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三七中高产人参皂苷Rd真菌的鉴定被引量：4: 2012年; 从云南文山三七根茎上分离得到具有转化人参皂苷活性的真菌。采用的方法是:利用平板划线分离法,从三七根茎中分离纯化得到2株真菌,用该菌株对三七进行液态发酵。通过HPLC检测,对发酵前后皂苷变化进行分析,对两株真菌进行形态显微鉴定及ITS序列分析。结果表明,菌株形态及显微特征和产孢结构与木霉属一致,利用ITS序列与相关类群构建聚类树,确定实验2菌株ITS总长度为550bp,与长枝木霉Trichodermalongibrachiatum Rifai株菌(ATCC18648T、ATCC208859、DAOM167674、DAOM231259)仅在全ITS第134位点上发生间或缺失突变,鉴定2株真菌均为长枝木霉T.longibrachiatum。HPLC分析显示,菌株能够将三七中量多的大极性皂苷转化为小极性皂苷,并高产人参皂苷Rd。结论由此可以证明长枝木霉具有转化三七中皂苷的活性。; 王艳代永东葛锋虞泓赵方允; 关键词：生物转化 ITS 人参皂苷RD

三七中SS基因超表达载体的构建及其遗传转化被引量：13: 2013年; 三七总皂苷为三七主要的药用活性成分,但因其产量较低,使其药用价值很难得到推广。随着皂苷类物质生物合成途径研究的不断深入,通过代谢工程手段调控三七皂苷的生物合成逐步成为可能。本研究构建了皂苷合成途径中鲨烯合酶基因的超表达载体,并利用农杆菌介导法将超表达载体转移并整合至三七基因组中,通过PCR检测及皂苷含量检测,初步明确鲨烯合酶基因在三七皂苷生物合成途径中的作用,为将来三七总皂苷同源或异源高效表达系统的构建提供理论依据和技术基础。; 孙颖赵恒伟葛锋石磊刘迪秋; 关键词：愈伤组织三七总皂苷鲨烯合酶

三七中由RNAi介导的CAS基因沉默对三七皂苷含量的影响被引量：6: 2013年; 三七总皂苷为三七主要的药用活性成分,但因其产量较低,使其药用价值很难得到推广。三七皂苷和甾醇分别经达玛烯二醇合酶(DS)和环阿屯醇合酶(CAS)的催化共同的前体物质2,3-氧化鲨烯生成。利用Gateway技术建立了CAS基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并利用农杆菌介导法将其转移并整合至三七基因组中,由此方法抑制CAS的表达,阻断植物甾醇的合成,间接增加三七皂苷的产量。; 孙颖葛锋刘迪秋饶健; 关键词：三七总皂苷 GATEWAY技术

植物中DNA甲基化模式及其相关机制被引量：6: 2011年; DNA甲基化是表观遗传修饰的重要形式之一,是植物中较早发现的DNA共价修饰方式。在植物的正常生长发育中,DNA甲基化与植物基因组维持、体细胞无性系变异、外来基因防御、内源基因的表达、转基因沉默以及基因印迹之间有着极大的关系,因此,植物DNA甲基化的研究对植物基因工程的发展有着举足轻重的作用。本文介绍了参与DNA甲基化的各种酶和蛋白质,阐述了DNA甲基化相关机制的最新研究进展。; 孙颖葛锋刘迪秋陈朝银; 关键词：DNA甲基化 DNA甲基转移酶组蛋白修饰

三七总皂苷生物合成与关键酶调控的研究进展被引量：18: 2010年; 三七总皂苷(PNS)属于达玛烷型三萜皂苷,是中国传统珍贵药材三七的主要活性成分,三七总皂苷在中枢神经系统、心脑血管系统、血液系统、免疫系统以及抗纤维化、抗衰老、抗肿瘤等方面均具有较好的生理活性。三七总皂苷是以达玛烯二醇为前体,在P450单加氧酶和糖基转移酶催化下形成。另外,三七总皂苷与植物甾醇共享前期代谢途径。该文对近年来国内外有关三七总皂苷的生物合成途径及关键酶基因的最新研究进展进行综述,并探讨了代谢工程在三七总皂苷生物合成中的应用前景。; 石磊葛锋刘迪秋陈朝银; 关键词：三七总皂苷生物合成关键酶代谢工程

三七中分离微生物对其转化的初步研究被引量：5: 2011年; 目的从云南三七材料中分离共生菌,对三七进行发酵转化,研究转化后皂苷成分的变化。方法采用平板划线分离法,从三七根茎、花、种子等材料中分离纯化共生菌,经液体发酵,通过TLC、UV、HPLC等检测方法,对转化前后皂苷变化进行分析。结果共分离出真菌27株,细菌2株初步筛选出两株对皂苷单体转化明显的菌株,转化后总皂苷含量有所增加。结论从三七材料中分离的真菌可以对三七进行定向转化,得到稀有皂苷,并提高总皂苷含量。; 赵方允虞泓陈自宏曾文波殷勤红葛锋; 关键词：真菌发酵人参皂苷皂苷

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国家自然科学基金(31060044)