国家杰出青年科学基金(30125038)
- 作品数：9 被引量：99H指数：6
- 相关作者：田志刚魏海明张彩张建华冯进波更多>>
- 相关机构：中国科学技术大学山东省医学科学院山东大学更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NK细胞识别的新模式——压力诱导模式被引量：6
- 2005年
- T、B细胞通过TCR和BCR介导抗原识别模式,巨噬细胞通过模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)介导病原体相关的分子模式(pathogen associated molecular pattern, PAMP)或凋亡细胞相关的分子模式(apoptotic cell associated molecular pattern, ACAMP),比TCR,BCR和PRR更为复杂的是NK细胞的受体,迄今为止,已发现有数十种之多,分属抑制性受体和活化性受体两大类.各大类又包括数个家族,体现了NK细胞受体的多样性,介导了NK细胞的不同识别模式,分别传递不同的活化信号和抑制信号[1-2].
- 魏海明邬鹏田志刚
- 关键词：NK细胞
- IL-2促进PBMC来源的NK、NKT、CD8^+ T细胞高表达NKG2D被引量：6
- 2006年
- 目的观察大剂量IL-2活化的人外周血单个核细胞(PBMC)中,NKG2D在NK细胞、T细胞和NKT细胞表面的表达规律。方法使用三重免疫荧光标记的流式细胞术检测NKG2D的表达情况。使用sMICA蛋白与人PBMC共同培养,之后使用流式细胞术分析NKG2D在NK细胞中的表达情况。使用半定量RT-PCR方法检测大剂量IL-2活化的人PBMC中NKG2D及其锚定蛋白DAP10 mRNA的表达变化。结果使用大剂量IL-2活化人PBMC细胞后,NKG2D在NK细胞、CD8+T细胞和NKT细胞表面的表达均增加,但是在CD4+T细胞表面始终不表达。同时IL-2可以拮抗sMICA对NKG2D的下调作用。半定量RT-PCR结果显示,使用大剂量IL-2活化人PBMC之后,NKG2D及其锚定蛋白DAP10的mRNA水平并不发生明显变化。结论大剂量IL-2培养人PBMC之后,NKG2D在NK细胞、CD8+T细胞和NKT细胞表面的表达均增加,可能是PBMC活化并获得广谱抗肿瘤效应的机制之一。
- 邬鹏魏海明田志刚
- 关键词：NKG2DCD8^+T细胞
- IL-15通过ERK1/2信号途径对NK细胞活性的调节被引量：13
- 2003年
- 目的 阐明IL 15在NK细胞功能调节中的作用及信号转导途径的活化。方法 直接免疫荧光证实NK 92细胞膜表面表达IL 15Rα链 ,制备NK 92细胞的全细胞提取物进行Westernblot检测IL 15诱导的信号转导途径 ,MTT方法评价IL 15对NK细胞增殖和细胞毒能力的调节作用。结果 NK 92细胞表面存在IL 15Rα链的表达 ,构成IL 15与NK相互作用的分子基础。在IL 2依赖性NK细胞系NK 92中 ,较低剂量的IL 15 (2 5～ 10 0U/ml)可以完全替代IL 2以维持NK细胞的杀伤活性并对NK细胞的生长起促进作用。免疫印迹显示IL 15迅速活化ERK1/ 2 (extracellularregulatedkinase 1and2 )信号途径 ,而其它信号分子 (STAT1、STAT3、STAT6、P38MAPK、PI 3K、NF κB)并不被IL 15活化 ,提示ERK1/ 2是IL 15调节NK细胞功能中重要的信号分子。结论 IL 15对NK细胞具有强大的调节作用 ,IL 15通过ERK1/ 2信号途径完成对NK细胞活性的调节。
