国家自然科学基金(30270508)
- 作品数：10 被引量：25H指数：3
- 相关作者：李俊发韩松吕国蔚祖鹏宇牛晨晨更多>>
- 相关机构：首都医科大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市教育委员会科技发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重复性低氧对小鼠脑组织MMP-2及MMP-9含量与活性的影响被引量：2
- 2006年
- 目的：探讨重复性低氧对小鼠脑组织内MMP-2和MMP-9的蛋白表达量及活性的变化。方法：将BALA／C小鼠随机分成常氧对照组（I加）、急性低氧1、2、3、4次组（H1～H4）共5组。应用SDS-PAGE、Western—blot等生化技术，并结合Gel Doc凝胶成像系统，半定量检测5组小鼠大脑皮层和海马组织内MMP-2及MMP-9的蛋白表达量及其活性的变化。结果：①随着低氧次数的增加，小鼠海马组织内MMP-2的蛋白表达量呈现先增后降的趋势，其中H4组MMP-2蛋白表达量的降低显著（P〈0．05，n=6），而小鼠大脑皮层组织内MMP-2的蛋白表达量变化不明显。此外，在海马和大脑皮层组织内均未检测到MMP-2的活性组分；②海马组织内MMP-9的蛋白表达量随重复性低氧次数的增加，其含量也呈现先增后降的趋势，且H1组MMP-9表达量的增高和H4组MMP-9表达量的降低均具有显著意义（P〈0．05）。同样，海马组织内MMP-9活性组分的变化与其蛋白表达量变化趋势一致，与H0组相比．H1组MMP-9活性组分增高和H4组的降低均显著（P〈0．05）。大脑皮层组织内MMP-9表达量及其活性组分在脑低氧预处理过程中均无显著性变化。结论：MMP-2和MMP-9可能在脑低氧预处理过程中具有一定的作用．且提示其蛋白表达量及活性在大脑皮层和海马组织内的差异变化可能与大脑皮层和海马组织对低氧的选择易损性不同有关。
- 崔秀玉李俊发牛晨晨韩松
- 关键词：低氧预处理大脑皮层
- 蛋白激酶C在脑低氧预适应发生发展中的作用
- ＜正＞ 近年关于缺血/低氧预适应（I/HPC）机制方面的研究已有大量报道,并提出了一系列的可能机制,但尚无一种公认的确切机制。有趣的是,无论那种机制,均涉及蛋白激酶C（PKCs）的激活及其引起的细胞内一系列的信号转导。然...
- 李俊发崔秀玉王雪梅祖鹏宇韩松
- 文献传递
- 低氧对小鼠脑组织内P38磷酸化水平的影响
- ＜正＞ 作为丝裂原激活蛋白激酶（MAPKs）重要组成成员的P38,包括α,β,γ和δ等4种亚型,它们均可被高渗、细胞应激（紫外辐射、渗透性休克、心力衰竭、蛋白合成抑制剂）、细胞因子和G蛋白-偶联受体等激活。P38的作用底...
- 李俊发李洪燕祖鹏宇韩松
- 文献传递
- 低氧预适应对小鼠脑组织内cPKCβI和βII膜转位水平的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:通过观察重复性低氧刺激对蛋白激酶CβI和βII亚型(cPKCβI,cPKCβII)膜转位水平(或激活程度)的影响,初步探讨cPKCs特定亚型在脑低氧预适应发生发展过程中的作用。方法:按我室已建立的小鼠低氧预适应模型方法,制备重复性低氧1-4次小鼠(H1-H4)。应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳(SDS-PAGE)、蛋白印迹(Western blot)等生化技术,并结合应用Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测小鼠海马和大脑皮层组织内cPKCβI和βII的膜转位水平。结果:随低氧刺激次数(H1-H4)的增加,小鼠海马组织内cPKCβII的膜转位水平升高,H4组膜转位水平显著高于H0(100%,n=10)和H1(79·5%±10·7%,n=10)组(173·3%±21·3%,P<0·01,n=10);同样,大脑皮层内cPKCβII膜转位水平也随低氧次数的增加而升高,H3(119·8%±7·7%,n=6)和H4(131·8%±4·7%,n=6)组膜转位水平均显著高于H0(100%,n=6)组(P<0·05,n=6);而cPKCβI亚型的膜转位水平无论在大脑皮层还是海马组织内的变化均不显著(P>0·05,n=8)。结论:cPKCβII膜转位(激活)可能在脑低氧预适应的发生发展过程中发挥着重要作用。
- 崔秀玉李俊发祖鹏宇韩松
- 关键词：蛋白激酶C膜转位大脑皮质
- 低氧对小鼠脑组织内MAPKs磷酸化水平的影响
- ＜正＞ 丝裂原激活的蛋白激酶（MAPKs）是一类存在于所有真核细胞内的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,它包括细胞外信号调节的蛋白激酶（ERK1,2,3,4和5）、应急激活的蛋白激酶（JNK1,2和3）和P38（P38α、β、...
