国家自然科学基金(31070855)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：杨军姚芳莲于美华徐建斌饶霞更多>>
- 相关机构：南开大学天津大学东京工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 重组VE-cad-Fc融合蛋白仿生构建细胞外基质被引量：1
- 2014年
- 利用基因重组技术设计和构建了一种仿生的双功能仿生细胞外基质蛋白.其基本策略是将人血管内皮钙粘素胞外区(VE-cad)和免疫球蛋白(IgG1)Fc段进行基因融合构建真核表达载体,并利用FreeStyle293真核蛋白表达系统制备融合蛋白VE-cad-Fc,利用Western blot鉴定融合蛋白,并观察了该VE-cad-Fc融合蛋白基质对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)粘附和形态的影响.结果显示,成功克隆了VE-cad胞外段基因,并与Fc段重组形成VE-cad-Fc融合基因.在转染24h后,利用兔抗人VE钙粘素胞外区抗体验明该融合蛋白的免疫抗原性,其分子质量约为90.3KD,进一步的结果证明VE-cad-Fc融合蛋白是以二聚体的形式存在.优化该制备体系最佳表达时间为72h.细胞试验表明,VE-cad-Fc融合蛋白可显著促进HUVECs的粘附和生长.这种工程化的多功能融合蛋白基质在组织工程、再生医学和分子生物学领域有广阔的应用前景.
- 杜风移于美华赵伟毛宏理姜楠徐建斌杨军
- 关键词：融合蛋白人脐静脉内皮细胞
- 上皮细胞钙黏素对人脐带间充质干细胞的增殖和保持多能性的影响研究
- <正>目的人脐带间充质干细胞来源于临床弃物(脐带Wharton胶)。研究已表明:其具有多能分化性、低免疫原性和致瘤性,是组织工程种子细胞的理想选择。但想要真正将这种细胞应用于组织工程,单单靠供体捐献的少量细胞是远远不足的...
- 姜楠徐建斌杨军
- 文献传递
- 人E钙粘素融合蛋白基质对人骨髓间充质干细胞向肝细胞定向诱导分化的影响研究被引量：2
- 2013年
- 人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)源的肝细胞对于肝脏疾病的治疗和药物的开发具有巨大的应用潜力。利用基因工程技术构建了融合蛋白质粒,并通过真核细胞表达体系表达出了人E-钙粘素胞外域与免疫球蛋白Fc段的融合蛋白(hE-cadherin-Fc),并将其用于疏水材料的表面修饰仿生构建细胞-细胞间相互作用的细胞外微环境,检测其对hBMSCs向肝样细胞定向诱导分化的影响。诱导分化培养4周后,与组织培养板(TC-PS)、明胶(Gelatin)基质相比,hE-cadherin-Fc基质显著促进细胞表达ALB、CK18、HNF-4等肝细胞分化基因,并且细胞的糖原合成和吲哚青绿(ICG)摄取功能均显著提高。在hE-cadherin-Fc基质表面分化培养4周时,白蛋白和尿素合成的量为2.7pg/细胞/d和36.7 pg/细胞/d,相对于TC-PS和Gelatin分别提高了42.1%和28.6%、57.5%和25.7%。综上所述,利用hE-cadherin-Fc基质化构建细胞外微环境,有利于促进人骨髓间充质干细胞向功能化肝细胞的定向分化。
- 徐建斌张妍李素华祝传顺姚芳莲赤池敏宏杨军
- 关键词：人骨髓间充质干细胞肝细胞分化融合蛋白
- 人工细胞外基质对血管内皮细胞生存的影响被引量：2
- 2013年
- 通过物理吸附方法,利用胶原、聚赖氨酸和融合蛋白VEGF-Fc对聚苯乙烯培养板表面进行改性,以研究细胞外基质材料对血管内皮细胞的影响.结果表明,3种蛋白显著提高了聚苯乙烯表面的亲水性.内皮细胞的黏附、增殖、细胞骨架蛋白染色和血管性血友病因子(vWF)免疫染色实验结果表明,胶原、聚赖氨酸和VEGF-Fc基质均能有效提高血管内皮细胞的黏附,其中胶原可与VEGF协同作用促进内皮细胞分化表型的表达;VEGF-Fc基质兼具了VEGF的生物学活性,可促进内皮细胞的黏附和增殖以及vWF功能性蛋白的表达.本研究为诱导材料表面内皮化和血管新生的生物活性材料的设计开发提供了新思路.
- 于美华杜凤移饶霞姚芳莲杨军
- 关键词：聚苯乙烯融合蛋白物理吸附血管新生