- 梁淑娟孙汭魏海明孙安源张建华田志刚
- 关键词：IL-15自然杀伤细胞白细胞介素15ERK1/2
- γ干扰素对人NK细胞识别功能的负调节作用被引量：9
- 2004年
- 目的 探讨γ干扰素 (IFN γ)对人NK细胞识别功能的负调节作用。方法 用MTT法测定人NK细胞系 (NK92 ,NKL)的细胞毒活性及细胞增殖能力 ;用RT PCR检测NK细胞受体 (NKG2D、NKG2A/B、KIR2DL1、KIR2DS1)及NKG2D的识别配体主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关分子A(MICA)的表达。结果 NK细胞系 (NK92、NKL)对MICA表达阳性的肿瘤细胞杀伤活性明显高于对MICA表达阴性者 ;IFN γ 10 0 0U/ml以上可明显抑制NK细胞对MICA表达阳性肿瘤细胞的细胞毒活性 ,并轻度抑制NK细胞的增殖 ,而对MICA表达阴性肿瘤细胞的杀伤活性无明显抑制作用 ;IFN γ可抑制NK细胞系活化受体NKG2D的表达 ,增强抑制性受体NKG2A/B和KIR2DL1的表达。结论 IFN γ可能通过下调NK细胞活化受体的表达 ,上调抑制性受体的表达 ,使NK识别的信号平衡向抑制性方向倾斜 ,从而对NK细胞功能发挥负调节作用 。
- 张彩田志刚张建冯进波张建华许晓群
- 关键词：Γ干扰素NK细胞负调节作用IFN-Γ肿瘤细胞
- 膜型分泌型MICA对NK细胞受体NKG2D的相反调节效应及其对NK细胞受体谱的影响被引量：47
- 2004年
- 目的 观察膜型和分泌型MICA对NK细胞受体表达的影响 ,以探讨NK细胞抗肿瘤活化机制及肿瘤细胞表达MICA分子的意义。方法 用MTT法测定人NK细胞系 (NK92 )的细胞毒活性 ;用RT PCR或FACS检测NK细胞受体 (NKG2D ,NKG2A B ,KIR2DL1,KIR2DS1)及NKG2D的识别配体MICA的表达。结果 肿瘤细胞表面的MICA分子可上调NKG2D的表达 ,下调抑制性受体NKG2A B和KIR2DL1的表达 ;而分泌型MICA (sMICA)分子对NKG2D及抑制性受体的表达均有抑制作用。结论 膜型MICA分子可上调NKG2D的表达 ,激发NK细胞对肿瘤细胞的细胞毒效应 ;分泌型MICA分子则通过降低NKG2D的表达下调机体的抗肿瘤免疫效应 ,肿瘤细胞分泌sMICA分子为肿瘤发生免疫逃逸的机制之一。
- 张彩冯进波王郡甫许晓群张建田志刚
- 关键词：天然杀伤细胞MICANK细胞受体
- NK细胞受体识别的多样性被引量：6
- 2004年
- TCR和BCR介导T、B细胞的识别活化是现代免疫学研究的核心内容之一,比TCR和BCR更为复杂的是NK细胞的受体,迄今为止,已发现有数十种之多,分属抑制性受体和活化性受体两大类,各大类又包括数个家族,体现了NK细胞受体的多样性,介导了NK细胞的不同识别模式,分别传递不同的活化信号和抑制信号,各种信号在细胞表面如何整合,在细胞内部如何传递,最终赋予NK细胞何种生物学功能,成为近期免疫学研究的热点问题.
