北京市科委重大项目(H022020060420)
- 作品数：12 被引量：69H指数：5
- 相关作者：朱士恩田见晖刘国世曾申明付静涛更多>>
- 相关机构：中国农业大学甘肃农业大学天津市农业科学院更多>>
- 发文基金：北京市科委重大项目北京市科技新星计划国家科技部农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 不同培养体系对牛胚胎体外发育的影响被引量：4
- 2005年
- 采用离子霉素和6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)对牛体外成熟卵母细胞进行联合激活,激活后采用不同的培养体系进行体外培养,观察不同的培养液对牛孤雌激活胚体外发育能力的影响。3种培养体系分别为:A(0~48 h:CR1aa+3 mg/mL BSA;48 h^7 d:CR1aa+10%FBS),B(连续7 d均为SOFaa+3 mg/mL BSA),C(0~5 d:SOFaa+3 mg/mL BSA;6~7 d:SOFaa+10%FBS)。结果表明:3种培养液对卵裂率没有显著性影响,分别为87.22%,94.33%和91.30%,但囊胚发育率存在显著性差异,以A效果最好,其囊胚发育率为25.56%;C次之,囊胚发育率为11.80%;B最低,囊胚发育率为3.55%。之后选择最佳的培养液进行体外受精实验,结果表明CR1aa可用做牛胚胎体外生产的培养液。
- 成文敏戴蕴平朱士恩李荣田见晖
- 关键词：畜牧学体外培养孤雌激活体外受精卵母细胞
- 受体山羊卵巢有无卵泡对移植妊娠率的影响
- 2011年
- 为了提高受体山羊移植妊娠率,试验在生产条件下对111只波尔山羊供体实施超数排卵处理,子宫生产胚胎,然后对977只奶山羊受体分两组实施胚胎移植,一组卵巢上只有黄体,另一组卵巢上除有黄体外,还有卵泡(卵泡较小,一般小于黄体),并对移植妊娠率进行比较分析。结果表明:有卵泡受体移植后妊娠率为52.65%;无卵泡受体移植后妊娠率为60.13%,差异显著(P<0.05),说明选择卵巢上无卵泡的受体进行移植妊娠率较高。卵巢上有卵泡的受体妊娠率为52.65%,在生产上也属于理想效果。
- 付静涛张京和吴美玲范永刚刘海军肖西山
- 关键词：山羊卵泡妊娠率
- 化学激活对猪体外成熟卵母细胞孤雌发育的影响被引量：5
- 2005年
- 探索了离子霉素结合细胞松驰素B(cytochalasinB,CB)、放线菌酮(cycloheximide,CHX)以及6-二甲基嘌呤(6-dimethylaminopurine,6-DMAP)等化学物质,对猪卵母细胞激活后发育的影响。试验1,体外成熟卵母细胞分别用15、20、25、30μmol·L-1的离子霉素处理40min或电激活(1.3kV·cm-1,80μs,1次脉冲),结果表明,20μmol·L-1组的激活率(69.93±5.80)%显著高于15μmol·L-1组(P<0.05),但与其它各组差异不显著(P>0.05)。试验2,卵母细胞采用20μmol·L-1离子霉素分别激活10、20、30、40、50min,再用2mmol·L-16-DMAP处理6h,其中,40min组的卵裂率、囊胚率[(72.40±13.02)%、(25.37±11.43)%]较高,但与其它各组差异不显著(P>0.05)。试验3,卵母细胞经离子霉素(20μmol·L-1、40min)激活后,分别用7.5μg·ml-1CB、10μg·ml-1CHX、2mmol·L-16-DMAP、7.5μg·ml-1CB+10μg·ml-1CHX和7.5μg·ml-1CB+2mmol·L-16-DMAP处理6h,2mmol·L-16-DMAP组的激活率、卵裂率和囊胚率[(86.05±4.29)%、(61.77±8.10)%和(21.62±3.31)%]显著高于7.5μg·ml-1CB组(P<0.05)与另外几组差异不显著(P>0.05)。试验4,卵母细胞由离子霉素(20μmol·L-1、40min)激活后,用2mmol·L-16-DMAP分别处理3.5、5.5、7.5h,5.5h组的卵裂率和囊胚率[(66.
