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山葡萄转录因子CBF1基因的克隆及其遗传转化体系被引量：1: 2014年; 根据山葡萄的CBF1基因序列设计一对特异引物,克隆出山葡萄（Vitis amurensis）栽培品种‘双优’的抗寒转录因子CBF1基因,并将其构建到pBI121表达载体中,获得山葡萄转录因子CBF1基因的植物表达载体,命名为pBI121-ViCBF1,利用农杆菌介导叶盘转化‘巨峰’葡萄以研究高效的‘巨峰’葡萄转化体系.结果表明,以农杆菌LBA4404为介导菌株,以‘巨峰’葡萄叶片为外植体、3d为预培养时间和4～5 d共培养时间、400 mg·L-1羧苄青霉素,50 mg·L-1卡那霉素筛选浓度转化效果较好,并已筛选到6株转基因植株,PCR检测均为阳性,为提高‘巨峰’葡萄的抗寒性建立了初步的技术基础.; 刘洋; 关键词：山葡萄转录因子

山葡萄几丁质酶基因VCH3启动子的分离及鉴定(英文)被引量：9: 2005年; 利用接头PCR技术首次分离了长度为1 216bp 的“双优”山葡萄(Vitis amurensis Rupr.) classIII几丁质酶基因VCH3上游启动子序列(GenBank登录号AF441123),并用引物延伸方法鉴定了该启动子的转录起始位点,为5'-ATCAAGCAC-3'序列中的第二个A。序列分析结果表明,代表真核基因启动子特征的CAAT 盒和TATA 盒分别位于VCH3启动子转录起始位点上游?122和?29处。另外,在转录起始位点上游?1 181 bp 和?293 bp 处各有一个水杨酸(SA)响应的顺式作用元件TGACG。为了鉴定该启动子的功能,将该启动子连接到β-葡糖苷酸酶基因(GUS)编码区的上游构建了VCH3启动子-GUS融合基因,并用农杆菌介导叶盘转化法将该融合基因转入烟草栽培品种NC89 中。SA处理的转基因烟草根系和叶片GUS酶活性的荧光和组织化学检测结果表明VCH3启动子的驱动作用被SA诱导,因而该启动子在基因工程中将具有潜在的应用价值。; 李海燕齐洁束怀瑞郑成超李玉; 关键词：山葡萄

植物低温诱导转录因子CBF研究进展被引量：6: 2007年; 植物在低温驯化过程中能诱导许多基因的表达。其中CBF转录因子是目前植物抗寒分子生物学领域研究的热点之一。它通过与低温诱导基因启动子区域中的CRT/DRE调控元件结合,调控一系列低温诱导基因的表达,从而提高植物的抗寒性。对植物低温诱导CBF转录因子的结构、功能及其表达调控等方面的研究进展进行了综述。; 刘洋吴学彦李海燕; 关键词：CBF转录因子抗寒性

山葡萄“双优”再生系统建立的研究被引量：2: 2007年; 以山葡萄"双优"茎段、叶柄和叶片为材料,采用不同的激素浓度进行再生体系的建立。结果表明,以山葡萄茎段为外植体,MS为培养基,激素浓度2.0 mg/L的BA和0.02～0.05 mg/L的IBA再生,获得了山葡萄再生芽,分化率达到6.67%～8.36%,激素浓度为0.2mg/L的IBA进行生根培养,经过15～20 d培养,生根率可达100%,获得了山葡萄再生植株。; 刘洋吴学彦李海燕; 关键词：山葡萄茎段叶柄

山葡萄转录因子CBF1基因的克隆及序列分析: 2013年; 采用生物信息学方法比对多种低温诱导植物的CBF1同源基因,在其保守区域设计一对兼并引物,在特殊的RT-PCR条件下,结合反向PCR技术对山葡萄低温诱导转录因子CBF1的全长基因进行了克隆,经测序和序列分析显示,山葡萄转录因子CBF1基因ORF长为753 bp,无内含子,编码251个氨基酸,编码蛋白分子量和等电点分别为27.503 kD和3.11,属酸性蛋白质。应用Blast软件将山葡萄转录因子CBF1基因与大麦(Hordeum vulquare)、水稻(Oryza sativa)等10种植物CBF1基因氨基酸序列比较同源性达到80.7%,且在AP2/EREBP结构域有高度的保守性,表明已成功克隆山葡萄(Vitis amurensis)转录因子CBF1基因,将其命名为ViCBF1,在GenBank上的登录号为DQ517296。; 刘洋孙佳帝; 关键词：转录因子 CBF1基因克隆

银中杨DREB2A基因RNA干扰载体构建及转化农杆菌的研究被引量：1: 2010年; 应用Gateway技术体系替代传统载体构建方法,构建了银中杨(Populus albaxp)DREB2A基因的RNA干扰载体,并将其转入根癌农杆菌EHA105中。该RNAi表达载体的构建对进一步研究杨树DREB2A转录因子基因的功能具有重要意义。; 王磊王磊张闯迟晓娟宋黎黎张闯; 关键词：RNA干扰载体 GATEWAY技术

桔梗无性快繁技术研究被引量：2: 2004年; 以桔梗的叶片、茎段、胚轴为外植体,MS为基本培养基进行了桔梗无性快繁技术研究。确定了MS+6 BA0 5mg L+IAA0 1mg L的复合培养基为最佳的丛生芽诱导培养基,MS+6 BA0 2mg L+IAA0 1mg L为最佳壮苗培养基,1 2MS+NAA0 2mg L为最佳生根培养基,生根率达到100%。; 江源刘思言王静王义张美萍; 关键词：桔梗无性快繁愈伤组织植株再生

山葡萄几丁质酶基因VCH3的克隆及植物表达载体的构建被引量：2: 2005年; 利用RT-PCR方法克隆了山葡萄几丁质酶基因VCH3的全长cDNA片段,并将该基因构建到双元载体pBI121质粒35S启动子下游,形成重组质粒pBIVCH3。通过冻融法将该重组质粒转化到根癌农杆菌LBA4404中,获得了植物表达载体。; 江源李海燕李大征李艳杰; 关键词：山葡萄克隆植物表达载体

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