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不同转移潜能乳腺癌细胞中EGFR的表达及意义: 2010年; 目的研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在不同转移潜能乳腺癌细胞中的表达,并探讨其在乳腺癌侵袭转移过程中的作用。方法利用人工基质膜侵袭实验获得高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测两系细胞生长曲线和倍增时间,流式细胞仪检测两系细胞周期,transwell侵袭小室模型比较两系的迁移能力。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western Blot)检测EGFR在两系细胞中的表达。结果利用transwell小室成功筛选出高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系;它们的体外生长速度、倍增时间、细胞周期和侵袭力具有明显差异;RT-PCR和Western Blot均显示在高转移潜能乳腺癌细胞中EGFR在基因和蛋白水平的表达均显著高于低转移乳腺癌细胞。结论 EGFR的过表达与乳腺癌细胞侵袭能力显著性相关,EGFR在乳腺癌侵袭过程中发挥了重要的作用。; 张俊李少林郭启帅曹辉张涛汤为学; 关键词：乳腺癌表皮生长因子受体 TRANSWELL

^(99m)Tc-EGFR-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像研究被引量：2: 2010年; 目的:评价99mTc标记的表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体(Monoclone antibody,McAb)用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像(Radioimmunoimaging,RII)效果,并进行相关比较分析。方法:①建立荷人肺腺癌裸鼠动物模型;②采用99mTc直接标记法标记抗EGFR的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;③利用99mTc-EGFR-McAb进行荷人肺腺癌裸鼠模型的RII及体内分布研究。结果:99mTc对EGFR-McAb的标记率为91.5%±3.8%,标记抗体比活度为(2.8±0.2)MBq/μg,放射化学纯度为96.5%±3.2%。放射免疫显像结果显示,99mTc-EGFR-McAb对肿瘤组织有较高的亲和性,通过感兴趣区(Regional interest,ROI)技术测得T/NT比值为2.74±0.5,明显高于对照组(P<0.05)。标记抗体的体内分布结果与显像结果基本一致。结论:99mTc-EGFR-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的靶/非靶比值,EGFR是肺腺癌放射免疫显像研究值得推荐的目标抗原。; 段东朱玉泉李少林; 关键词：表皮生长因子受体放射免疫显像

^(99)Tc^m-EGFR-McAb及^(99)Tc^m-CD44-McAb单独及联合用于荷人肺腺癌裸鼠的显像研究被引量：3: 2009年; 目的评价99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合应用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像效果。方法建立荷人肺腺癌裸鼠动物模型;采用直接法99Tcm标记抗EGFR和CD44的单克隆抗体,运用柱层析法对标记抗体分离、纯化,并对标记、纯化后的抗体特性进行鉴定;利用99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合进行荷人肺腺癌裸鼠显像及体内分布研究。结果99Tcm对EGFR-McAb和CD44-McAb的标记率分别为(91.5±3.8)%、(92.3±4.1)%,标记抗体比活度分别为(2.8±0.3)MBq/μl、(2.9±0.5)MBq/μl,放射化学纯度分别为(96.5±2.8)%、(96.2±3.1)%。放射免疫显像结果显示,肿瘤组织对2种标记抗体均有较高的摄取,2种标记抗体联合使用肿瘤部位的放射性浓聚明显高于2种标记抗体单独使用,通过ROI技术测得T/NT值分别为(5.58±0.46)、(2.72±0.22)、(2.30±0.18)。标记抗体的体内分布规律与显像结果一致。结论99Tcm-EGFR-McAb、99Tcm-CD44-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的靶/非靶比值,2种标记抗体的联合应用,可在一定程度上提高靶/非靶比值,优于一种标记抗体的单独使用。; 段东李少林朱玉泉王树斌; 关键词：CD44 锝

