广东省科技攻关计划(2010B031600204)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：单鸿黄明声庞鹏飞李丹关守海更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院中山大学广州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技攻关计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 磁性荧光双标人骨髓间充质干细胞归巢至大鼠急性损伤肝组织示踪显像被引量：1
- 2015年
- 目的观察磁粒子和荧光染料双标人骨髓间充质干细胞归巢至大鼠急性损伤肝组织的示踪。方法以超顺磁性氧化铁(SPIO)和氯甲基苯甲酰氨(CM-Dil)标记永生化人骨髓间充质干细胞(UE7T-13)。普鲁士蓝染色检测细胞内铁,荧光显微镜和流式细胞仪检测CM-Dil标记阳性率。建立12只急性肝损伤大鼠模型,分为实验组(n=6)和对照组(n=6),将标记细胞经尾静脉移植入实验组大鼠,未标记细胞移植入对照组大鼠。分别于移植前3h、移植后3h、3天、5天、7天应用MR T2*W、T2*map对大鼠活体成像,获得肝脏R2*值。并与肝脏组织切片普鲁士蓝染色和CM-Dil荧光表达情况对照。结果双标细胞的SPIO-PLL标记率接近100%,流式细胞仪检测CM-Dil标记阳性率达99.97%。实验组细胞移植后3天、5天肝脏R2*值均较移植前明显升高(t=7.282、7.608,P均<0.01),对照组细胞移植后各时间点与移植前比较,R2*值差异均无统计学意义(F=0.99,P>0.05)。普鲁士蓝阳性细胞主要分布于肝小叶中央静脉周围病变区,荧光显微镜下观察红色荧光阳性细胞与普鲁士蓝阳性细胞分布基本一致。结论 SPIO和CM-Dil可有效标记人永生化骨髓间充质干细胞(UE7T-13),不影响细胞增殖能力,临床应用型1.5T MR可对磁粒子标记的UE7T-13进行肝归巢活体示踪,CM-Dil有助于证实存活干细胞的肝内定植。
- 赖丽莎陈俊伟朱康顺黄明声柏沙美江新青单鸿杨蕊梦
- 关键词：间充质干细胞磁共振成像
- 多功能纳米基因载体转染人脂肪间充质干细胞及体外细胞磁共振显像被引量：3
- 2014年
- 目的 观察多功能纳米基因载体聚乙二醇-聚乙烯亚胺-超顺磁性氧化铁（PEG-g-PEI-SPION）转染人脂肪间充质干细胞（hADMSCs）的可行性、效率及体外细胞磁共振显像功能.方法 根据先前报道的方法合成PEG-g-PEI-SPION.采用凝胶阻滞实验评估其复合外源性基因的能力;动态光散射法测量PEG-g-PEI-SPION/pDNA纳米复合物的粒径大小及表面电位;体外细胞毒性实验检测其对hADMSCs的细胞毒性.使用流式细胞分析仪检测PEG-g-PEI-SPION转染hADMSCs的效率.通过激光共聚焦显微镜及锥虫蓝染色实验研究hADMSCs对PEG-g-PEI-SPION/pDNA纳米复合物的摄入.PEG-g-PEI-SPION的磁共振显像功能通过体外细胞磁共振扫描验证.结果 PEG-g-PEI-SPION细胞毒性小,复合外源性基因后能够形成稳定的纳米复合物,粒径80 ～ 100 nm.在N/P=20时PEG-g-PEI-SPION转染hADMSCs最高取得了22.8％±3.6％的转染率,高于商品化的阳离子脂质体Lipofectamine最高11.2％±2.6％的转染率（P＜0.05）.同时,PEG-g-PEI-SPION中的SPION可有效标记hADMSCs,在磁共振T2加权图像上呈低信号.结论 PEG-g-PEI-SPION是一种磁共振可视的,能有效转染hADMSCs的纳米基因载体.
- 庞鹏飞李冰胡晓俊康庄关守海巩发明孟晓春李丹黄明声单鸿
- 关键词：干细胞转染
