态和免疫耐受方面具有非常重要的作用,但外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量极低,且增殖能力较差。目的:以携带Foxp3基因的慢病毒EGFP+载体转染大鼠CD4+CD25-T细胞,观察其在大鼠CD4+CD25-T细胞中的表达。方法:以免疫磁珠两步法分选大鼠CD4+CD25-T细胞,用携带大鼠Foxp3基因的慢病毒载体体外转染分选的细胞,以转染Foxp3基因的CD4+CD25-T细胞为实验组,EGFP空白质粒组及CD4+CD25-T细胞为阴性对照组,CD4+CD25+T细胞为阳性对照组。荧光显微镜和RT-PCR分别从蛋白和mRNA水平检测Foxp3基因的表达。结果与结论:成功完成了免疫磁珠的分选,获得了纯度较高的CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+T细胞,细胞存活率为(94±2)%,慢病毒转染的CD4+CD25-T细胞高表达Foxp3基因。表明以携带Foxp3基因的慢病毒载体系统可有效介导Foxp3基因在大鼠CD4+CD25-T细胞中高表达。
- 黄洋李永翔沈继龙罗庆礼陆威霍星星
- 关键词：慢病毒FOXP3磁珠分选
- 大鼠胰岛分离纯化及功能测定
- 2012年
- 目的探讨分离和纯化高纯度、高活率、功能佳的大鼠胰岛的方法,并为胰岛移植等实验建立基础。方法采用胶原酶P逆行胆总管灌注,消化分离成年大鼠胰岛,Ficoll 400非连续密度梯度离心法纯化胰岛。形态观察,双硫腙(DTZ)染色鉴定胰岛,AO/PI染色检测细胞活率,胰岛素释放试验评价胰岛的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛形态完整,平均获得量为(512±89)IEQ,胰岛细胞纯度大于90%;胰岛细胞活率大于90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为(25.42±4.22)mIU.L-1和(38.75±4.56)mIU.L-1,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论胶原酶P逆行灌注消化胰腺、Ficoll 400非连续密度梯度离心法可获得形态、功能完好、高纯度、高活率的胰岛。
- 陆威李永翔
- 关键词：大鼠胰岛纯化
- THBS2在胃癌组织中的表达与预后的关系被引量：2
- 2014年
- 目的探讨胃癌中血小板反应蛋白2(THBS2)的表达及其临床意义。方法在14对配对胃癌样本及其正常对照中,使用实时荧光定量PCR和Western blot法检测THBS2mRNA和蛋白表达水平。使用129例胃癌样本构成的组织芯片评价THBS2的临床意义。生存分析使用Kaplan-Meier法和Cox比例风险模型。结果 THBS2 mRNA和蛋白表达在14对样本中有12例胃癌样本中都显著低于其正常对照。与Western blot结果一致,组织芯片中胃癌THBS2表达明显低于正常对照(P=0.031)。高表达的THBS2与患者的良好预后密切相关(P=0.002),并且THBS2表达越低胃癌的组织分化程度越低(P=0.005)。结论与正常胃组织相比THBS2在胃癌组织中表达下调,可能在胃癌的发生发展中起到重要的作用,并且可作为一个潜在的胃癌临床预后因子。
- 孙若川李永翔
- 关键词：胃癌预后因子
- 胃肠道恶性肿瘤患者CD4^+ CD25^+调节性T细胞的检测及意义被引量：9
- 2012年
- 目的探讨胃肠道恶性肿瘤患者外周血及病理组织调节性T细胞(Tregs)的表达及临床意义。方法采用流式细胞仪对60例胃肠道恶性肿瘤患者及20例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Tregs/CD4+T)的比率进行检测,采用免疫组化法检测相应患者病理组织中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表达水平。结果胃癌、结直肠癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs/CD4+T细胞的比率分别为(7.46±0.85)%和(7.79±1.19)%,与对照组(6.65±0.79)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。胃癌、结直肠癌病理组织中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表达平均阳性细胞绝对数为(53.52±16.31)和(58.15±14.86),与癌旁组织(6.53±2.68)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌、结直肠癌患者外周血及病理组织中Tregs的高表达可能具有肿瘤免疫的抑制作用,并与肿瘤的发生、发展密切相关。
- 吕承刚李永翔
- 关键词：肿瘤调节性T细胞FOXP3流式细胞术
- 腹腔镜结直肠癌手术研究新进展被引量：17
- 2012年
- 结直肠癌是消化系统中常见的恶性肿瘤之一，在西方国家恶性肿瘤致死病因中占第二位，在我国其发病率也逐年上升，并呈年轻化趋势，就目前的医疗水平而言，最有效的治疗手段仍是行彻底的手术切除。
- 张尚鑫李永翔
- 关键词：腹腔镜结直肠癌
