江苏省自然科学基金(BK2005049)
- 作品数:2 被引量:12H指数:1
- 相关作者:朱国强何素芬原志伟朱晓芳王建业更多>>
- 相关机构:扬州大学江苏省苏北人民医院更多>>
- 发文基金:教育部留学回国人员科研启动基金江苏省自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 禽致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fimH基因缺失突变株的构建及部分生物学特性的分析被引量:11
- 2008年
- 基于禽大肠杆菌Ⅰ型菌毛黏附素fimH基因的已知序列,利用λ噬菌体的Red重组系统构建禽致病性大肠杆菌国内分离株A2(血清型02:K89)Ⅰ型菌毛黏附素.fimH基因缺失突变株A2△fimH∷Cat,在二次重组中利用携带能够表达FLP位点特异性重组酶的质粒pCP20(温度敏感性)以去除上述缺失突变株中抗性基因标志,结合PCR扩增和测序结果,证明.fimH基因缺失株A2ΔfimH的正确构建。通过fimH基因互补试验使A2ΔfimH缺失突变株恢复了与野生株具有相同的凝集活性。红细胞和酵母细胞凝集试验结果表明,野生株呈现良好的凝集效果,并能被0.5%甘露糖完全抑制,而A2△fimH缺失突变株未呈现任何凝集现象。体外生长试验结果表明,在同样的培养条件下,A2△fimH缺失突变株生长周期的各个阶段都要稍慢于野生株。禽致病性大肠杆菌国内分离株Ⅰ型菌毛黏附素fimH基因缺失突变株成功构建,为进一步深入研究禽大肠杆菌Ⅰ型菌毛与机体相互作用的分子机制,肠道外感染的致病机理及对国内禽大肠杆菌病的防控策略奠定了一定基础。
- 何素芬原志伟朱国强
- 关键词:RED重组系统生物学特性
- 猪产肠毒素大肠杆菌987P蛋白受体的鉴定被引量:1
- 2008年
- 产肠毒素大肠杆菌(ETEC)定植于仔猪肠道的第一步是通过987P菌毛与小肠上皮细胞表面刷状缘大分子(BBV)结合。对分离的BBV进行SDS-PAGE和Ligand blot分析表明,在32~35KDa区域内有一条带能被987P菌毛探针所识别和结合,所结合的条带经胰蛋白酶消化后,通过微内径反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离出多条主要峰带蛋白峰带,采用衬质辅助激光解吸与电离质谱法(MALDI-MS)对主要峰带进行分析,结合多肽氨基酸测序和Blast同源性比较,得到3个氨基酸基序(AETAP、ALAAAGYDVEK和LGLK),其序列与人和鼠源的组蛋白H1高度同源;来源于仔猪小肠上皮细胞BBV的H1蛋白与BBV一样都能特异性结合纯化的987P菌毛蛋白。上述结果表明,仔猪小肠上皮细胞BBV的组蛋白H1是987P菌毛蛋白的受体。
- 朱国强王建业朱晓芳
- 关键词:产肠毒素大肠杆菌受体
- 禽致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fimH基因缺失突变株的构建及相关生物学特性的分析比较研究
- 大肠杆菌Ⅰ型菌毛和其易感细胞表面大分子受体的相互作用,在不同宿主组织细胞定植中起着关键性作用,而 FimH 是Ⅰ型菌毛特异性粘附于易感细胞表面甘露糖受体所必需的。基于 FimH 在Ⅰ型菌毛中的关键作用,本研究成功构建禽致...
- 何素芬原志伟朱国强
- 关键词:野生株禽致病性大肠杆菌缺失突变株生物学特性
- 文献传递