河北省自然科学基金(C2014204027)
- 作品数：3 被引量：26H指数：2
- 相关作者：张冬冬朱宝成姜军坡高同国刘涛更多>>
- 相关机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金保定市科技局科学技术研究与发展指导计划项目河北省教育厅课题更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- Bacillus malacitensis Z-5菌株合成抑菌物质培养基优化及成分鉴定被引量：2
- 2019年
- 【目的】Bacillus malacitensis Z-5菌株对棉花黄萎病有显著防治效果,产生抑菌物质是其发挥防治作用的主要因素。本研究旨在优化Z-5菌株产生抑菌物质的培养基组成,分析抑菌物质的成分及其合成相关基因。【方法】由单因素试验确定最佳碳源、氮源及无机盐,利用最速上升法确定碳源、氮源以及无机盐最优含量区域,根据Box-Behnken试验设计,以发酵上清液对棉花黄萎病菌大丽轮枝菌(Verticillium dahlia Kleb.)的拮抗活性为指标,筛选Z-5菌株产生抑菌物质的最优培养基组成。利用液相色谱-质谱联用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometer,LC-MS)法鉴定抑菌物质,并对抑菌物质合成相关基因进行检测。【结果】Z-5菌株产生抑菌物质最佳培养基组成为2.68%(质量分数,下同)玉米粉、1.45%酵母粉、0.03%K_2SO_4、0.8%Na_2HPO_4·12H_2O、0.2% NaH_2PO_4·2H_2O(pH 7.2～7.4),抑菌圈直径为1.34 cm,与预测值相近,证实该模型可靠有效。抑菌物质主要为脂肽抗生素C14表面活性素B,C14～C17伊枯草菌素A,C14、C15、C17伊枯草菌素B等。聚合酶链式反应检测结果显示,Z-5菌株基因组含有合成脂肽抗生素的基因srf AB、ituC和ituD。【结论】本研究优化了Z-5菌株产生抑菌物质的培养基组成,明确了其抑菌物质为脂肽抗生素,为利用该抑菌物质进行棉花黄萎病菌的防治提供了理论参考和物质基础。
- 高宇陈尧尧刘忆杰陈晓萌高同国张冬冬
- 关键词：棉花黄萎病BACILLUS拮抗发酵条件
- 棉花黄萎病生防芽孢杆菌Z-5菌株发酵培养基的优化被引量：13
- 2014年
- 在农用微生物菌剂中芽孢杆菌菌剂产品多采用芽孢作为有效成分，因此产芽孢条件的优化对棉花黄萎病生防细菌的工业生产有着重要意义。本文通过单因素试验分析了8种碳源、8种氮源和6种无机盐对Bacillus malacitensis Z-5菌株芽孢产量的影响，采用Plackett-Burman试验设计确定了影响芽孢产量的主要因素，用最陡爬坡路径逼近最大响应区域，利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法确定主要影响因素的最佳条件。结果表明，单因素试验筛选出3种碳源（玉米粉、麸皮、葡萄糖）、3种氮源（豆饼粉、花生饼粉、酵母粉）和2种无机盐（MnSO4·H2O、CaCl2）；Plackett-Burman试验确定Z-5菌株生产芽孢最适碳源、无机盐和氮源分别为玉米粉、MnSO4·H2O和豆饼粉，最陡爬坡路径法获得此3种因子的最适浓度范围为：玉米粉1.0%~2.0%、MnSO4·H2O 0.05%~0.09%、豆饼粉为1.0%~2.0%。响应面法得到芽孢产量与玉米粉、MnSO4·H2O和豆饼粉含量的回归方程。最终确定优化培养基组合为玉米粉1.66%、豆饼粉1.30%、MnSO4·H2O 0.07%、NaH2PO4·2H2O 0.2%、Na2HPO4·2H2O 0.4%，优化后芽孢产量达到1.97×109 mL-1，与理论值基本相符。
- 张冬冬姜军坡朱宝成
- 关键词：响应面法棉花黄萎病生物防治芽孢杆菌
- 棉花黄萎病拮抗细菌Z-5菌株的定殖能力检测被引量：12
- 2013年
- 拮抗微生物能否在植株根围成功定殖是植物病害生物防治的第一步。以棉田土壤中分离的对棉花黄萎病有较高生物防治效果的芽孢杆菌Z-5菌株为材料,采用抗利福平和抗病原真菌法标记Z-5菌株,筛选出在300μg·mL-1利福平的NA培养基上稳定生长,对棉花黄萎病病原真菌有拮抗作用、菌落形态和菌体形态均未改变的Z-5突变体菌株。利用标记的Z-5菌株对棉花种子进行浸种、拌种和浇土处理,在含有利福平的平板上通过稀释涂布法定期检测棉花植株根际土壤、根、茎、叶中Z-5菌株的数量。结果表明,浇土组棉花根际土壤拮抗细菌Z-5平均数量为49.72×104cfu·g-1,浸种组为0.49×104cfu·g-1,拌种组为2.07×104cfu·g-1。浇土组根内Z-5平均数量为4.93×104cfu·g-1,浸种组为4.12×104cfu·g-1,拌种组为3.29×104cfu·g-1。浇土组茎内Z-5平均数量为1.32×104cfu·g-1,浸种组为0.17×104cfu·g-1,拌种组为0.74×104cfu·g-1。浇土组叶片Z-5平均数量为0.27×104cfu·g-1,浸种组为0.17×104cfu·g-1,拌种组为0.22×104cfu·g-1。表明Z-5菌株能够在棉花根际土壤及植株体内有效定殖;采用浇土法处理棉花种子,Z-5菌株在棉花植株体内及根际土壤定殖效果最好,优于浸种法和拌种法。
- 张冬冬刘涛高同国姜军坡雷白时王世英朱宝成
- 关键词：棉花黄萎病拮抗定殖
