国家自然科学基金(30400367)
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 相关作者：周晓红应彩云杨培梁钟莉莉顾晓敏更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医科大学南方医院中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 快速高效植物瞬时表达的实验室烟草无土栽培体系的构建被引量：3
- 2012年
- 目的构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系。方法优化烟草的无土栽培条件,基于Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达绿色荧光蛋白(GFP)的影响,以Western blot和ELISA分析GFP表达情况。结果烟草无土培育的最佳条件为:光照强度9000LX/层,光照时间16 h/d,日/夜温度28/21℃,相对湿度80%。侵染工程菌的最佳D600为0.8;叶片采收最佳时间为侵染后4 d;本明烟和豫烟5号最佳侵染时机分别为第6周和第5周;工程菌pBYGFPDsRed.R/LBA4404侵染的本明烟和豫烟5号均能高效表达GFP;豫烟5号的平均生物量高于本明烟。结论基于人工气候箱成功构建了实验室烟草无土栽培体系,并可实现GFP在本明烟和豫烟5号的快速高效表达。
- 莫倩珍麦荣嘉杨志晓陈敏芳杨铁钊赖华芳杨培梁陈强周晓红
- 关键词：烟草无土栽培绿色荧光蛋白
- 转基因植物疫苗应用于1型糖尿病免疫干预的研究进展
- 2008年
- 1型糖尿病（T1DM）的发生与胰岛β细胞的可溶性抗原如胰岛素、谷氨酸脱羧酶、酪氨酸磷酸酶等密切相关，是一种自身免疫性疾病。诱导免疫耐受可有效维持体内的免疫平衡，以免疫干预T1DM的发生与发展，已成为目前T1DM防治研究的重点方向之一。近年来，以自身抗原经各种途径在实验动物模型中诱导免疫耐受，相继有获得成功的报道。利用植物转基因技术，将谷氨酸脱羧酶等自身免疫抗原基因转入植物细胞内，使其表达相应抗原，通过口服食用此转基因植物组织以诱导机体产生免疫耐受，为T1DM提供了一条新的防治途径。
- 应彩云周晓红
- 关键词：1型糖尿病胰岛素谷氨酸脱羧酶转基因植物
- 弓形虫多表位抗原基因DNA疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护性研究被引量：3
- 2007年
- 目的以弓形虫多表位抗原基因DNA疫苗免疫小鼠,评价该疫苗对弓形虫感染产生的免疫保护作用。方法利用PCR技术和亚克隆技术,构建弓形虫多表位抗原基因真核表达重组质粒pcDNA3-MAG,以质粒纯化试剂盒大量制备质粒,同时分别以载体质粒pcDNA3和PBS液为空质粒对照和空白对照,与lipofectin按5∶2的比例混合后,经股四头肌注射免疫小鼠,间隔两周,连续免疫3次,通过检测小鼠血清中特异的IgG抗体、IFN-γ和IL-4含量,评价疫苗产生的体液免疫和细胞免疫水平。以强毒型RH株弓形虫感染免疫小鼠,统计小鼠的存活时间,评价疫苗产生的免疫保护性。结果经双酶切及DNA测序鉴定,所构建的重组质粒pcDNA3-MAG读码框架正确。与免疫前及载体质粒和空白对照组相比,小鼠免疫后产生特异性IgG抗体,并引发高水平IFN-γ。攻虫后,实验组较对照组小鼠存活时间明显延长。结论弓形虫多表位抗原基因DNA能诱导BALB/c系小鼠产生特异的细胞免疫和体液免疫,对弓形虫感染可产生一定的免疫保护性。
- 杨培梁陈晓光李华周晓红彭鸿娟吴焜
- 关键词：弓形虫多表位抗原DNA疫苗免疫
- 弓形虫mMAG嵌合型类病毒颗粒在烟草中的高效瞬时表达研究
- 弓形虫是一种重要的机会性致病原虫,可引起人兽共患弓形虫病,研制价廉易用的动物用弓形虫转基因植物口服疫苗,对于保护畜牧业和切断人类弓形虫病传播途径,具有重要意义。Magnifection新型植物高效瞬时表达技术平台的成功构...
