国家自然科学基金(39990570)
- 作品数：91 被引量：953H指数：19
- 相关作者：周宜开任恕郝巧玲吕斌徐顺清更多>>
- 相关机构：华中科技大学同济医科大学中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学自动化与计算机技术更多>>
- 巢式甲基化特异性PCR检测食管癌病人血清中p16基因启动子区过甲基化被引量：8
- 2005年
- 目的检测食管鳞状细胞癌(squamouscellcarcinoma,SCC)患者外周血血清中p16基因启动子区的甲基化状态,探讨p16基因启动子的过甲基化在食管鳞状细胞癌筛查及早期诊断中的意义。方法利用巢式甲基化特异性PCR(nMSP)法检测食管鳞状细胞癌患者外周血血清与正常人血清中p16基因启动子的甲基化状态,并与普通甲基化特异性PCR(MSP)法进行了比较。结果56例SCC血清样品中nMSP法发现34例p16基因启动子的过甲基化,MSP法只检出15例,而22例正常人血清中都未检测到p16基因启动子的过甲基化。测序结果进一步验证了方法的可靠性。结论利用巢式MSP(nMSP)法检测外周血血清中p16基因启动子的甲基化,可为食管癌的筛查、早期诊断及预后判断提供有价值的信息。
- 姚群峰康新江郝巧玲曾卫周宜开
- 关键词：食管鳞状细胞癌甲基化P16基因聚合酶链反应
- 维甲酸诱导的基因RA109染色体定位和蛋白质定位
- 2001年
- 目的 确定全反式维甲酸诱导肺腺癌细胞系GLC 82表达上调的基因RA10 9在染色体上的位置及其编码蛋白在细胞中的位置。方法 应用辐射杂交细胞系 (RH)定位的方法进行染色体定位 ,应用绿色荧光蛋白 (GFP)基因作为报告基因 ,结合荧光显微摄影进行蛋白质定位。结果 将RA10 9基因定位在 5号染色体长臂 5q35 ,RA10 9蛋白定位在细胞核。结论 RH定位是一个快速、简捷、精确的染色体定位方法 ,以此方法可将RA10 9定位在 5号染色体长臂的一个疾病基因富含区。利用GFP进行蛋白质定位简单明了 ,以此可将RA10 9蛋白定位在细胞核这个重要的细胞结构中。
- 赵剑华刘芝华王秀琴骆爱萍吴旻
- 关键词：肺肿瘤染色体定位蛋白质定位维甲酸
- 微芯片毛细管电泳电化学/电化学发光同时检测药物分子
- 提出了基于毛细管电泳芯片的电化学和电化学发光同时检测技术.在此芯片系统中,三联吡啶钌Ru（bpy）32+[Tris（2,2′-bypiridyl）ruthenium（Ⅱ）]既作为电化学发光（ECL）检测所需的发光试剂与被...
- 杨秀荣邱海波严吉林赵晓翠汪尔康
- 关键词：电化学检测
- 文献传递
- 鲁米诺-过氧化氢化学发光法动态监测硝普钠在小鼠体内释放NO过程被引量：5
- 2003年
- 目的 建立一套快速有效的测量NO的方法并用来监测降压药硝普钠在小鼠体内释放NO的过程。方法 建立并采用鲁米诺 过氧化氢 (Luminol H2 O2 )化学发光体系 ,动态监测小鼠静脉注射硝普钠 (2mg/kg)后血样中NO浓度的变化。结果 Luminol H2 O2 化学发光体系构建成功 ,以此测量NO标准系列线性良好 ;硝普钠给药后 ,小鼠体内NO 30s左右达到峰值 ,2 0 0s恢复给药前水平。结论 Luminol H2 O2 化学发光体系测量NO灵敏度高、特异性好 ;硝普钠在体内快速释放NO 。
- 周李承章林慧梁桂媛周宜开郝巧玲
- 关键词：硝普钠化学发光分析小鼠
- 金丝桃清除活性氧作用研究被引量：6
- 2000年
- 目的：对金丝桃不同部位提取物的清除活性氧活性进行了实验研究。方法：用化学发光法研究了金丝桃提取物对 Ｏ２、Ｈ２Ｏ２的清除作用；用分光光度法研究了提取物对·ＯＨ的清除作用以及对Ｈ２Ｏ２引起红细胞损伤和由Ｆｅ２＋－Ｖｉｔ Ｃ引起线粒体膨胀的保护作用。结果：金丝桃提取物能有效地清除Ｏ２、Ｈ２Ｏ２和·ＯＨ，对Ｈ２Ｏ２引起的红细胞损伤有一定的保护作用，同时能抑制由Ｆｅ２＋－Ｖｉｔ Ｃ引起的线粒体膨胀。结论：金丝桃提取物有良好的清除活性氧活性。