皮质肌动蛋白在不同转移潜能乳腺癌细胞中的表达及意义被引量：1: 2010年; 目的筛选不同转移潜能的乳腺癌细胞亚系,并探讨皮质肌动蛋白(cortactin)在乳腺癌细胞增殖和侵袭过程中的作用。方法经过连续人工基质膜侵袭实验后获得高、低转移潜能的乳腺癌细胞亚系,通过透射电镜观察比较两系细胞的超微结构,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测两系细胞增殖能力,流式细胞仪检测两系细胞周期,Transwell侵袭小室模型比较两系的迁移能力。应用免疫细胞化学法、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹分析法检测cortactin蛋白在两系细胞中的表达。结果利用人工基质膜侵袭实验筛选出高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系,并且两系细胞形态上无明显差异。MTT实验显示高转移潜能细胞体外生长速度显著快于低转移潜能细胞(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,高转移潜能细胞亚系与低转移潜能细胞亚系相比,G0/G1期细胞前者比后者少[(52.67±3.69)%vs(64.46±2.79)%],而S期细胞前者比后者多[(30.53±6.19)%vs(24.63±2.04)%]。高转移潜能细胞亚系增殖指数(PI)高于低转移细胞亚系[(47.32±3.69)%vs(35.53±2.80)%,P<0.05],侵袭能力显著强于低转移潜能细胞亚系[(61.46±7.08)vs(25.32±4.87)个/视野,P<0.05]。免疫组化、RT-PCR和蛋白质印迹分析均显示在高转移潜能细胞亚系中cortactin在基因和蛋白水平的表达均高于低转移潜能细胞亚系(P<0.05)。结论 Cortactin的过表达与乳腺癌的增殖和转移过程密切相关。; 张俊曹辉郭启帅张涛汤为学李少林; 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移细胞增殖

Ezrin在高、低转移潜能乳腺癌细胞中的表达及其意义被引量：1: 2009年; 目的:探讨埃兹蛋白(Ezrin)对人高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用乳腺癌细胞系MDA-MB-435s,利用细胞穿透人工基底膜能力的差异筛选出具有高、低转移潜能的乳腺癌细胞系,采用免疫组织化学法、RT-PCR、Western印迹法和放射免疫显像(radioimmunoimaging,RII)方法检测Ezrin蛋白在高、低转移潜能乳腺癌细胞中的表达情况。采用MTT法检测细胞增殖能力及黏附率。结果:经人工基底膜成功分离出具有高、低转移潜能的MDA-MB-435s细胞。高转移潜能MDA-MB-435s细胞中Ezrin在基因和蛋白水平的表达均显著高于低转移潜能的MDA-MB-435s细胞,差异有统计学意义(P值均<0.001);高转移潜能MDA-MB-435s细胞的增殖能力和黏附率均高于低转移潜能的MDA-MB-435s细胞,差异有统计学意义(P值均<0.001);131I标记的抗Ezrin抗体在接种高转移潜能MDA-MB-435s细胞的裸鼠肿瘤部位的放射性浓聚要强于接种低转移潜能MDA-MB-435s细胞的裸鼠肿瘤部位,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:Ezrin在高转移潜能乳腺癌细胞中的表达水平明显高于低转移潜能细胞,2者的增殖、黏附和侵袭力都有明显差异,上述结果为Ezrin用于乳腺癌的诊断和治疗提供了理论依据。; 蔡辉张涛汤为学李少林; 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移 EZRIN

Paxillin在高、低转移潜能乳腺癌中的表达及意义被引量：4: 2010年; 目的研究paxillin在人高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系中的表达以及对肿瘤转移、黏附的影响。方法以乳腺癌细胞系MDA-MB-435S为研究对象,利用细胞穿透人工基底膜能力的差异筛选出高、低转移潜能的乳腺癌细胞系,利用免疫组化、免疫印迹(Western blot)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测paxillin在高、低转移潜能乳腺癌细胞中的表达。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞黏附率。结果免疫组化、Western blot、RT-PCR检测显示在高转移潜能乳腺癌细胞中paxillin在基因和蛋白水平的表达均高于低转移潜能乳腺癌细胞,差异具有统计学意义(P均<0.01)。MTT法检测高转移潜能乳腺癌细胞的黏附率高于低转移潜能乳腺癌细胞,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论Paxillin在人乳腺癌转移和黏附过程中发挥重要作用,可能成为抑制肿瘤增殖和转移的关键性分子。; 蔡辉张涛汤为学李少林; 关键词：乳腺癌 PAXILLIN 肿瘤转移

RNA干扰靶向抑制胃癌细胞株SGC7901 hTERT基因表达被引量：5: 2006年; 背景与目的：胃癌是全人类常见恶性肿瘤之一。在我国，胃癌居各种癌症死亡之首，其总体五年生存率仅15％～20％。在目前尚无有效一级预防措施的情况下，积极探讨有效防治胃癌的方法成为必然趋势。本研究利用RNA干扰稳定筛选-抑制技术，抑制人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因表达，探讨靶向hTERT基因RNAi对胃癌细胞增殖的抑制效应。方法：设计靶向hTERT基因的小干扰RNA，构建重组表达质粒pGenesil—shRNA—hTERT并导入人胃癌细胞系SGC7901细胞株，经G418筛选，建立稳定表达siRNA—hTERT的细胞株。采用real time RT—PCR、MTT和PCR—TRAP法同时检测pGenesil-shRNA—hTERT稳定抑制组和未处理SGC7901细胞组hTERT基因表达、端粒酶活性及细胞增殖变化。结果：在稳定表达pGenesil—shRNA—hTERT的SGC7901细胞株中，RNAi效力持续、稳定存在，hTERT mRNA表达、端粒酶活性明显降低，瘤细胞增殖被抑制。结论：RNA干扰能持续、稳定地抑制靶基因hTERT mRNA表达及肿瘤细胞增殖，是潜在的肿瘤基因治疗新方法。; 蒋明东彭志平尹晓玲李少林仝蜀生鄢勇王正洪; 关键词：RNAI 胃癌细胞株 HTERT