- 李俊发李洪燕王一松韩松祖鹏宇
- 文献传递
- 持续性低氧环境下人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C各亚型的膜转位现象(英文)
- 2005年
- 背景:蛋白激酶C家族有3组,经典型蛋白激酶C及非典型蛋白激酶C和新奇型蛋白激酶C。一些实验证实在低氧环境中,蛋白激酶C家族在脑缺血低氧预刺激中发挥了重要作用。目的:建立细胞缺氧模型,观察在细胞水平上低氧激活经典型蛋白激酶C各亚型(α,βⅠ,βⅡ,γ)膜转位现象的影响。设计:以细胞为对象,随机区组设计。单位:首都医科大学基础医学院神经生物学系。材料:实验于2004-05在首都医科大学神经生物学系细胞培养室完成。由本实验室培养的传代细胞,具有神经元特性的人神经母细胞瘤细胞系。方法:应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析和免疫细胞化学等生化技术,观察培养的细胞经过0～24h不同时间段,低氧环境为体积分数0.01的氧气,体积分数0.05的二氧化碳,体积分数0.94的氮气,对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ细胞膜转位水平的影响。主要观察指标:①观察持续低氧对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C膜转位影响采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析检测。②观察持续低氧对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C膜转位影响采用免疫细胞化学方法检测。结果:①经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ细胞膜转位水平均随持续性低氧时间的延长而明显增高(P<0.05),尤以经典型蛋白激酶C-βⅠ亚型在持续性低氧4h后的增高最为显著(P<0.001)。②无论在常氧还是在持续性低氧状态下,在人神经母细胞瘤细胞内均未检测到经典型蛋白激酶C-γ亚型的蛋白表达。应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析和免疫细胞化学实验检测的结果均一致。结论:①在持续低氧的条件下存在于人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ亚�
- 祖鹏宇李俊发韩松曲彦明李华牛晨晨徐群渊
- 关键词：低氧蛋白激酶C
- 低氧对培养细胞内cPKCα膜转位的影响
- ＜正＞ 被视为细胞内第三信使的蛋白激酶C（PKCs）是一类使底物蛋白分子内丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化的蛋白激酶家族,它由经典型（cPKC）、新奇型（nPKC）和非典型（aPKC）等三类11种亚型组成。PKCs不同亚型可使不...
- 祖鹏宇李俊发韩松
- 文献传递
- 蛋白激酶C在缺血/低氧预适应领域研究进展被引量：2
- 2004年
- 缺血/低氧预适应(ishaemic/hypoxic precomditioning,I/HPC)是一种内源性保护机制,即短暂、亚致死量的重复性缺血/低氧预刺激可引起组织或器官对继发严重低氧的耐受.这一预适应现象可发生在脑、心脏、肝、小肠、骨骼肌、肾脏和肺等器官系统.关于这一课题,尽管已有大量研究报道,并提出了一系列的可能机制,如谷氨酸和腺苷受体激活机制、ATP敏感K+-通道、一氧化氮、氧化应激和低温机制等,但到目前为止尚无一种公认的确切机制.
- 李俊发徐群渊
- 关键词：缺血低氧预适应蛋白激酶C腺苷受体预刺激器官系统
- 低氧对小鼠脑组织内cPKCγ和α膜转位的影响
- ＜正＞ 蛋白激酶C（PKCs）是一类使底物蛋白分子内丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化的蛋白激酶家族,其包括经典型（cPKCα,βⅠ,βⅡ,γ）、新奇型（nPKCδ,ε,η,θ,μ）和非典型（aPKCζ,ι/λ）等三类11种亚型。...
- 崔秀玉李俊发韩松祖鹏宇
- 文献传递
- 重复低氧对小鼠脑内cPKCα和γ膜转位及蛋白表达的影响被引量：6
- 2005年
- 探讨cPKCs特定亚型在脑低氧预适应形成过程中的作用 ,借助已建立的小鼠整体低氧预适应模型 ,应用SDS PAGE和Westernblot等生化技术 ,并结合GelDoc成像系统 ,半定量检测脑组织内cPKCα和γ的膜转位水平和蛋白表达量。结果发现 ,随低氧暴露次数 (低氧 2～ 4次 )增加 ,在小鼠海马和皮层组织内cPKCγ膜转位水平增高显著(P <0.0 5 ,n =6 ) ;然而 ,cPKCα的膜转位水平和cPKCγ及γ的蛋白表达量的变化均不显著。提示 。
- 牛晨晨李俊发徐群渊
- 关键词：PKCΓ蛋白表达小鼠脑内转位
