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国家教育部博士点基金(20100171110058)
作品数:
2
被引量:9
H指数:2
相关作者:
肖游君
梁柳琴
许韩师
杨岫岩
叶玉津
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相关机构:
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RhoA/Rho激酶对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞迁移、侵袭和增殖的调控
被引量:3
2013年
目的探讨RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路对类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLS)迁移、侵袭和增殖的调控作用。方法RA患者FLS来源于11例活动性RA患者滑膜组织。另设骨关节炎(OA)组和外伤(正常对照组)为对照。用不同浓度的RhoA抑制剂C3转化酶或ROCK抑制剂Y27632处理RA患者FLS,在迁移和侵袭实验中用10%胎牛血清(FBS)作为诱导物,在增殖实验中以IL-1β为刺激剂。RhoA活性检测采用pulldown方法;ROCK活性用磷酸化肌球蛋白结合亚单位1(MYPT1)蛋白表达来表示,磷酸化MYPT1蛋白检测采用免疫印迹法;FLS迁移和侵袭能力采用Transwell小室测定;细胞增殖检测采用MTT法。结果新鲜分离的RA患者FLS中RhoA和ROCK活性显著高于OA患者和正常对照组,单独FBS诱导组、C3转化酶处理组和Y27632处理组迁移细胞数分别为85±14、51±15、42±11,侵袭Matrigel基质细胞数分别为64±13、39±12、26±9,单独FBS诱导组与其他两组比较差异均有统计学意义(均P〈0.05),C3转化酶和Y27632对RAFLS的细胞骨架的聚合亦有显著的抑制作用。c3转化酶和Y27632呈剂量依赖性地抑制RAFLS增殖。结论RhoA/ROCK信号通路对RAFLS的迁移、侵袭和增殖具有调控作用,通过抑制过度活化的ROCK可能有利于抑制RA关节破坏。
梁柳琴
黄明城
邱茜
肖游君
孙孟颖
奄锖晋
叶玉津
范瑾瑾
杨岫岩
许韩师
关键词:
关节炎
类风湿
滑膜
酶类
RhoA/ROCK信号通路对TLR-2配体诱导的类风湿关节炎患者成纤维滑膜细胞分泌趋化因子的调控作用
被引量:7
2011年
目的 研究RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路对Toll样受体2(TLR-2)配体诱导的类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌趋化因子的影响.方法 RA FLS来源于活动性RA患者滑膜组织;肽聚糖被用于TLR-2配体;RhoA活性检测采用pull down方法;ROCK活性用磷酸化肌球蛋白结合亚单位1(MYPT1)蛋白表达来表示,磷酸化MYPT1蛋白检测采用免疫印迹法;细胞活性检测采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法,趋化因子水平采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测.结果 肽聚糖(5 mg/L)刺激使体外培养的RA FLS分泌白细胞介素8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2)和受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)明显增高,对RhoA和ROCK活化也有显著的刺激作用,肽聚糖诱导的上述作用能被TLR-2单克隆抗体所阻抑.RhoA抑制剂C3转化酶和ROCK抑制剂Y27632对PG诱导的IL-8、MCP-2和RANTES等趋化因子分泌有显著的抑制作用.结论 RhoA/ROCK信号通路对TLR2介导的RA FLS分泌趋化因子具有调控作用,通过抑制该通路活化可能有利于RA的治疗.
梁柳琴
肖游君
付迪
林浩博
杨彦龙
叶玉津
詹钟平
范瑾瑾
杨岫岩
许韩师
关键词:
成纤维样滑膜细胞
趋化因子
RHO
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