- 项光亚郝巧玲袁津玮周宜开
- 关键词：金丝桃化学发光脂质过氧化自由基灌木植物
- 人MGMT基因cDNA的克隆表达及表达蛋白修复功能的鉴定被引量：1
- 2001年
- 克隆了Hela细胞O6 甲基鸟嘌呤 DNA 甲基转移酶 (MGMT)基因的cDNA序列 ,该序列与国外发表的cDNA完全一致。将此cDNA插入原核表达载体pET 2 1a后转化大肠杆菌BL2 1(DE3)获得表达的重组菌株pET 2 1a MGMT E .coliBL2 1(DE3) ,经IPTG诱导后产生分子量为 2 4kD的蛋白质。烷化类诱变剂致死突变实验表明 ,MGMT蛋白的表达能修复受体菌DNA分子因烷化类诱变剂导致的突变。
- 朱玉文刘建国黎高翔
- 关键词：烷化剂癌变
- 5-氟尿嘧啶壳聚糖微球的制备被引量：37
- 2000年
- 本文报道了采用两种不同的方法制备 5_Fu壳聚糖微球 ,微球A采用乳化交联法制备 ,微球B是首先制备成白蛋白微球 ,然后在其表面固定壳聚糖。研究了微球的一些基本特征 ,包括微球大小、形态与表面状态 ,结果表明微球A及微球B粒径主要分布在 3.5～ 6 .5μm和 0 .6～ 2 8μm范围内 ,药物含量分别为 10 .86 %和 8.52 % ,体外释放实验表明 ,在 pH7.4磷酸盐缓冲溶液中 ,微球B具有显著的缓释作用 ,其释放特征符合Higuchi方程。
- 梁桂媛方华丰刘志伟
- 关键词：5-氟尿嘧啶壳聚糖微球
- DNA切除修复标志物在肺癌、食管癌组织中的表达被引量：6
- 2003年
- [目的 ]研究切除修复中切除修复鼠缺陷交叉互补基因 2 (ERCC2 )蛋白、尿嘧啶DNA糖基化酶 (UDG)、细胞增殖核抗原 (PCNA)在肺癌和食管癌组织中的表达水平差异。 [方法 ]通过免疫组织化学和原位杂交方法研究三种生物标志物在不同部位的肿瘤组织和非肿瘤组织之间的表达水平进行比较。 [结果 ]ERCC2蛋白和mRNA、UDG蛋白在肺和食管良性病变中的表达水平均明显高于其癌和癌周组织。UDGmRNA水平在食管良性病变组织中明显高于癌和癌周组织 ,在肺良性病变、癌和癌周组织中无显著差异。PCNA蛋白和mRNA在肺和食管癌和癌周组织中的表达水平均明显高于良性病变组织。三种标志物蛋白和mRNA表达水平在癌组织和癌周正常组织之间均无明显差异。 [结论 ]ERCC2、UDG表达水平在良性病变组织中明显高于肿瘤组织、PCNA表达水平在肿瘤组织中明显高于良性病变组织。
- 吕斌张霞周晟郝巧玲周宜开
- 关键词：DNA损伤切除修复肺癌食管癌生物标志物细胞增殖核抗原
- 错配杂交化学发光法定量检测p16基因过甲基化被引量：9
- 2005年
- 目的建立一种基于错配杂交化学发光检测p16基因启动子区过甲基化的定量分析方法.方法用亚硫酸氢钠修饰基因组DNA,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化.设计合成1对不含CpG位点的引物,同时扩增甲基化或非甲基化目的DNA片段,用2条分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物进行杂交及化学发光检测,通过探针杂交信号强度比确定样品DNA中甲基化的p16基因的比例.结果错配杂交化学发光法具有较好的精密度(CV=5.2%～6.4%)和灵敏度(2.5×10-4pmol),检测已知混合样品的p16基因甲基化率分别为0%、23%、52 %、70% 及93%,与实际结果一致.结论本研究建立的错配杂交化学发光法是一种检测快速、操作简便的p16基因甲基化的定量检测方法.
- 姚群峰宁勇郝巧玲张利平周宜开
- 关键词：P16基因甲基化
- 光纤纳米生物传感器的现状及发展被引量：10
- 2002年
- 介绍了当前用于单细胞研究的光纤纳米生物传感器的现状及发展,包括光纤纳米生物传感器的制作、构造和在生物研究领域中的应用。
- 周李承蒋易周宜开任恕聂棱
- 关键词：纳米生物技术