- 田志刚魏海明
- 关键词：NK细胞受体多样性
- 结核杆菌耐热抗原对人外周血淋巴细胞NKG2A/NKG2D的影响被引量：5
- 2005年
- 目的:以结核杆菌耐热抗原为刺激剂,观察人外周血淋巴细胞NKG2A受体和NKG2D受体表达量的变化情况。方法:用结核杆菌耐热抗原刺激人外周血淋巴细胞,用流式细胞技术检测NKG2A受体和NKG2D受体的变化。使用RT-PCR和ELISA检测PBMCs中IFN-γ的表达情况。结果:在IL-2和抗原联合刺激下,NKG2A受体的表达量在第12天大幅度上升,NKG2D受体的表达量始终变化不大。NKG2A受体的表达在T细胞、NK细胞、αβT细胞和γδT细胞表面都有不同程度的增加。结论:NKG2A/NKG2D比例的上升有可能会对免疫系统造成一些影响,其中IFN-γ起着不可忽视的作用。
- 李军魏海明张瑞军李柏青田志刚
- 关键词：人外周血淋巴细胞NKG2ANKG2DIFN-Γ
- ERK1/2信号传导途径参与调控NK细胞的杀伤活性被引量：4
- 2003年
- 目的 :阐明NK细胞系持续活化的信号通路ERK1 2在调节NK细胞增殖和杀伤活性中可能发挥的作用。方法 :制备NK 92和YT细胞的全细胞提取物 ,进行Westernblot,检测在细胞系中持续活化的信号传导途径 ,信号通路特异性阻断剂PD0 980 5 9阻断ERK1 2活化 ,MTT方法评价ERK1 2在调节NK细胞杀伤和增殖活性中发挥的作用 ,RT PCR检测阻断试剂作用前后杀伤相关分子表达水平的变化。结果 :2个代表性的NK细胞系 (YT ,IL 2非依赖 ;NK 92 ,IL 2依赖 )中存在ERK1 2 (p4 4 4 2MAPK)、NF κB和STAT3信号通路的持续磷酸化 ,去除IL 2和血清较长时间后仍保持活化状态 ,而其它信号途径 (STAT1、STAT6、PI 3K、p38MAPK)则未见活化。特异性阻断剂PD0 980 5 92 0 0 μmol L阻断ERK1 2活化后 ,NK细胞杀伤K5 6 2靶细胞的能力显著降低 ,但细胞的增殖活性不受影响。RT PCR证实 ,PD0 980 5 9阻断ERK1 2抑制NK细胞毒活性的同时 ,杀伤相关分子IFNγ、FasL、perforin的表达水平也不同程度地下调。结论 :NK细胞系中持续性活化的ERK1 2主要传递与NK细胞细胞毒性相关的信号 ,并不参与调节细胞的增殖 ,该途径通过控制杀伤相关分子IFNγ、FasL、perforin的基因表达从而主导NK对靶细胞的杀伤。
- 梁淑娟孙汭魏海明冯进波许晓群田志刚
- 关键词：ERK1/2信号传导途径NK细胞杀伤活性细胞免疫学
- 小鼠子宫uNK细胞的分离及其特性研究被引量：5
- 2005年
- 目的:建立小鼠子宫淋巴细胞分离方法,并初步观察小鼠子宫uNK细胞的特性。方法:分别用机械法和酶消化法制备单细胞悬液分离小鼠子宫淋巴细胞,用二色或三色荧光标记技术检测子宫uNK细胞的比例及相关特征。结果:机械法分离淋巴细胞技术相对稳定、纯度较高;酶消化法未降低DX5 +细胞所占的比例,但酶的消化过程容易使淋巴细胞活化水平升高,表现为活化分子CD6 9的表达上调。子宫中存在大量的uNK细胞(NK1 1+CD3-或DX5 +CD3-细胞) ,小鼠怀孕早期和中期,uNK细胞占子宫淋巴细胞的比例随着怀孕天数的增长而增长,到怀孕的第10天达到高峰(uNK细胞比例达到4 8 .74 % ) ,之后比例开始迅速下降。结论:成功建立了小鼠子宫uNK细胞分离方法,子宫uNK细胞作为重要的天然免疫淋巴细胞,可能参与妊娠子宫对半同种异体胚胎的保护性免疫反应。
- 杨华魏海明郑晓东张慰慈张建红吴晓妍王静田志刚
- 关键词：小鼠子宫蜕膜妊娠初期
