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江苏省自然科学基金(BK2005099)
作品数:
2
被引量:16
H指数:2
相关作者:
陈建华
王旻
刘广桢
李晓娟
李依芯
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相关机构:
中国药科大学
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发文基金:
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陈建华
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王旻
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1篇
2007
1篇
2005
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尿酸酶产生菌的筛选、基因克隆及表达
被引量:11
2005年
目的:构建表达尿酸酶的重组基因工程菌,提高尿酸酶的表达量。方法:从12株酵母菌中筛选得到1株产尿酸酶的产朊假丝酵母Cu2357菌株,应用DNA重组技术,将野生菌尿酸酶基因克隆到表达载体pKA中,获得重组尿酸酶基因工程菌E.colipKU/JM109。结果:构建的表达载体中的目的基因序列正确。经SDS-PAGE检测表明,表达的蛋白质相对分子质量约为34 kDa,含量占细胞可溶性蛋白的49%。优化培养条件后,发酵液尿酸酶活力可达16 U/mL,是野生菌产尿酸酶量的240多倍。结论:尿酸酶基因在E.colipKU/JM109中实现了高效表达。
刘广桢
陈建华
王旻
关键词:
尿酸酶
E.COLI
克隆
重组尿酸酶部分理化性质及其初步药效学研究
被引量:6
2007年
产朊假丝酵母尿酸酶由基因工程菌表达,文章对重组蛋白的亚基相对分子质量、最适作用温度、最适作用pH及其热稳定性和pH稳定性等理化性质进行了考察。成功构建了小鼠高尿酸血症动物模型,并用于重组尿酸酶的初步体内药效学研究。结果:经SDS-PAGE检测重组尿酸酶亚基的表观相对分子质量为32.4k。酶的最适作用温度和pH分别为40℃和8.0,且在pH6-12,温度20℃~60℃条件下比较稳定。初步体内药效学研究结果表明,重组尿酸酶可以显著降低模型小鼠体内的血尿酸水平。
李晓娟
李依芯
陈建华
关键词:
尿酸酶
理化性质
高尿酸血症模型
药效学
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