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江苏省高校自然科学研究项目(10KJB320019)
作品数:
3
被引量:7
H指数:2
相关作者:
朱雪松
毛海青
杨惠林
耿德春
徐耀增
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相关机构:
苏州大学
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徐耀增
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耿德春
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杨惠林
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毛海青
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朱雪松
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陈亮
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1篇
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选择性环氧化酶-2抑制剂调控RANKL/RANK通路抑制钛颗粒诱导的炎症性骨溶解
被引量:1
2013年
目的观察选择性环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂——帕瑞昔布对钛颗粒诱导骨溶解的治疗作用以及COX-2与NF—κB受体活化因子配体(receptor activator of NF—κB ligand,RANKL)/NF~KB受体(receptor activator of NF—κB,RANK)通路的关系。方法雌性BALB/c小鼠45只,其中15只作为颅骨供体,其余采用随机数字表法分为空白组、对照组和药物组,每组10只。采用钛颗粒诱导小鼠骨溶解模型,药物组建模前2d注射帕瑞昔布(6mg·kg^-1~·d^-1),持续至建模后2周。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate—resistant acid phosphatase staining,TRAP)染色检测成熟破骨细胞;免疫组织化学检测COX-2和RANKL表达变化;ELISA法检测囊壁中前列腺素E2(dinoprostone,PGE2)、IL-1β和TNF—α含量;定量RT—PCR检测COX~2、IL-1β、TNF—α RANK和RANKL基因mRNA含量。结果TRAP染色结果显示,药物组TRAP阳性区域面积占植入骨片面积比例为(0.27±0.03)%,与对照组[(0.60±0.06)%]比较差异有统计学意义(P〈0.01)。免疫组织化学结果显示,钛颗粒植入后囊壁内COX-2和RANKL深染区域增多;药物组RANKL阳性区域减少,但COX-2表达未见明显减少。RT—PCR结果显示,钛颗粒上调COX-2、IL-1β、TNF-α、RANK和RANKL基因mRNA表达水平,药物组RANK和RANKL基因mRNA水平较低,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。ELISA结果显示,药物组PGE2含量为(202.62±11.49)pg/ml,与对照组[(407.60±13.55)pg/m1]比较差异有统计学意义(P〈0.01);药物组IL-1β和TNF-α含量与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论选择性COX-2抑制剂——帕瑞昔布能下调RANKL/RANK的表达,减少TRAP阳性破骨细胞数量,减轻骨溶解;但对COX-2以及TNF—Or.和IL-1β的表达未产生明显影响。
耿德春
徐耀增
杨惠林
朱雪松
毛海青
王骏骅
孟斌
陈亮
关键词:
人工关节
破骨细胞
环氧化酶2
Ⅱ型大麻素受体选择性抑制剂对钛颗粒诱导破骨细胞活化的作用
被引量:4
2013年
目的观察Ⅱ型大麻素受体(CB2)选择性抑制剂AM630对钛颗粒(Ti)诱导炎性破骨细胞(OC)活化的影响。方法实验分5组,即空白组、核因子-κB(NF-κB)受体活化因子配体(RANKL)组、Ti组、R+Ti组、药物组。采用噻唑蓝(MTT)法检测0.1g/LTi颗粒和不同浓度AM630(50、100、200nmol/L)处理小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7后24、48、72h细胞增殖活性;以0.1g/LTi颗粒和(或)50μg/LRANKL诱导RAW264.7,6d时加入AM630再培养24h,以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟OC,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CB2、NF-κB受体活化因子(RANK)、肌酸磷酸激酶(CPK)基因mRNA含量,酶联免疫吸附试验(EusA)检测炎性因子白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平。结果MTF结果表明0.1g/LTi颗粒和(或)AM630(50、100、200nmol/L)对RAW264.7细胞增殖能力无影响。TRAP染色,RANKL组、R+Ti颗粒组均可见大量的紫红色多核细胞;Ti组、药物组阳性细胞较少,统计分析结果表明AM630≥100nmol/L时,TRAP阳性细胞数量与RANKL组[(18L80±14.23)/孔]比较差异有统计学意义(P〈0.05)。定量RT-PCR结果显示R+Ti组CB2、RANK以及CPKmRNA含量分别为11.26±1.39、9.68±0.91和9.93±0.56;药物组(100nmol/LAM630)上述基因mRNA含量为4.73±0.55、3.85±0.45和5.42±0.87,差异有统计学意义(P〈0.05)。ELISA结果显示,Ti颗粒加入24h后IL-1β、TNF-α的含量分别为(176.9±9.2)、(159.7±8.2)ng/L;与药物组[IL-1β:(105.5±7.0)ng/L,TNF-α:(75.9±8.1).g/L]比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论Ⅱ型大麻素受体选择性抑制剂AM630能够抑制Ti颗粒引起的炎性破骨细胞活化。’
耿德春
徐耀增
杨惠林
朱雪松
毛海青
王骏骅
孟斌
陈亮
关键词:
破骨细胞
炎症
钛颗粒
大麻素受体2
Ⅱ型大麻素受体选择性抑制剂在钛颗粒诱导炎症性骨溶解中的作用
被引量:2
2011年
目的观察Ⅱ型大麻素受体:(eannabinoid receptor 2, CB2)选择性抑制剂(AM630)对磨损颗粒诱导炎症性骨溶解的治疗作用。方法雌性cBALB/c小鼠45只,其中15只作为颅骨供体,其余采用随机数字表法分为空白组、对照组和药物治疗组,每组10只。采用钛颗粒诱导的小鼠air—pouch骨溶解模型,药物组建模前2d经腹膜下注射CB2抑制剂-AM630(200μg·kg-1·d-1),持续至建模后2周。小鼠处死取材,大体观察植入骨片周围炎症变化;HE染色观察细胞浸润程度;形态计量学检测囊壁厚度;抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate—resistant acid phosphatase staining, TRAP)染色检测成熟破骨细胞;定量RT—PCR检测CB2、IL-1β、TNF-α、核因子NF—KB配体的受体(receptor activator of NF - κB ligand, RANKL)和核因子NF—κB配体(receptor activator of NF—κB,RANK)mRNA含量。结果标本大体观察,对照组植入骨片周围有红肿、渗出等明显的炎症变化,药物治疗后,炎症改变明显减轻。HE染色结果表明,对照组囊壁内大量巨噬细胞浸润;空白组及药物组囊壁内细胞少,多为成纤维细胞;对照组囊壁较厚(192.2±19.4)μm,空白组和药物组囊壁厚度分别为(88.5±14.7)¨m、(122.1±15.2)Ixm,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05);对照组植入骨片周围TRAP深染区域较多,AM630治疗后深染区域明显减少;定量RT—PCR结果表明,钛颗粒刺激能够上调CB2、IL-1β、TNF-α、RANKL和RANKmRNA表达水平,药物组上述基因mRNA水平较低,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论CB2选择性抑制剂能降低磨损颗粒引起的炎症反应,抑制破骨细胞活化。CB2有望成为治疗人工关节无菌性松动的新靶点。
耿德春
徐耀增
杨惠林
朱雪松
王根林
毛海青
关键词:
人工关节
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