- 田见晖蔡元刘国世曾申明成文敏朱士恩刘焕营吴常信
- 关键词：化学激活体外成熟卵母细胞孤雌发育
- 双重套式PCR对不同取样胚胎性别鉴定灵敏度测试被引量：5
- 2005年
- 目的 :测定双重套式PCR微量扩增体系的灵敏度 ,为附植前遗传学诊断 (PGD)、家畜胚胎性别鉴定等提供技术保障。方法 :以桑椹胚卵裂球为模板进行扩增 ,建立昆明白小鼠特异的SRY ZFX双重套式PCR性别鉴定体系。按卵裂球数量的不同分为五组 ,对应的卵裂球个数分别为 1、2、3、4、5及以上。根据有效扩增结果得出双重套式PCR的灵敏度。结果 :第 1组 (卵裂球个数为 1 ) ,有效检出率为 85 % ( 34 /40 ) ,污染率为 7 5 % ( 3 /40 ) ,漏检率为 7 .5 % ( 3 /40 )。随着卵裂球个数的增多 ,有效检出率逐渐升高 ,而污染率和漏检率则呈逐渐下降趋势。第 5组 (卵裂球达到 5及以上 ) ,有效检出率达到 1 0 0 % ,漏检率为 0。对于第 2、3、4、5组而言 ,有效检出率及漏检率各组间并无显著差异 (P >0 . 0 5 ) ;而第一组与其它各组间 ,有效检出率及漏检率存在显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :双重套式PCR可以有效扩增基因组DNA量约为 1 2pg的模板 ,且扩增片段为单拷贝片段。
- 赵学明朱士恩侯云鹏周光斌
- 关键词：套式PCR卵裂球PGD遗传学诊断胚胎性别鉴定桑椹胚
- 乙醇激活对猪体外成熟卵母细胞发育的影响被引量：2
- 2005年
- 探索了单独应用乙醇或者联合 6 -氨基嘌呤 (DMAP)、细胞松弛素 B(CB)、放线菌酮 (CHX)等化学物质对体外成熟 4 4 h猪卵母细胞激活的影响。结果如下 :分别用 0、5 %、8%、11%乙醇处理 5 min,或者在 8%乙醇条件下激活处理2、5、10 min的各组试验中 ,8%乙醇处理 5 min的卵裂率为 (6 .4 2± 4 .88) % ,高于其他各组 ,但均无囊胚发育 ;乙醇(8%、5 min)激活后 ,分别用 CB、CHX、DMAP、CB+CHX、CB+DMAP培养 6 h,结果 CB+DMAP的激活率、卵裂率和囊胚率最高 ,分别为 (70 .86± 3.75 ) %、(5 3.87± 5 .36 ) %、(15 .0 7± 5 .5 3) % ,与其他组相比 ,囊胚率差异显著 (P<0 .0 5 )
- 田见晖朱士恩曾申明刘国世蔡元刘焕营李迎张忠诚
- 关键词：CB卵裂率囊胚率体外成熟
- 保存卵巢生理盐水温度的下降对猪卵母细胞体外成熟的影响被引量：3
- 2005年
- 本试验研究了在37～38.5℃生理盐水中保存猪卵巢,卵巢运回实验室后生理盐水温度对猪卵母细胞体外成熟的影响。37～38.5℃的生理盐水中保存猪卵巢,运回实验室后,当温度下降为31℃、32℃、33℃、34℃及36℃时卵巢上抽取卵母细胞的成熟率分别为24.86±7.31%、21.34±5.12%、28.32±7.49%、21.14±4.82%和17.70±2.27%,淘汰率分别为53.42±12.10%、48.05±21.04%、43.93±12.77%、58.19±6.82%和62.06±12.03%,各组间差异不显著。结果表明:在37～38.5℃的生理盐水下保存猪卵巢,运回实验室后,当温度下降到31～36℃时对卵母细胞的成熟没有显著影响。
- 蔡元张兆旺田见晖成文敏王金勇
- 关键词：卵母细胞保存温度体外成熟
- 良种绵、山羊重复超排效果的比较研究
- 2010年
- 重复超排技术是大幅度提高优良母畜繁殖力的有效方法,但对多个绵、山羊品种进行平行比较的研究还未见报道。本研究在季节、饲养管理、同期发情处理等条件基本相同的情况下,对3个具有代表性的良种绵羊(萨福克、杜伯和道塞特)和1个山羊(波尔山羊)进行重复超排效果研究。结果表明:3个品种绵羊重复超排效果均无显著差异(P>0.05),重复超排效率稳定;波尔山羊二次超排获得的平均回收胚数和可用胚数均显著低于一次超排,但第2次平均获得8.84枚/只的可用胚数在生产中也属理想效果;绵羊重复超排后获得的平均可用胚数少于8枚,而山羊重复超排后获得的平均可用胚数高于8枚。本研究量化了绵羊和山羊种间的差异性对重复超排效果的影响。
