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四川省应用基础研究计划项目(2008JY0082)

作品数：3 被引量：9H指数：2
相关作者：马兵魏平李晨阳许雪峰刘漪沦更多>>
相关机构：成都医学院成都医学院第一附属医院武警四川省消防总队医院更多>>
发文基金：四川省应用基础研究计划项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白1基因
  • 1篇凋亡
  • 1篇凋亡相关
  • 1篇凋亡相关蛋白
  • 1篇增生
  • 1篇增生性瘢痕
  • 1篇增生性瘢痕成...
  • 1篇质粒
  • 1篇质粒构建
  • 1篇烧伤
  • 1篇深度烧伤
  • 1篇生物敷料
  • 1篇双杂交系统
  • 1篇双杂交系统技...
  • 1篇皮肤移植
  • 1篇皮移植
  • 1篇瘢痕
  • 1篇瘢痕成纤维细...
  • 1篇微粒皮

机构

  • 2篇成都医学院
  • 1篇四川大学
  • 1篇重庆医科大学...
  • 1篇成都医学院第...
  • 1篇西安医学院附...
  • 1篇武警四川省消...

作者

  • 3篇马兵
  • 1篇刘月明
  • 1篇赵云
  • 1篇刘漪沦
  • 1篇许雪峰
  • 1篇李晨阳
  • 1篇贺光照
  • 1篇魏平
  • 1篇汪静
  • 1篇张克
  • 1篇刘洋
  • 1篇张伟

传媒

  • 1篇四川医学
  • 1篇中国修复重建...
  • 1篇中华烧伤杂志

年份

  • 2篇2012
  • 1篇2009
共 3 条 记 录，以下是 1-3
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排序方式：
基因转染猪皮在大面积深度烧伤患者微粒皮移植中的临床应用被引量：7
2009年
目的研究基因转染猪皮作为覆盖物在大面积烧伤患者自体微粒皮移植中的临床应用效果。方法在自体微粒皮移植中应用基因转染猪皮作为覆盖物,以新鲜猪皮作为对照,采用随机开放设计,观察猪皮覆盖物排异反应情况与相应微粒皮移植后创面愈合情况。结果试验组基因转染猪皮开始发生排异反应的时间为第(19.6±3.4)天,对照组新鲜猪皮开始排异时间为第(15.2±3.7)天,试验组、对照组微粒皮移植术后6周创面愈合率分别为(80.3±2.5)%、(71.6±1.9)%;差异均有统计学意义。结论应用基因转染猪皮作为微粒皮移植覆盖物,排异反应发生时间延迟,微粒皮移植术后创面愈合较新鲜猪皮好。
刘漪沦马兵刘月明李晨阳许雪峰魏平
关键词：皮肤移植生物敷料烧伤
人分泌的凋亡相关蛋白1基因酵母双杂交诱饵载体的构建及表达鉴定
2012年
目的构建人分泌的凋亡相关蛋白1(secreted apoptosis-related protein 1,SARP1)基因酵母双杂交诱饵载体,为鉴定SARP1基因相互作用蛋白、探讨SARP1基因在瘢痕组织中的生物学功能奠定基础。方法根据GenBank中SARP1的mRNA序列,设计分别带有NdeⅠ和SalⅠ酶切位点的上、下游引物,人工合成SARP1基因片段,扩增SARP1基因片段,构建含pGBKT7-SARP1基因的重组质粒,用NdeⅠ和SalⅠ进行双酶切、PCR,凝胶电泳及测序。用醋酸锂法将序列正确的重组质粒pGBKT7-SARP1(卡那霉素抗性筛选)转化入AH109酵母菌株,在缺陷型培养基上观察pGBKT7-SARP1在AH109中的表达情况。结果 SARP1基因扩增后的片段大小符合预期,并成功克隆入pGBKT7载体中;酶切后凝胶电泳及DNA测序显示pGBKT7-SARP1基因重组载体构建正确,对酵母菌株AH109无毒性,且不具自主激活报告基因的效应。结论成功构建了pGBKT7-SARP1基因酵母双杂交诱饵载体。
张伟贺光照马兵
关键词：质粒构建酵母双杂交系统
增生性瘢痕成纤维细胞中羟基丙酮酸异构酶同系物结合结构域分析被引量：2
2012年
目的 了解增生性瘢痕Fb中羟基丙酮酸异构酶同系物（HYI）与P311蛋白相互作用的结合区域. 方法（1）以克隆有P311的pMD18-T质粒为模板,对P311进行PCR扩增；Trizol法提取人增生性瘢痕Fb的总RNA,对HYI进行RT-PCR扩增,采用双酶切法分别构建pGA DT7-P311和pGBKT7-HYI重组载体,PCR及测序验证.采用Prot Seale软件和HNN软件对HYI蛋白进行二级结构分析,据此结果扩增HYI-1（1 ～447 bp）、HYI-2（247 ～447 bp）、HYI-3（1 ～279 bp）、HYI-4（247 ～654 bp）片段,双酶切法构建pGBKT7-HYI-1、2、3、4重组载体,经PCR及测序验证.（2）采用醋酸锂法将酵母细胞AH109制备成感受态细胞,粗略等量分为HYI全长与HYI-1、2、3、4杂交组,以及阳性对照组和阴性对照组.采用聚乙二醇-醋酸锂法,前5组分别同时转化pGBKT7-HyI全长、各片段的重组载体与pGADT7-P311重组载体,后2组分别同时转化pGBKT7-53与pGADT7-RecT重组载体、pGBKT7-Lam与pGADT7-RecT重组载体.转化后即刻,取各组部分细胞分别涂布在缺乏亮氨酸、色氨酸、腺嘌呤及组氨酸的培养基（简称四缺培养基）上,另取各组部分细胞分别涂布在缺乏亮氨酸和色氨酸的培养基（简称二缺培养基）上,培养3～6d,观察菌株生长情况,5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷显色反应检测菌落β半乳糖苷酶表达. 结果（1）克隆出的P311片段与Genbank中P311（序号hsu36189）序列一致.与Genbank中HYI（序号AY775560）序列对比,HYI基因扩增片段在496 bp处的A替换为了G.经验证各重组载体插入片段无误.（2）计算机模拟结果显示,组成HYI蛋白的216个氨基酸中,可能形成α螺旋的氨基酸有101个,可能形成无规则卷曲的氨基酸有90个,可能形成延伸链的氨基酸有25个.（3）HYI-1、2、3、4克隆片段大小与预期相符,经验证各重组载体插入片段无误.（4）除阴性对照组菌株未见在四缺培养基上生长外,其他组菌株均在2种培养基上生长,�
汪静刘洋张克马兵赵云
关键词：瘢痕成纤维细胞双杂交系统技术
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