福建省自然科学基金(2010J01115)
- 作品数：4 被引量：24H指数：2
- 相关作者：严延生翁育伟周朝晖郑奎城陈炜更多>>
- 相关机构：福建省疾病预防控制中心福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肠道病毒71型研究进展被引量：11
- 2014年
- 肠道病毒71型是引起手足口病的主要病原体,感染常导致严重的神经系统症状。最近20年,EV71在亚太地区持续流行并不断引起暴发。由于病毒感染对儿童健康造成的严重危害,EV71已在亚太地区乃至全球引起广泛关注。对病毒以及病毒相关疾病的了解有助于抗病毒药物和疫苗的开发,从而达到预防和控制的目的。本文总结了近年来在EV71流行病学、病毒受体、抗病毒药物和疫苗开发等方面的最新研究进展。
- 翁育伟严延生
- 关键词：肠道病毒71型病毒学流行病学病毒受体抗病毒药物疫苗
- 2010年福建省手足口病患者中柯萨奇B5病毒的序列分析被引量：12
- 2011年
- 目的了解福建省手足口病患者中CVB5(Coxsackie virus B5)病毒的变异及进化特征。方法采集2010年福建省手足口病例呼吸道标本,经RD细胞分离肠道病毒。病毒分离上清用于RNA提取并经RT-PCR法鉴定病毒型别。对鉴定为其他肠道病毒(非EV71或CVA16)的病毒,扩增病毒完整VP1区,扩增产物经克隆、筛选后测序。应用Mega软件对病毒VP1序列进行比较和种系进化分析。结果从2010年福建省手足口病患者中扩增得到6株完整的VP1区序列,序列比对证实有4株CVB5病毒,其他2株为Echo9病毒。序列差异比较表明,分离自福建省的CVB5病毒一致性程度较高,在种系进化上处于独立的进化分支,而与国内其他省份或其他国家的CVB5病毒分离株比较则有较大差异。结论 2010年福建省手足口病患者中存在CVB5病毒的感染,病毒与既往其它省份分离株有较大差异,提示CVB5病毒在福建省具有独特的传播链。
- 翁育伟周朝晖陈炜郑奎城严延生
- 关键词：手足口病
- 抗EV71病毒人源抗体Fab段表达基因的构建及序列分析被引量：1
- 2014年
- 目的从成人外周血淋巴细胞中扩增抗体可变区并构建人源抗体Fab段表达基因,为构建抗EV71病毒人源化单克隆抗体库奠定基础。方法从EV71病毒中和抗体阳性且免疫功能健全的成人全血中,分离淋巴细胞并提取总RNA,经反转录获得cDNA。用一组人IgG Fab基因特异性引物,从合成的cDNA中分别扩增抗体轻、重链可变区,应用重叠PCR技术构建Fab段表达基因,测序分析抗体基因的多样性。结果成功扩增人抗体可变区基因并组装Fab段表达盒,表达盒的长度约为1 500bp,测序分析结果表明,Fab段的多样性可达94.12%。结论成功构建人源抗体Fab段基因,为抗EV71病毒人源性单克隆抗体库的制备奠定了基础。
- 余艳琼翁育伟严延生
- 关键词：肠道病毒71型人源化FAB
- 人源抗EV71病毒中和表位SP70的Fab抗体研制
- 2016年
- 目的构建人源抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库,筛选具有中和活性的人源单克隆抗体,为EV71感染引起的手足口病临床诊断及治疗奠定基础。方法从成人志愿者抗凝血中分离外周淋巴细胞,提取总RNA并逆转录为cDNA。以cDNA为模板,用人源IgG Fab段基因引物扩增轻链及重链Fd区基因,分步克隆至pComb3载体,构建Fab噬菌体抗体库。以SP70为抗原对Fab噬菌体抗体库进行富集筛选,将获得的重组噬菌体感染XL1-Blue菌并诱导表达,用SP70对诱导表达的菌上清进行筛选。结果共获得3株轻、重链基因组合序列不同的克隆,且这3株Fab抗体可特异性结合SP70多肽。结论成功构建人源抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库,并从中筛选出3株针对EV71病毒结构蛋白VP1上中和线性表位SP70的特异性人源Fab抗体,为研发新的手足口病诊断和治疗工具奠定基础。
- 余艳琼翁育伟严延生
- 关键词：EV71病毒噬菌体展示技术抗体FAB段
