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ERK1/2-Sp1信号通路对肺癌细胞VEGF的调控作用被引量：8: 2007年; 背景与目的:了解ERK1/2-Sp1信号通路对肺癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)基因的调控作用。材料与方法:采用激酶特异抑制剂PD98059抑制ERK1/2的活性,Western blot检测ERK1/2的表达。RNA干扰技术沉默Sp1基因,Mercury信号通路系统检测Sp1的转录活性。RT-PCR检测VEGF和Sp1基因的变化。结果:ERK1/2激酶的活性几乎可被150μmol/L PD98059完全抑制,ERK1/2激酶活性下调伴随VEGF的表达下降。PD98059下调Sp1转录因子的活性。Sp1基因沉默后VEGF的表达量下调。结论:在肺癌细胞中存在ERK1/2-Sp1-VEGF信号通路,ERK1/2激酶调控VEGF的表达可能部分依赖于转录因子Sp1的活性。; 梁璇丁新民霍艳英潘兴斌隋建丽白贝徐勤枝周平坤; 关键词：肺癌 VEGF SP1

抑癌基因LKB1对肺癌细胞血管内皮生长因子的表达调控被引量：4: 2007年; 目的:了解抑癌基因LKB1对肺癌细胞A549血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor.VEGF)的调控作用。方法:应用巢式PCR方法扩增LKB1基因编码区,构建LKB1的真核表达载体并以脂质体法转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞株;RT-PCR及Western印迹法检测LKB1、SP1和VEGF在A549细胞中的表达变化;siRNA技术干扰转录因子SP1的表达,RT-PCR及Western印迹法检测SP1和VEGF的表达变化。结果:外源性LKB1在A549细胞中稳定表达;LKB1蛋白下调SP1和VEGF的表达;SP1可被特异性siRNA分子有效抑制.siRNA介导的SP1沉默伴随VEGF表达下调。结论:LKB1可能通过负调控转录因子SP1的表达从而调控VEGF的表达。; 臧远胜夏天保李强; 关键词：LKB1 A549细胞血管内皮生长因子类 SP1 小分子干扰

LKB1基因功能及与肿瘤关系研究进展被引量：10: 2004年; LKB1基因是一抑癌基因,其编码产物为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。LKB1的功能主要是使细胞周期阻滞在G_1期、促进细胞凋亡和调节胚胎血管形成等。LKB1基因的胚系突变是Peutz-Jeghers综合征的主要致病因素。在散发肿瘤中也发现有LKB1基因突变,其中以肺腺癌和子宫颈粘液微偏癌突变率较高,分别达30％和55％左右。; 丁新民徐勤枝周平坤; 关键词：基因肿瘤突变

LKB1蛋白在肺腺癌组织中的表达及临床意义被引量：8: 2005年; 目的:了解LKB1蛋白在肺腺癌组织中表达的临床意义。方法:应用免疫组化法检测62例肺腺癌组织中LKB1蛋白表达情况。结果:LKB1蛋白在肺腺癌细胞及正常肺支气管上皮均有表达,弥漫性分布于细胞质,细胞核亦有表达。肺腺癌组织中LKB1蛋白表达的阴性率为38.7%(24/62)。LKB1的表达与肺腺癌TNM分期中的淋巴结转移(N)及临床分期有显著的相关性,χ2=10.620,P=0.014;χ2=18.635,P=0.000。LKB1蛋白阴性组预后较差,中位生存期为15个月,而LKB1阳性组的中位生存时间为29个月,两者比较差异有统计学意义,χ2=15.350,P=0.000。结论:LKB1蛋白表达下降与肺腺癌发生淋巴结转移相关,是肺腺癌预后不良的风险因素之一。; 丁新民李增鹏周平坤段蕴铀冯华松徐勤枝; 关键词：肺肿瘤腺癌预后免疫组织化学

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1基因沉默对肺癌细胞生物学行为的影响被引量：3: 2007年; 目的研究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(LKB1)基因表达沉默对肺癌细胞生物学行为的影响。方法以RNA干扰技术建立LKB1表达抑制的细胞模型,Western blotting方法检测干扰LKB1蛋白表达的效果;通过绘制生长曲线和克隆形成试验检测LKB1基因沉默肺癌细胞的增殖变化;应用Annexin V/PI双染法和流式细胞技术分析LKB1基因沉默后肺癌细胞周期的变化及其凋亡和坏死情况。结果成功建立了LKB1基因沉默肺癌细胞模型,稳定表达LKB1-siRNA细胞的LKB1蛋白表达被明显抑制,LKB1基因沉默后肺癌细胞增殖速度明显加快,但其早期与晚期凋亡率较对照组相比并无显著变化。结论LKB1基因的下调表达对95D细胞部分恶性生物学行为的发生具有一定的促进作用。; 梁璇南克俊徐勤枝; 关键词：RNA干扰凋亡肺癌

转录因子Sp1对肺癌细胞LKB1-VEGF通路调控作用研究被引量：8: 2007年; 目的:通过构建LKB1基因获得性肺癌细胞模型,了解转录因子Sp1对LKB1-血管内皮生长因子(VEGF)通路的调控作用。方法:应用巢式PCR(nPCR)方法扩增LKB1基因编码区,构建LKB1真核表达载体;W estern印迹检测LKB1在A549细胞中的表达;siRNA技术干扰Sp1的表达;RT-PCR联合ELISA方法检测VEGF的变化;SEAP检测系统检测Sp1的转录活性。结果:成功构建LKB1基因稳定表达细胞模型;LKB1蛋白下调VEGF表达和Sp1转录活性;siRNA介导的Sp1沉默伴随VEGF表达下调。结论:转录因子Sp1参与LKB1基因对VEGF的表达调控。; 臧远胜周平坤丁新民梁璇隋建丽白贝李强徐勤枝; 关键词：LKB1 肺癌血管内皮生长因子转录因子SP1 RNA干扰基因表达调控

LKB1基因转染对人肺腺癌细胞生物学行为的影响被引量：1: 2008年; 目的:探讨外源性LKB1基因表达对人肺腺癌细胞生物学行为的影响。方法:应用巢式PCR方法扩增LKB1基因编码区,利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA-LKB1质粒和空载体pcDNA3.1质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Western blot检测LKB1和STAT3在A549细胞中的表达变化。通过绘制生长曲线和克隆形成试验检测获得性表达LKB1基因后肺癌细胞的增殖变化,流式细胞术(FCM)分析其细胞周期及其凋亡的变化。结果:成功获得了稳定表达外源性LKB1基因的A549细胞系,与转染空白载体组比较,转染LKB1基因的细胞生长速度明显减慢,细胞周期中G1/G0期比例明显增加,S期比例减少,细胞凋亡率升高;同时STAT3蛋白的磷酸化水平明显降低。结论:LKB1可能通过下调STAT3蛋白磷酸化水平的表达从而抑制A549细胞的恶性生物学行为。; 梁璇南克俊李春丽姚煜田涛王淑红; 关键词：LKB1 转染 STAT3

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