国家自然科学基金(30570416)
- 作品数：4 被引量：19H指数：2
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- 乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc^2155细胞蛋白双向电泳图谱的差异分析被引量：4
- 2007年
- [目的]利用蛋白质组学方法,识别乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞后差异表达的蛋白质,为进一步探讨乙胺丁醇抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。[方法]采用载体两性电解质pH梯度双向凝胶电泳技术分离乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的总蛋白质,用PDQuest7.3.1图像分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质。[结果]空白对照组有268个斑点,Ethambutol(EMB)处理组有蛋白斑点195个,在相对分子质量和pI值分布的任一区域,EMB处理组蛋白斑点数均少于空白对照组,其中在EMB处理组中特异表达的蛋白质斑点有23个。[结论]乙胺丁醇处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的蛋白质组具有差异,这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究乙胺丁醇抑制分枝杆菌生长的作用机制并为寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。
- 湛垚垚龙潜卢小霞杨楠周艳辛毅
- 关键词：乙胺丁醇双向电泳
- 不同抗生素对耻垢分枝杆菌细胞蛋白质差异表达被引量：1
- 2008年
- 目的利用蛋白质组学方法,识别乙胺丁醇(EMB)、异烟肼(I NH)、利福平(RIF)处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞差异表达的蛋白质,探讨3种抗生素抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标。方法采用载体两性电解质pH梯度双向凝胶电泳技术分离乙胺丁醇、异烟肼、利福平处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的总蛋白质,用PDQuest 7.3.1图像分析软件比较分析,以识别比较差异表达的蛋白质。结果不同浓度的乙胺丁醇、异烟肼和利福平对耻垢分枝杆菌细胞的增殖均有不同程度的抑制作用。处理3 h时,耻垢分枝杆菌mc2155细胞增殖首次受到明显抑制;3种抗生素最佳处理浓度分别为:乙胺丁醇24.0μg/ml,异烟肼0.08μg/ml,利福平0.8μg/ml。比较蛋白质组分析显示,对照组有155个蛋白斑点,乙胺丁醇处理组有蛋白斑点147个,异烟肼处理组有蛋白斑点235个,利福平处理组有蛋白斑点161个。对照组、乙胺丁醇处理组,异烟肼处理组和利福平处理组的蛋白斑点的分布明显不同。结论3种抗生素处理前后,耻垢分枝杆菌mc2155细胞蛋白质组的差异分析有助于进一步研究抗生素的作用机制,并为寻找新的抗结核药物作用靶标提供基础依据。
- 湛垚垚刘晶华张翠丽辛毅
- 关键词：乙胺丁醇异烟肼利福平双向电泳
- 异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc^2 155细胞蛋白双向电泳图谱的差异分析被引量：1
- 2007年
- 目的利用蛋白质组学方法,识别异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2 155细胞(SM细胞)后差异表达的蛋白质,为进一步深入探讨异烟肼抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。方法观察不同浓度的异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌生长曲线,确定药物处理SM细胞的最佳时间和浓度,并提取在最佳处理时间和浓度条件下的SM细胞总蛋白,采用载体两性电解质pH梯度双向凝胶电泳技术分离异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2 155细胞的总蛋白质,用PDuest7.3.1图像分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质。结果在空白对照组检出159个蛋白斑点,在异烟肼处理组检出221个蛋白斑点,在相对分子质量30 000~90 000和pH值4.5~6.0范围内,异烟肼处理组蛋白斑点数均多于空白对照组。结论异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的蛋白质组具有差异,提示异烟肼处理后促进了某些特定基因的表达。
- 湛垚垚张翠丽辛毅
- 关键词：异烟肼双向电泳
- 重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的策略被引量：13
- 2007年
- 重组蛋白技术在许多领域已成为一种必要的工具,但有时表达的目的蛋白却未进行正确的折叠而被蛋白酶降解或聚集形成包涵体。因此,人们在表达不同的目的蛋白时采用了多种方法以期获得具有生物学功能的蛋白质,包括共表达分子伴侣、融合表达、定位表达、改善诱导条件、添加促折叠试剂和选择宿主细胞等。本综述整理了近年来优化蛋白表达的成功经验,从以上方面讨论了如何提高目的蛋白表达的可溶性和促进目的蛋白的正确折叠。
- 董旭辛毅
- 关键词：重组蛋白蛋白折叠分子伴侣融合标签
