国家科技支撑计划(2011BAE06B04-16)
- 作品数：5 被引量：63H指数：4
- 相关作者：李元广张道敬罗远婵田黎刘振华更多>>
- 相关机构：华东理工大学生物技术有限公司国家海洋局第一海洋研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程农业科学生物学更多>>
- Bacillomycin D发酵与纯化工艺优化及其抑菌活性初步研究被引量：5
- 2017年
- 为建立高纯度bacillomycin D(杆菌霉素D)脂肽的可放大制备工艺,促进其在农用抗生素领域应用价值的开发,经分离纯化及分子结构鉴定,确定了海洋源解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens TYg 3-2所产活性化合物为bacillomycin D脂肽类抗生素;选择精制过的天然培养基(酵母提取物和蛋白胨),与组分明确的速效碳源、氮源(葡萄糖和硫酸铵)组成复合培养基,结合响应面优化调整培养基配方,建立了bacillomycin D发酵水平高达990 mg/L的5 L罐发酵工艺,其20.62 mg/(L·h)的比生产速率远高于文献报道的10.23 mg/(L·h);在高品质原料基础上,发酵液经菌液分离、酸化沉淀、甲醇浸提、乙醚沉淀、大孔树脂吸附及硅胶柱层析工艺,可高效制备纯度达94.72%的样品。针对所制备的高纯度bacillomycin D样品进行了抑菌活性初步研究,证实其可离体拮抗德氏霉菌、玉米弯孢霉、稻绿核菌和长柄链格孢,并通过盆栽试验证实了bacillomycin D能提升同源芽孢杆菌TYg 3-2的防效,500 mg/L的bacillomycin D与4×10~6 CFU/mL的TYg 3-2菌体混合施用,对黄瓜炭疽病的防效可达95.3%,优于单独施用bacillomycin D(78.4%)和菌体(0)的防治效果。研究初步探索了bacillomycin D在农用抗生素领域的开发价值,同时其高纯度脂肽可放大制备工艺的建立至关重要,不仅能在保全生产菌(其芽孢为生防菌剂原料)的同时从其发酵液中分离和纯化目标脂肽,以促成对农用抗生素价值的深入研究,也能够满足中国农药登记相关毒理学试验对样品的要求(纯度>85%的克量级样品),其结果可为芽孢杆菌源脂肽类抗生素的研究与开发提供参考。
- 顾康博张道敬罗远婵李元广
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌发酵工艺优化抑菌活性
- 农用微生物杀菌剂剂型研究进展被引量：36
- 2014年
- 农用微生物杀菌剂的主要剂型有粉剂(DP)、可湿性粉剂(WP)、颗粒剂(GR)、水分散粒剂(WG)和悬浮剂(SC)等。我国现有的农用微生物杀菌剂剂型种类较为单一,主要为可湿性粉剂,未来应加强其他剂型如水分散粒剂和悬浮剂等的研究开发。生防菌的活菌数、制剂加工和贮存条件以及田间环境因素等对农用微生物杀菌剂的防效均有很大影响,科学合理地评价这些影响,并研究其形成原因和内在规律,对农用微生物杀菌剂的深入研究开发具有重要意义。文章从剂型种类、性质、质量控制以及生产条件、贮存条件和田间环境条件对制剂性质与防效的影响等方面,对农用微生物杀菌剂剂型的研究现状和存在问题进行了详细的综述,并分析了其未来发展趋势。
- 刘振华罗远婵张道敬李元广
- 关键词：微生物农药剂型作物病害生物防治
- 海洋芽孢杆菌可湿性粉剂配方的优化被引量：14
- 2014年
- 为提高海洋芽孢杆菌B-9987可湿性粉剂(WP)的润湿性和悬浮率,降低其pH值,通过助剂筛选、混料设计试验等方法优化了制剂配方。结果表明:以十二烷基硫酸钠作为该可湿性粉剂的助剂时,助悬浮及助润湿效果明显;通过混料设计试验确定了该可湿性粉剂固体介质的最佳配比(质量分数)为:十二烷基硫酸钠9.54%,轻质碳酸钙83.74%,高岭土6.72%;其预测悬浮率为75.15%,pH为8.62,润湿时间89.40 s,验证试验结果悬浮率为73.13%,pH 8.33,润湿时间100.00 s,二者比较接近。优化后的海洋芽孢杆菌可湿性粉剂不需经过高耗能的气流粉碎过程即可达到农药可湿性粉剂标准的要求,可明显降低生产成本。
- 刘盼西李淑兰李元广张道敬罗远婵田黎
- 关键词：可湿性粉剂
- 海洋芽胞杆菌B-9987产新型抗菌环脂肽Marinhysin A的培养基优化被引量：10
- 2013年
- Marinhysin A(MA)是由海洋芽胞杆菌B-9987产生的具有抗真菌活性的新结构环脂肽类化合物,该化合物不仅抑菌谱广而且盆栽防效良好。采用响应面分析法(Response SurfaceMethnology)对海洋芽胞杆菌B-9987产脂肽MA的培养基进行了优化。Plackett-Burman(PB)实验表明,蔗糖和酵母粉是显著影响MA产量的因素。中心组合实验(Central Composite Design)分析表明,当培养基中蔗糖和酵母粉的含量分别为42.0g/L和42.3g/L时,MA的浓度最大可达68.19mg/L,与实验值75.74mg/L相近。优化后,MA产量(250ml摇瓶发酵)较优化前的54.12mg/L提高了28.5%。用优化后培养基进行5L罐发酵,MA浓度可达182mg/L,较优化前的130mg/L提高了28.4%。
- 陈杰魏鸿刚罗远婵张道敬李淑兰田黎李元广
- 关键词：培养基优化响应面分析法
- 中试规模纯化海洋芽孢杆菌源脂肽类化合物被引量：4
- 2016年
- 本次研究旨在建立经济可行的海洋芽孢杆菌源脂肽类化合物的中试规模纯化工艺。对包括酸化沉淀、甲醇浸提、溶剂沉淀、盐析、萃取、硅胶柱层析和HZ806大孔树脂吸附工艺在内的可放大的成熟单元工艺进行反复试验,考察脂肽类化合物表面活性对单元工艺的影响。严格遵循以高收率为前提循序渐进逐步减少杂质的原则,组合上述单元工艺对目标产物进行提取和纯化,并最终获得高纯度脂肽样品。新工艺可从1 t海洋芽孢杆菌Bacillus marinus B-9987的发酵液中,以百克量级的规模制备87.51%–100%纯度的脂肽类化合物样品,收率>81.73%。本研究首次实现了高纯度的海洋芽孢杆菌源脂肽类化合物的百克量级制备;允许发酵生产阶段使用天然培养基,缓解了脂肽中游发酵生产和下游大规模纯化之间的矛盾;且各单元工艺规避了脂肽类化合物水溶液的乳化起泡和不经济的大体积水溶液蒸发浓缩。新工艺实用可行,经济合理。
- 顾康博管成许家慧李淑兰罗远婵沈国敏张道敬李元广
- 关键词：脂肽
