国家自然科学基金(81172237)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：于海清罗雄李茂仙杨蕾周会松更多>>
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- β3肾上腺素能受体mRNA在肥胖倾向型小鼠附睾脂肪垫中表达上调被引量：1
- 2013年
- 目的:观察肥胖倾向型小鼠附睾脂肪垫中β3肾上腺素能受体(β3-AR)mRNA水平。方法:通过高脂饮食诱导肥胖倾向小鼠模型,正常饮食组作为对照(n=8),高脂饮食组(n=8)饲喂5周,鉴定为肥胖倾向型小鼠,获得附睾脂肪垫组织。逆转录和半定量聚合酶链反应(SQ-PCR)法分析β3-AR mRNA的表达,GAPDH mRNA为内参照。结果:肥胖倾向型和非倾向型小鼠脂肪垫β3-AR/GAPDH mRNA比分别为1.98±0.34和1.19±0.26,肥胖倾向型小鼠附睾脂肪垫β3-AR mRNA的表达水平上调具有统计学意义(P<0.01)。结论:β3-AR与脂肪代谢密切相关,可望作为治疗干预人类肥胖和Ⅱ型糖尿病的潜在靶点。
- 罗雄唐小军梅志强杨蕾李茂仙周会松于海清
- 关键词：Β3肾上腺素能受体
- 樟脑对MRC-5细胞p53 mRNA表达的影响
- 2013年
- 目的:检测樟脑(C10H16O)处理MRC-5细胞对p53基因mRNA表达水平的影响。方法:DMEM培养基培养MRC-5细胞,设试验组和对照组。1×105细胞/孔的细胞密度接种于6孔板,每组设三复孔,180μg.ml-1的樟脑分别作用MRC-5细胞24h和48h。MTT法测定细胞相对增殖百分率。提取细胞总RNA,逆转录得cDNA。GAPDH mRNA作为内参,p53/GAPDH mRNA为相对表达量,反转录半定量聚合酶链式反应(SQ-PCR)分析MRC-5细胞中p53表达水平,试验重复三次。结果:180μg.ml-1樟脑作用MRC-5细胞24h和48h后,细胞相对增殖百分率均高于90%。给药24h,对照组和试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平分别为0.81±0.24和0.56±0.13(P>0.05)。给药48h,对照组和试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平分别为0.76±0.11和1.08±0.19(P>0.05)。给药24h和48h,试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:180μg.ml-1浓度的樟脑对MRC-5为安全给药浓度。给药后MRC-5细胞p53 mRNA表达水平上调有统计学意义,提示樟脑可能间接影响p53基因的表达调控。
- 刘晓燕段承刚唐小军蔡仕钰郑波罗映赖国超申淑琬于海清
- 关键词：樟脑P53
- 肿瘤特异性结核抗原Ag85A基因慢病毒表达载体构建被引量：1
- 2015年
- 目的构建小鼠端粒酶催化亚单位启动子(murine telomerase catalytic subunit promoter,PmTERT)调控的结核杆菌抗原基因Ag85A肿瘤特异性慢病毒表达载体,为肿瘤靶向性免疫基因治疗的研究奠定基础。方法用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法克隆PmTERT用荧光素酶(luciferase)活性检测方法研究PmTERT在小鼠和人肿瘤细胞及正常细胞中的转录活性。通过核酸分子克隆方法分别构建巨细胞病毒(cytomegalo virus,CMV)启动子和PmTERT调控的Ag85A基因慢病毒表达载体并用基因测序和Western blot方法对重组载体进行鉴定。结果本研究克隆的331 bp大小的PmTERT在小鼠Lewis肺癌细胞、人A549肺癌细胞、EC-109食管癌细胞中均有转录活性在小鼠NIH3T3胚胎成纤维细胞和人MRC-5胚肾成纤维细胞中无转录活性;成功构建分别由CMV启动子和PmTERT调控的Ag85A基因慢病毒表达载体pLVX-Ag85A-CMV和pLVXAg85A-PmTERT;感染pLVX-Ag85A-CMV的Lewis细胞和NIH3T3细胞均有Ag85A蛋白表达感染pLVX-Ag85APmTERT的Lewis细胞有Ag85A表达感染pLVX-Ag85A-PmTERT的NIH3T3细胞无g85A表达。结论PmTERT具有肿瘤特异性转录活性,其驱动的结核杆菌抗原基因可以在肿瘤细胞中靶向性表达。
- 王小勇廖斌于海清刘高华李多肖琳琳唐小军
- 关键词：免疫基因治疗靶向性表达