人肺腺癌细胞系A549与正常支气管上皮细胞系HBE的比较蛋白质组学研究: 2011年; 目的利用蛋白质组学技术建立人肺腺癌细胞系A549与正常支气管上皮细胞系HBE的差异蛋白质表达谱,并对部分在A549细胞中表达明显上调的蛋白质点进行鉴定。方法提取A549和HBE细胞的总蛋白,进行双向凝胶电泳(2-DE),经图像分析识别差异表达蛋白质点,再应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定出部份在A549细胞中表达明显上调的蛋白质。结果 (1)分析两种细胞系的2-DE图谱,发现差异表达蛋白质点共256个,仅在A549细胞中表达的蛋白质点15个,仅在HBE细胞中表达的蛋白质点21个;(2)通过肽质量指纹图谱分析鉴定出在A549细胞中表达明显上调的7种蛋白质,分别是表皮生长因子受体(EGFR)、鼠双微粒体2蛋白(MDM2)蛋白、CD44蛋白、细胞骨架蛋白细胞角蛋白8(CK8)、不均一性核糖体蛋白H(hnRNP H)、热休克蛋白60(HSP60)、磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)。结论运用蛋白质组学技术成功获得了A549细胞与HBE细胞的2-DE图谱,并鉴定出部分在A549细胞中表达明显上调的蛋白质,为进一步筛选用于人肺腺癌诊断、治疗及预后评估的分子标志物奠定了一定的基础。; 段东李少林朱玉泉王树兵; 关键词：肺肿瘤蛋白质组学

超声造影剂联合超声介导耐药基因反义寡脱氧核苷酸转染肝癌细胞逆转多药耐药效应的研究被引量：1: 2008年; 目的探讨超声造影剂联合超声介导mdr1、mrp基因反义寡脱氧核苷酸（ASODN）转染QGY耐药肝癌细胞对多药耐药（MDR）的逆转。方法分别将mdr1、mrp-ASODN＋超声造影剂＋超声辐照转染QGY／CDDP肝癌细胞，检测转染后细胞贴壁率、药物敏感性、耐药基因mRNA表达和相应耐药蛋白表达变化。结果mdr1—ASODN转染后，细胞贴壁率和耐药基因mRNA表达变化大（P〈0．05），细胞药物敏感性和耐药蛋白P-gp、MRP表达变化小（P〉0．05）。实验组（2组）作用更大（P〈0．05）。mrp—As0DN转染后，细胞贴壁率、药物敏感性、耐药基因的mRNA表达和耐药蛋白P-gp、MRP表达均变化明显（P〈（）．05），实验组（2组）作用更大（P〈0．05）。结论mdrl、mrp—ASODN＋超声造影剂＋超声辐照能够低毒部分逆转肝癌细胞MDR，是潜在肿瘤基因治疗方法。; 蒋明东向廷秀李少林鄢勇王正洪方亮黄小波赵瑜; 关键词：造影剂基因转移技术

荷人肺腺癌裸鼠的^(99)Tc^m-CD44-McAb放射免疫显像: 2009年; 采用99Tcm直接标记法标记抗CD44的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;利用99Tcm-CD44-McAb对荷人肺腺癌裸鼠进行放射免疫显像及体内分布研究。结果显示,99Tcm-CD44-McAb的标记率为92.3%±4.1%,比活度为2.9±0.5 TBq/g,放化纯度为96.2%±3.1%。放射免疫显像结果显示,肿瘤组织对99Tcm-CD44-McAb有较高的摄取,通过感兴趣区(Regional Interest,ROI)技术测得肿瘤部位与对侧相应部位的放射性摄取比(T/NT)为2.29±0.56,明显高于对照组(P<0.05)。标记抗体的小鼠体内分布结果与显像结果基本一致。以上研究结果说明,99Tcm-CD44-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的T/NT,CD44是肺腺癌放射免疫显像研究值得推荐的目标抗原之一。; 段东朱玉泉李少林王树兵; 关键词：放射免疫显像肺腺癌

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