国家自然科学基金(30760170)
- 作品数：18 被引量：34H指数：4
- 相关作者：高庆华韩春梅孙献莹沈波魏海军更多>>
- 相关机构：塔里木大学中国农业科学院特产研究所XY公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区高校科研计划科学研究重点项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 不孕奶牛宫颈黏液相关ASA免疫印迹分析被引量：1
- 2013年
- 为探讨和分析免疫性不孕奶牛和可孕奶牛宫颈黏液ASA能够识别的精子膜抗原及其差异，本试验通过提取精子膜总蛋白，对24头免疫性不孕奶牛和14头可孕奶牛宫颈黏液ASA能够识别的精子抗原进行了比较分析。免疫印迹试验结果显示，不孕奶牛宫颈黏液ASA对分子质量为88-90ku、66ku、55~57ku、25-27ku的精子膜抗原有特殊免疫性反应，识别抗原率为100％（24／24）、100％（24／24）、87．5％（21／24）、70．8％（17／24）；而可孕奶牛宫颈黏液AsA对分子质量为88-90ku、55-57ku、25-27ku的识别率仅为21．4％（3／14）、14．2％（2／14）、14．2％（2／14），可孕奶牛宫颈黏液不能识别分子质量为66ku#~精子膜抗原。结果表明，不孕奶牛宫颈黏液ASA~g够识别更多的精子膜抗原，这些精子膜抗原可能与免疫性不孕有密切相关，对其深入的研究将有助于免疫性不孕相关精子膜抗原的筛选和鉴定。
- 马瑛马明沈辉骆新荣高庆华
- 关键词：奶牛抗精子抗体宫颈黏液免疫印迹
- 低剂量马鹿XY精液人工授精试验
- 2009年
- 利用流式细胞仪分离的马鹿X和Y型冷冻精液与常规精液对比,针对自然发情的马鹿采用直肠把握人工授精。结果表明:每剂(0.25mL)含有106个有效精子的X和Y型冻精输精产仔率分别为70%和80%,而含有107个有效精子的常规冻精为87%,两组间差异不显著(P>0.05),所产后代性别比率分别为0:7,8:0和12:14,与对照组相比性别比显著偏离。X和Y型冻精与常规冻精产后代的出生及60日龄的体重差异不显著(P>0.05)。
- 都惠中魏海军高庆华韩春梅邬俊财李生张志国张云梅
- 关键词：梅花鹿性别比
- 奶山羊XY精子分离及低剂量输精效果研究被引量：6
- 2009年
- 用假阴道法采集6只西农萨能羊种公羊精液,经过7h运输,利用流式细胞仪进行XY精子分离、冷冻。对16只阴道硅胶栓+孕马血清同期发情处理的母羊,撤栓后58～66h采用腹腔内窥镜子宫角低剂量输入106个有效Y精子,与用同一头种公羊人工授精配种的10只母羊进行对照。结果表明:1份(11号公羊)精液能够达到60%活率,X精子分离速度(4200sperm/sec)不同于Y精子分离速度(4500sperm/sec),共获得66管冻精(X31管,Y35管),X、Y型冻精活率分别为0.45±0.04和0.43±0.03;2h存活指数均为0.05;顶体完整率分别为(70.1±10.1)%和(68.9±6.8)%;每管有效精子数为104.85万±6.11万和103.20万±8.31万;性别比分别为94.36%和96.19%。腹腔内窥镜低剂量冻精输精试验中,试验组出生率为25%,而对照组为90%;试验组4只羔羊全部为雄性;试验组和对照组母羊妊娠期、羔羊出生重等差异不显著。因此,利用流式细胞分选和冷冻技术可以获得高纯度奶山羊冷冻X和Y精子,并通过腹腔镜低剂量输精能够获得健康后代。
- 高庆华罗军绳贺军田秀娥刘俊霞张顺理张志国张云梅
- 关键词：奶山羊流式细胞仪性别控制
- 马鹿XY精子对梅花鹿腹腔内窥镜输精试验被引量：2
- 2009年
- 41头梅花鹿被分为3组,CIDR+PMSG法同期发情,用流式细胞仪分离的马鹿X和Y型冷冻精液与常规精液对梅花鹿进行腹腔内窥镜子宫角人工授精。结果表明,0.25mL/支含有106个有效精子的X和Y型冻精产仔率分别为100%(2/2)和92%(22/24),而含有107个有效精子0.25mL/支的常规冻精产仔率为93%(14/15),X和Y型冻精与常规冻精组间的受胎率差异不显著(P>0.05)。X和Y精子受精后产出后代全部为预定性别,所产后代雌雄比率分别为:X组为0:2,Y组为22:0,与对照6:8相比性别比显著偏离。X和Y型冻精与常规冻精所产后代出生重及60d时的体重差异不显著(P>0.05)。
- 都惠中魏海军高庆华韩春梅邬俊财
- 关键词：马鹿梅花鹿腹腔内窥镜性别比人工授精
- 奶牛精子RNA提取被引量：5
- 2011年
