“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX09301-002)
- 作品数：11 被引量：56H指数：4
- 相关作者：黄荣清杨建云肖炳坤张红霞龚伟更多>>
- 相关机构：军事医学科学院武警8640部队医院合肥工业大学更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家自然科学基金创新研究群体科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- MJ15对大麻素Ⅰ型受体的阻滞及反相激动作用的研究
- 2011年
- 目的:观察MJ15对大麻素Ⅰ型(cannabinoid receptorsⅠ,CB1)受体的阻滞及反相激动作用。方法:制备小鼠输精管和豚鼠回肠平滑肌的离体标本,观察CB1受体激动剂WIN55212-2以及阻滞剂利莫那班(SR141716A)和MJ15对其收缩特性的影响。结果:CB1受体激动剂WIN55212-2(10-10～10-6 mol.L-1)可抑制电刺激所引起小鼠输精管的收缩作用,呈现明显的剂量依赖性,而SR141716A和MJ15(10-7 mol.L-1)能阻滞WIN55212-2的抑制作用;CB1受体激动剂WIN55212-2可抑制豚鼠回肠和小鼠输精管平滑肌的收缩,而SR141716A和MJ15能促进豚鼠回肠和小鼠输精管平滑肌的收缩。结论:MJ15是CB1受体的阻滞剂,同时具有反相激动作用。
- 曹宁杨洋周晓棉徐成王莉莉
- 分子伴侣及信号肽对毕赤酵母中分泌蛋白表达水平的影响被引量：2
- 2013年
- 目的：探索定位于细胞质、内质网膜及内质网腔中的分子伴侣及其组合对于带有不同信号肽的胞外β-1，3-葡聚糖酶（EXGl）在巴斯德毕赤酵母GS200中表达水平的影响。方法：通过融合PCR技术分别构建带有酵母a交配因子引导肽序列（仅MF）、酵母仅交配因子信号肽序列（ccPre）和重链结合蛋白（Bip）信号肽序列的报告蛋白EXGl的表达质粒pPIC9-EXG1，同时构建分子伴侣基因及其组合的表达质粒pBLArg-IV，然后将2种重组质粒共转化至毕赤酵母宿主菌GS200，转化子经筛选获得共表达菌株，通过测定EXG1酶活来评价分子伴侣与信号肽对其表达水平的影响。结果：细胞质及内质网膜上的分子伴侣Sec61a、Sec61B及胞质中的分子伴侣Ydjl、Ssal、Hsp104及其组合对各种信号肽引导的报告蛋白EXG1的表达水平没有显著影响。然而，内质网腔中的分子伴侣Bip、EroI、PDI与HacI组合能显著提高报告蛋白EXG1的表达水平，其中，以aMF或ctPre作为信号肽引导的报告蛋白EXG1的表达水平分别提高了2．6倍和3．8倍，以Bip信号肽引导的报告蛋白EXGl的表达水平提高了20％～45％，而对于以EXG1自身信号肽引导的报告蛋白EXG1的表达水平没有显著影响。结论：在酵母表达体系中，内质网腔中的分子伴侣是报告蛋白EXG1表达水平的重要影响因素．但分子伴侣对于信号肽的选择性还须进一步证明。
- 杜济良赵洪亮薛冲任敏刘志敏
- 关键词：分子伴侣信号肽蛋白表达巴斯德毕赤酵母
- 褪黑素在抑郁症中的研究被引量：15
- 2010年
- 褪黑素(MT)是松果腺分泌的主要激素,对机体有着广泛的影响。抑郁症患者MT水平降低、生理节律紊乱。对褪黑素在抑郁症中的研究新进展进行了综述。
- 张红霞黄荣清肖炳坤杨建云张振华
- 关键词：褪黑素抑郁症
- 运用新型的反向PCR策略高效构建基因的点突变体被引量：4
- 2011年
- 基因的点突变体在其结构和功能研究中发挥非常关键的作用,如何高效、经济地构建基因点突变体是许多分子生物学研究遇到的棘手问题.以PIAS3点突变体的构建为对象,设计了新型的以反向PCR为基础的点突变构建流程,获得的点突变体质粒经测序后均与预期相符,并在293T细胞内得到了正确表达.以上结果表明,该实验设计方案能够高效、方便地用于基因点突变体的构建,为进一步研究它们的分子功能打下了基础.