- 付静涛刘冉冉肖西山刘海军
- 关键词：重复超排种间差异绵羊山羊
- 影响绵羊、山羊超数排卵及胚胎移植效果因素分析被引量：19
- 2005年
- 在生产条件下,对3个优良品种的127只绵羊(道塞特47只、萨福克49只、杜泊31只)和111只波尔山羊供体使用不同国别生产的促卵泡素(FSH)实施超数排卵处理,然后对1 231只小尾寒羊和奶山羊受体实施不同方法的胚胎移植,旨在筛选出切合于生产实际成本低、效率高的超数排卵和胚胎移植方案。实验结果表明,使用新西兰产FSH对波尔山羊超数排卵后平均获得可用胚胎14枚/只,显著高于澳大利亚产FSH效果(平均7.59枚/只)(P<0.05),而中国科学院产FSH的超排效果(平均10.38枚/只)与新西兰产无显著性差异(P>0.05);进一步采用中国科学院产和新西兰产FSH分别对道塞特、萨福克和杜泊3个品种绵羊实施超数排卵结果,获得平均可用胚胎数均无显著性差异(P>0.05);使用腹腔内窥镜法和常规手术法胚胎移植结果表明,移植妊娠率分别为57.44%和60.20%,2种方法间无显著性差异(P>0.05)。由于中国科学院产FSH价格便宜,而腹腔内窥镜法胚胎移植可大大缩短操作时间,两者结合可降低成本、提高效率,适宜羊胚胎移植产业化应用。
- 付静涛朱士恩余文莉刘国世冯建忠张忠诚
- 关键词：绵羊山羊超数排卵胚胎移植妊娠率
- 影响受体牛冷冻移植胚胎效果的主要因素被引量：15
- 2008年
- 试验研究影响受体牛移植冷冻胚胎效果的主要因素,目的是解决胚胎移植产业化中容易出现的技术问题,以提高牛胚胎移植妊娠率。在季节、饲养管理、同期发情处理和胚胎移植技术以及环境条件等基本相同的情况下,结果表明:西门塔尔杂交牛的移植利用率和移植妊娠率高于黄牛杂交牛和黑白花奶牛,但各组间无显著性差异(P>0.05);2～6周岁的受体牛移植利用率和移植妊娠率高于7周岁以上和2周岁以下的受体牛,但各组间无显著性差异(P>0.05);经产1～3胎受体牛移植利用率显著高于4胎以上的受体牛(P<0.05),而移植妊娠率则无显著性差异(P>0.05);体况上等与中等的受体牛移植利用率和移植妊娠率无显著性差异(P>0.05);同期发情处理时卵巢处于黄体期的移植利用率显著高于卵泡期,差异极显著(P<0.01);左侧卵巢有黄体的子宫角胚胎移植妊娠率显著高于右侧(P<0.05);胚龄对胚胎移植妊娠率高低依次为早期囊胚、桑椹胚和囊胚,但无显著性差异(P>0.05)。
- 付静涛朱士恩李树静刘国世柳占奇
- 关键词：冷冻胚胎移植妊娠率受体牛
- 电脉冲与化学激活联合处理对猪卵母细胞孤雌发育的影响被引量：8
- 2004年
- 探讨了猪卵母细胞电激活后间隔不同时间用化学药物处理对猪卵母细胞孤雌发育的影响。结果表明 :1)电激活后间隔 0 ,3,4 ,5和 6h再分别用 6 二甲基氨基嘌呤 ( 6 Dimethylaminopurine ,6 DMAP)、放线菌酮 (cyclohex imide ,CHX)处理 6h ,各组卵裂率、囊胚细胞数差异不显著 (P >0 0 5 ) ,但在 6 DMAP组中对照组囊胚率极显著高于其余各组 (P <0 0 1) ,在CHX组中对照组囊胚率极显著高于间隔 5和 6h组 (P <0 0 1) ,而其余各组之间差异不显著 (P >0 0 5 ) ;2 )电激活后间隔 4h再分别用 6 DMAP ,CHX和细胞松弛素B(CytochalasinB ,CB) + 6 DMAP处理 6h ,各组卵裂率差异不显著 (P >0 0 5 ) ,对照组囊胚率极显著高于其余各组 (P <0 0 1) ,其余各组囊胚率显著性均无差异 (P >0 0 5 )。对照组中无单倍体囊胚 ,二倍体囊胚为 88 2 4 % ,但 6 DMAP ,CHX ,CB + 6 DMAP中产生的囊胚大部分是单倍体 ,且三者之间无显著性差异 (P >0 0 5 )。以上结果说明 ,猪卵母细胞电激活后间隔一段时间再用DMAP和CHX激活 ,激活作用随时间的延长而减弱 ;猪卵母细胞电激活后 4h再用 6 DMAP ,CHX ,CB + 6 DMAP激活 ,产生的囊胚大部分为单倍体 ,该方法适于猪卵母细胞ICSI的激活。
- 蔡元张兆旺田见晖朱士恩刘国世成文敏曾申明李迎
- 关键词：卵母细胞孤雌发育核型