- 优选3头公牛细管冻精,采用上游法获得纯化精子,以含体细胞污染的精子作对照,应用离心层析柱方法和Trizol一步法相结合提取总RNA,紫外分光光度计检测总RNA的D260/280值和产量,并对总RNA进行RT-PCR和凝胶电泳。结果显示,纯化的牛精子中不含体细胞,奶牛细管精液总RNA在2 h内完成提取,D260/280值为1.80,大于200 bp的总RNA产量为0.92μg/107个精子,精子总RNA进行RT-PCR,电泳后可得到清晰的SRY、LEP和RPS23基因3条带,不含18S rRNA基因条带。结果表明,离心层析柱法和Trizol一步法相结合可获得高质量的奶牛精子总RNA,且纯度和完整度高,可满足分子生物学研究的要求。
- 王惠娥孙献莹高庆华韩春梅沈波武延风
- 关键词：奶牛精子总RNART-PCR
- 哺乳动物X、Y精子分离研究进展被引量：8
- 2008年
- 哺乳动物性别控制是一项复杂的生物技术。这技术能使动物生产与人类意愿相一致性别的后代，意味着生产资料的高效利用和牧业生产效率的提高。性别控制技术也被用于挽救濒危物种，还可以使我们通过后代性别的选择而避免性连锁疾病的发生。性别控制技术具有非常重要的理论和现实意义。
- 高庆华韩春梅孙献莹
- 关键词：哺乳动物性别控制XY精子
- 低剂量梅花鹿XY精子马花杂交人工授精试验被引量：1
- 2007年
- 采用流式细胞分离仪分离的梅花鹿X和Y型冷冻精液与常规冻精对62头3组同期化处理的马鹿进行直肠把握人工授精。结果表明,0.25 mL/支含106个有效精子的X和Y型冻精产仔率分别为43%和37%,而0.25 mL/支含107个有效精子的常规冻精产仔率为55%,X、Y型冻精与常规冻精组间差异显著(P<0.05),所产后代性别比率分别为0∶10,9∶0和5∶6,X、Y型冻精与常规冻精组间差异显著(P<0.05),X、Y型冻精与常规冻精所产后代出生及60 d时的体重差异不显著(P>0.05)。
- 都惠中高庆华韩春梅魏海军邬俊财
- 关键词：梅花鹿性别比人工授精
- 不孕奶牛抗精子抗体(AsAb)检测及复方药物结合AI+MOET治疗试验被引量：4
- 2009年
- 采集正常牛20头和不孕牛23头发情宫颈黏液确定浅盘精子凝集检测不孕牛抗精子抗体(AsAb)标准,检测135头不孕牛AsAb并计算阳性率;对AsAb阳性不孕牛采用氯前列烯醇、双抗和氢化可的松相结合2次处理诱导同期发情检测AsAb阳性率,然后分别进行AI和AI+MOET治疗试验。结果显示,浅盘精子凝集检测不孕牛发情宫颈黏液AsAb可用1/16稀释和精子凝集率>10%作为判定标准,135头不孕牛中87头呈阳性,占64.4%。2次复方药物处理后AsAb阳性率由100%(87/87)下降到64.2%(53/87,P<0.05)。87头AsAb阳性牛经2次复方药物治疗后53头同期发情,被分为AI组(n=32)和AI+MOET组(n=21),AI+MOET组90 d受胎率和犊牛出生率达到57.1%和71.4%,分别显著高于AI组的34.4%的受胎率和34.4%犊牛出生率(P<0.05)。
- 高庆华韩春梅周虚
- 关键词：不孕奶牛人工授精胚胎移植抗精子抗体
- 牛、梅花鹿和山羊X、Y精子头部面积差异分析被引量：1
- 2011年
- 用流式细胞仪分选有正常繁殖力的公牛(n=3)、公鹿(n=3)、公山羊(n=1)的精液,获得高纯度(≥91%)X和Y细管冷冻精液,对解冻后的X和Y精子进行常规染色制片,采用Motic Images Advanced 3.2软件自动测量X精子和Y精子头部面积。结果显示,公牛X精子的头部面积35.84μm2±4.12μm2,极显著高于Y精子(34.81μm2±3.72μm2)(P<0.01);梅花鹿X精子的头部面积33.29μm2±2.93μm2,极显著高于Y精子(32.90μm2±3.25μm2)(P<0.01);山羊X精子的头部面积28.53μm2±3.16μm2,也极显著高于Y精子(28.07μm2±3.19μm2)(P<0.01);不同分选纯度的公牛精液X精子之间、Y精子之间头部面积差异均不显著(P>0.05)。结论:牛、梅花鹿、山羊X精子头部面积均极显著高于Y精子。
- 宫昌海王惠娥高庆华唐继伟
- 关键词：公山羊精子流式细胞仪
- 应用牙釉质基因鉴定绒山羊早期胚胎的性别被引量：1
- 2012年
- 采用酚-氯仿法和煮沸法从南疆绒山羊血液和早期胚胎中提取基因组DNA,分别以雄羊和雌羊的血液基因组DNA和早期胚胎基因组DNA(约20～30胚胎细胞)为模板,以AMEL引物进行PCR扩增和电泳分析.结果表明:绒山羊5ng量和10pg量血液基因组DNA经扩增后雌性只得到1条非特异性带,雄性得到1条非特异性带和1条特异性带;超微量血液基因组DNA样本(10pg)经巢式扩增和电泳分析能够鉴定绒山羊性别;32枚绒山羊胚胎鉴定结果,雄雌性别比17/15;移植胚胎产羔雄雌比15/14.采用牙釉质基因(AMEL),经巢式扩增和电泳分析能够鉴定绒山羊性别,并对胚胎无损伤;南疆绒山羊早期胚胎性别鉴定结果与胚胎移植后产羔性别结果对比,雌雄性别比率差异不显著(P>0.05).
- 王惠娥张志国高庆华唐纪伟沈波
- 关键词：南疆绒山羊胚胎性别鉴定巢式PCR