- 程龙韩白玉侯莎韩永健徐小洁蒋凯李法曾杨智洪窦京涛吕朝晖张浩叶棋浓
- 关键词：反向PCRPIAS3点突变
- 奥沙利铂水解动力学初步研究被引量：6
- 2011年
- 目的研究奥沙利铂溶液在不同温度、pH条件下水解动力学,以及缓冲盐对药物水解的影响。方法采用高效液相色谱法测定奥沙利铂的水解产物草酸和杂质B含量,进一步推导出奥沙利铂水解过程,并运用经典恒温法探讨其稳定性。结果奥沙利铂水溶液在不同温度、pH条件下的水解反应均符合一级动力学,水解活化能为60.9 kJ.mol-1,且在pH 4.2时最稳定。此外缓冲盐会加速药物的水解作用,缓冲盐浓度与药物水解程度呈正相关。结论奥沙利铂在水溶液中易水解,故在药物的溶解和新制剂研究的过程中都应当严格控制工艺条件。
- 郑仁娟张文成梅兴国龚伟庞柯
- 关键词：水解动力学经典恒温法高效液相色谱法
- 艾滋病治疗药物的研究进展被引量：11
- 2009年
- 艾滋病是一种难以治愈的传染性疾病,随着患病人数的增多,艾滋病已经成为最严重的危害人类健康的全球性流行性疾病之一。笔者通过查阅国内外近期文献,对临床上常用于治疗艾滋病的药物进行了综述,并对今后艾滋病的治疗进行了分析和展望。
- 张红霞黄荣清杨建云肖炳坤
- 关键词：艾滋病药物治疗逆转录酶抑制剂HIV蛋白酶抑制剂
- 胍基化修饰结合稀土金属标记应用于蛋白质相对定量研究被引量：2
- 2010年
- 稀土金属元素标记技术利用双功能试剂二乙三胺五乙酸双酸酐(DTPA双酸酐)将稀土金属元素和目标肽段连接起来作为质量标签,结合基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析实现蛋白质的相对定量研究。为进一步提高标记效率,本研究对反应体系温度、pH值、反应时间和金属标签过量倍数等进行优化,并结合胍基化修饰技术封闭蛋白质酶切肽段中的侧链ε-氨基,使标记反应只发生在末端氨基,提高标记选择性。标准蛋白质实验结果表明,所有酶切肽段胍基化反应效率均大于95%,且胍基化修饰反应对金属标记效率没有影响。对于选定的7个标准蛋白质而言,每个蛋白质都至少有3个肽段可以得到良好的标记结果。对于离子抑制效应带来的干扰,可通过标准曲线进行校正,结果表明,当两种金属离子浓度比小于6时,该效应对蛋白质相对定量没有影响。胍基化修饰结合稀土金属标记方法不仅能在肽段水平实现相对定量,而且能在蛋白质水平实现相对定量。
- 林虹君卫军营贾伟张养军钱小红蔡耘
- HPLC法测定5-单硝酸异山梨酯渗透泵片含量被引量：3
- 2010年
- 目的:建立5-单硝酸异山梨酯渗透泵片含量测定的高效液相色谱法。方法:采用Agela Venusil MPC18(5μm,4.6mm×150mm),以甲醇-水(20∶80)为流动相,流速为1.0mL.min-1,检测波长为210nm。结果:在49.60～148.80μg·mL-1范围内,峰面积与浓度线性关系良好,r=0.9996(n=5);方法的平均回收率为99.1%,其RSD为0.42%;重复性试验的RSD为0.86%(n=9)。结论:该方法准确可靠,专属性强,能满足制剂质量控制的要求。
- 蒋金富龚伟杨中铎姚丽萍梅兴国
- 关键词：高效液相色谱法
- 载胰岛素的生物黏附性聚乳酸-羟基乙酸纳米粒的制备、表征及活性评价被引量：9
- 2011年
- 目的为了提高胰岛素口服给药的生物利用度制备生物黏附性聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒,并与PLGA普通纳米粒相比较,考察纳米粒的理化性质、体外释放、生物活性及活体动物的体内分布。方法采用复乳法制备PLGA普通纳米粒,并经壳聚糖修饰制备生物黏附性纳米粒。粒度及表面电位分析仪测量纳米粒的粒径及Zeta电位;超速离心法测定载药纳米粒的包封率,HPLC测定体外释放特性,建立糖尿病模型大鼠评价口服纳米粒的降血糖水平,活动物成像系统观察口服纳米粒在小鼠体内的分布及转运。结果纳米粒粒径均一,PLGA普通纳米粒及生物黏附性纳米粒的平均粒径分别为(121.3±13)和(134.4±15)nm,Zeta电位分别为(-1.72±0.2)和(43.1±0.3)mV,包封率分别为(46.87±2.23)%和(52.76±3.48)%。纳米粒的体外释放由突释期和缓慢释放期组成,壳聚糖包裹的生物黏附性纳米粒减低了突释量,由(28.34±1.63)%降至(17.92±1.14)%;大鼠灌胃给予15 u.kg-1胰岛素,生物黏附性纳米粒的药理相对生物利用度与普通纳米粒相比具有显著性差异,由(8.3±0.7)%提高至(11.4±0.6)%。壳聚糖修饰的PLGA生物黏附性纳米粒具有生物黏附性且促吸收作用明显,口服给药后8 h仍在小鼠肠道中大量分布。结论壳聚糖修饰的PLGA生物黏附性纳米粒是蛋白多肽类药物口服给药的良好载体。
- 郑爱萍张晓燕毕芸祺孙建绪
- 关键词：胰岛素纳米粒聚乳酸-羟基乙酸共聚物
- 不同缺氧模型对HepG2细胞中miR-210表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨不同缺氧条件对HepG2细胞中miR-210表达水平的影响。方法采用CoCl2、物理缺氧以及Na2SO3 3种不同的缺氧条件诱导HepG2细胞,利用实时定量PCR技术检测不同缺氧模式诱导前后HepG2细胞miR-210等表达变化。结果 3种缺氧模式均可以诱导HepG2细胞miR-210表达上调,其表达与CoCl2及Na2SO3的浓度有剂量依赖关系。结论 CoCl2、物理缺氧以及Na2SO3 3种不同的缺氧条件均可以有效诱导HepG2细胞中miR-210的表达上调,3种模型均可用于缺氧诱导miRNA研究,同时进一步证明miR-210表达上调是由于细胞缺氧所致。
- 李杰曲秋月付汉江铁轶汪渊郑晓飞
- 关键词：缺氧微小RNAHEPG2细胞转录因子聚合酶链反应
