重庆市科委地方病重大专项基金(2008AA5008)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
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- 粪肠球菌介导的铜绿假单胞菌重组疫苗诱导小鼠的保护力及细胞免疫应答被引量：6
- 2022年
- 目的研究基于粪肠球菌(Ef)载体的铜绿假单胞菌(Pa)重组疫苗rEf(pGEX-LasR)诱导小鼠的保护力及细胞免疫应答。方法分别将5×10^(9)CFU的疫苗株、空载体株和Ef株菌液口服灌胃免疫BALB/c鼠,每周3次,连续3周;初次免疫后4周用5×10^(7)CFU的Pa01株菌液滴鼻攻击小鼠,2周后杀鼠剖检;菌落计数检测小鼠肺细菌负荷,MTT法检测小鼠脾细胞增殖水平,荧光激活细胞分选仪(FACS)检测小鼠脾细胞CD4^(+)/CD8^(+)T细胞亚群和脾细胞凋亡水平;采用PaAg体外刺激培养小鼠脾细胞48 h,PCR扩增IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因。结果疫苗组、空载体组和Ef对照组小鼠肺细菌负荷分别为(7.616±0.010)lgCFU/g、(8.876±0.011)lgCFU/g和(8.902±0.010)lgCFU/g,疫苗组显著降低(P<0.01);与空载体组和Ef对照组比较,疫苗组小鼠脾细胞CD4^(+)T细胞亚群显著增加(P<0.01),脾细胞增殖活性增强(P<0.01)、凋亡率减低(P<0.01);疫苗组小鼠脾细胞DNA可扩增出IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因条带,空载体组和对照组未扩增出条带。结论Pa重组疫苗rEf(pGEX-LasR)可诱导小鼠产生细胞免疫应答,促进小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因的表达,降低Pa01攻击小鼠后的肺细菌负荷。
- 欧兴坤李文桂
- 关键词：载体疫苗粪肠球菌细胞免疫
- 以粪肠球菌为载体的铜绿假单胞菌疫苗诱导小鼠的保护力及体液免疫应答被引量：4
- 2022年
- 目的 研究以粪肠球菌(Ef)为载体的铜绿假单胞菌(Pa)LasR蛋白重组疫苗rEf(pGEX-LasR)免疫小鼠的保护作用。方法 分别将重组疫苗、空载体菌株和Ef以5×10^(9)CFU的剂量口服灌胃免疫BALB/c小鼠,每周3次,连续3周,第4周采用5×10^(7)CFU剂量的Pa(Pa01株)菌液滴鼻攻击小鼠。攻击后2周检测小鼠肺细菌负荷,并于免疫前、初次免疫后4周和攻击后2周采集小鼠血液,ELISA检测血清特异性IgA、IgE、IgG及其亚类(IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3)水平。结果 疫苗组、空载体组和Ef对照组小鼠肺细菌负荷分别为(7.62±0.01)lgCFU/g、(8.88±0.01)lgCFU/g和(8.90±0.01)lgCFU/g,疫苗组明显低于空载体组和Ef对照组(P<0.001)。与免疫前比较,疫苗组小鼠血清IgG及其亚类和IgE在免疫后4周显著升高,在攻击后2周进一步升高(均P<0.01),且在初免后4周及攻击后2周均显著高于空载体组和Ef对照组(均P<0.01)。三组小鼠免疫前后均未检测出血清特异性IgA。结论 Pa重组疫苗rEf(pGEX-LasR)可诱导小鼠产生体液免疫应答,降低Pa攻击小鼠后的肺细菌负荷。
- 欧兴坤李文桂
- 关键词：铜绿假单胞菌粪肠球菌体液免疫
