江苏省高校自然科学研究项目(09KJD320004)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
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- polo样激酶-1干扰质粒构建及对人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡的影响
- 2012年
- 目的构建polo样激酶-1（PLK1）基因小于扰RNA（siRNA），观察其对肝癌细胞凋亡的影响。方法设计合成3个PLK1siRNA（siRNAl、siRNA2、siRNA3）干扰序列，构建干扰载体，转染人肝癌细胞株SMMC-7721，观察48h后转染效率，采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）筛选下调PLK1mRNA效果最好的siRNA；然后选择以该siRNA转染48h的SMMC-7721细胞，分别以实时定量RT－PCR和Westernblot法检测空白组、对照组及转染组细胞中PLK1基因和蛋白表达；流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的改变。结果肝癌细胞株SMMC-7721中存在PLK1蛋白的过表达。应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞48h后，PLK1mRNA相对水平siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了74％和78％，而PLK1蛋白的表达siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了83％和88％，抑制率达88％；siRNA2组中出现大量凋亡细胞，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PLK1基因在肝癌细胞增殖中具有重要的调控作用。PLK1-siRNA转染可明显抑制癌细胞增殖，诱导凋亡是其重要机制之一。
- 倪侃陈佳慧贾乃昕吴龙祥常仁安陈钟
- 关键词：肝细胞小干扰RNA
- RNA干扰技术及治疗肝细胞癌应用前景被引量：3
- 2012年
- RNA干扰技术可抑制目的基因的表达,具有高序列特异性、高效性、可传播性和浓度依赖性。其通过沉默癌基因,促进癌细胞凋亡,发挥治疗恶性肿瘤的作用。RNA干扰技术可应用于肝细胞癌发生、发展和转移等任何有基因高表达的环节,如点突变激活的癌基因、插入基因、融合基因、肿瘤多药耐药基因、血管生长因子及其受体等都可以作为RNA干扰作用的靶点,抑制相关基因表达,促进凋亡,抑制端粒酶活性,减少转移与复发,发挥对肝癌的治疗作用。RNA干扰技术对肝癌的治疗有着广阔的应用前景。
- 常仁安陈钟陈小建
- 关键词：RNA干扰肝细胞癌基因
- RNA干扰PLK1基因表达对肝癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨靶向PLK1基因在肝癌基因治疗中的可行性。方法采用PLK1小干扰核糖核酸分子(siRNA)转染人肝癌HepG2细胞,分别以荧光实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因和蛋白的表达水平,观察PLK1 siRNA转染对肝癌细胞体外增殖的影响。并于转染不同时间后收集细胞,分别采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测肝癌细胞的凋亡情况。结果 PLK1基因明显抑制癌细胞体外生长(P<0.05)。肝癌HepG2细胞经siRNA转染处理后,PLK1 mRNA和蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。DNA电泳出现明显的梯度图谱;转染组癌细胞凋亡指数明显增加。结论 PLK1 siRNA转染可明显抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡有关。本结果为肝癌以PLK1基因治疗提供了一条新的思路。
- 陈钟陈小建常仁安
- 关键词：PLK1小干扰RNA细胞增殖
- 丝/苏氨酸蛋白激酶PLK1在肿瘤中的研究进展被引量：1
- 2012年
- PLK1是一类高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。PLK1与不同细胞周期检查点的精密调控有关,其在细胞有丝分裂进程中的重要作用已被阐明。PLK1在增殖活跃的细胞中呈高水平表达,PLK1的高度表达和肿瘤患者的低存活率之间具有相关性;PLK1有可能成为肿瘤分子靶向治疗中的有效靶点。
- 倪侃陈钟
- 关键词：肿瘤细胞周期