- 莫倩珍麦荣嘉陈敏芳赖华芳陈强周晓红
- 关键词：转基因植物无土栽培
- 文献传递
- 冬虫夏草调节细胞凋亡机制的研究进展被引量：4
- 2008年
- 冬虫夏草是我国特有名贵中药材，具有广谱的抗肿瘤作用，诱导肿瘤细胞凋亡是其主要机制之一；冬虫夏草对糖尿病等疾病具有一定的疗效作用也与其抑制相关炎性细胞高水平凋亡相关。冬虫夏草诱导肿瘤细胞、免疫细胞等凋亡呈现多靶点、多环节、多效应的特点，其对多种凋亡相关细胞生物因子的调控及不同细胞信号传导通路的影响，诱导不同的凋亡级联反应发生，从而对机体细胞凋亡系统进行适宜调节以发挥其药理作用，如表现为对肿瘤细胞凋亡的诱导而对免疫细胞等凋亡的抑制等。但是，相关研究目前仍集中于对其抗肿瘤、抗病现象的观察及少数重要凋亡指标的检测，而细胞凋亡的过程是多层次、多因素、多基因协同作用的结果，其确切作用及调控机制十分复杂，冬虫夏草重要活性成份调节细胞凋亡分子机制仍有待深入探索。
- 项鹏周晓红
- 关键词：冬虫夏草细胞凋亡抗肿瘤
- 番茄遗传转化筛选及其子代选育体系的优化研究被引量：8
- 2008年
- 目的以弓形虫多表位抗原基因(MAG)和截短的速殖子主要表面抗原1(tSAG1)为插入子建立优化的番茄遗传转化筛选及其子代选育体系。方法从培养基激素配方、番茄外植体选择等方面进行番茄再生体系的优化。自番茄品种、外植体选材、培养温度、培养基激素配方以及在共培养时是否加入乙酰丁香酮(AS)等进行以农杆菌介导的番茄基因组稳定转化体系的优化。采用不同浓度卡那霉素抗性压力对转基因小苗进行根筛选诱导的比对。转基因番茄幼苗练苗移栽开花结果后收集种子,以无菌播种卡那霉素抗性筛选法进行番茄转基因植株子代的选育。结果子叶较下胚轴具有更强的再生能力,在优化的番茄再生培养基ZB3中,番茄子叶可达到98%(59/60)的高频再生芽萌发率。番茄的转化体系优化,培养基激素配方、培养温度是番茄转化芽诱导过程中的关键影响因素,(23±1)℃能显著提高转化芽的萌发率,AS的施加亦能显著提高番茄转化芽萌发率,Zhongshu No.5番茄子叶于ZB2培养基和(23±1)℃的条件下转化芽萌发率为35%(28/81)。80mg/L卡那霉素抗性进行HK种番茄转化小苗根的筛选诱导比较适宜,生根率为48%(31/65)。抗性苗移栽成活,正常开花结果的转化植株117株。无菌播种,卡那霉素浓度≥100mg/L时能显著抑制非转基因番茄种子的发育尤其是根的萌发与植株的伸长,根出现紫化且无侧根生长;将转基因番茄种子置于150mg/L卡那霉素抗性浓度下培养,能有效进行转基因植株后代遗传分离的选育。结论成功建立番茄高频再生体系以及优化的番茄转化、抗性筛选及其转基因植株子代的选育体系。
- 应彩云黄小琴郭瑜琪钟莉莉刘艳黎事伦顾晓敏周晓红
- 关键词：转基因番茄弓形虫
- 植物偏爱密码子优化HPV18L1全长基因的重叠PCR合成被引量：6
- 2009年
- 目的以重叠PCR方法合成植物偏爱密码子优化后的人乳头瘤病毒18L1全长基因。方法自GenBank获取国内外所发布的HPV18L1全长基因序列,经生物信息学分析后选定目标序列,经Synthetic Gene Designer及JCat(JavaCodon Adaptation Tool)分析软件将此序列原始密码子改造为植物偏爱密码子,在C端加入蛋白纯化标签His-tag,获得改造后的HPV18L1全长序列(mHPV18L1)。结合酶切位点分析将mHPV18L1设计为204～477bp的五个大片段LS1-LS5,再将每个大片段分割成57～59bp的5～11个寡聚核苷酸短链,设计合成5对内引物和1对外引物,经重叠PCR扩增获得mHPV18L1全长基因,纯化后将其克隆入pMD18T载体,酶切、测序鉴定插入子。结果以重叠PCR成功扩增获得mHPV18L1全长,pMD18T-mHPV18L1重组质粒经酶切、PCR鉴定均得到预期1749bp大小的片段,并经测序验证。结论获得以植物偏爱密码子进行序列优化的mHPV18L1全长基因及其重组质粒pMD18T-mHPV18L1,为后续mHPV18L1的植物转化研究奠定了一定的工作基础。
- 赵莹张丽仪刘昌政周晓红
- 关键词：重叠PCR密码子优化
