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大黄素体外逆转口腔鳞癌耐药细胞株KBV200的机制初步探讨被引量：4: 2011年; 目的初步探讨大黄素(EM)体外逆转口腔鳞癌耐药细胞株KBV200的机制。方法用MTT法测定EM对KBV200细胞的逆转作用及量效关系。Western blot法、免疫细胞化学法分别检测单用长春新碱(VCR)和EM联合VCR处理KBV200后,细胞中耐药相关蛋白P-gp、肺耐药相关蛋白(LRP)的量,GST-π、TOPO-Ⅱ的活性,以及肿瘤细胞凋亡蛋白P53、Bcl-2/Bax比值的变化。结果0.7、1.0和1.4μg/ml的EM及5.0μg/ml维拉帕米(VRP)分别联合VCR对KBV200的逆转倍数依次为1.44、2.87、1.76和1.83倍。与单用VCR组相比,EM联合VCR组上调P53的表达(P<0.01),增强TOPO-Ⅱ的活性(P<0.01),下调P-gp的表达(P<0.01);下调LRP的表达量及Bcl-2/Bax比值(P<0.01)。结论EM有逆转人口腔鳞癌细胞KBV200多药耐药性的作用,其机制可能与提高肿瘤细胞内药物的累积量,促进肿瘤细胞的凋亡有关。; 欧冰凝唐海桦张海英梁钢韦艳; 关键词：大黄素 KBV200 多药耐药相关蛋白质类 BLOT

表没食子儿茶素没食子酸酯体外代谢的方法研究被引量：1: 2011年; 目的研究体外代谢EGCG的方法,并用高效液相色谱法对EGCG及其产物进行测定。方法在适当的pH和温度下,在正常大鼠的肝脏匀浆加入底物S-腺苷蛋氨酸(SAM)和Mg2+,进行EGCG体外代谢,用高效液相色谱法检测EGCG及其代谢物。结果 EGCG可在体外大鼠肝匀浆作用下进行有效代谢,可用高效液相色谱法对EGCG及其代谢产物进行检测。结论这种体外代谢EGCG的方法简便灵敏,精密度高,可有效用于EGCG的体外代谢研究。; 廖作庄梁钢欧冰凝; 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯体外代谢高效液相色谱法

5-FU诱导人肝细胞癌MDR的比较蛋白质组学研究被引量：1: 2012年; 目的寻找与人肝细胞癌多药耐药相关的蛋白质分子,为进一步研究人肝细胞癌多药耐药机制提供依据。方法体外培养人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶(5-FU)细胞Bel-FU,MTT法检测Bel-FU的多药耐药性,双向凝胶电泳技术分析细胞Bel-7402与Bel-FU之间的差异表达蛋白,经MALDI-TOF/TOF质谱鉴定。Western blot验证2-DE及质谱的检测结果。结果与Bel-7402比较,Bel-FU中有24个蛋白表达上调,其中包括FAK、TM3、ORP150、CRT、hnRNP K、80K-H protein、EF-1-D、phosphoprotein等,12个蛋白表达下调。Western blot法检测到蛋白FAK、CRT在Bel-FU中高表达,与2-DE结果一致。结论通过建立人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU的2-DE图谱筛选了多药耐药相关的差异蛋白,为人肝细胞癌MDR的分子机制研究奠定了基础。; 韦艳张海英梁钢; 关键词：肝细胞癌比较蛋白质组学双向凝胶电泳

丹酚酸C诱导肝癌HepG2细胞有丝分裂阻滞及凋亡的研究被引量：2: 2010年; 目的研究丹酚酸C(salvianolic acid C,SalC)的体外抗肿瘤细胞增殖作用及其分子机制。方法 MTT法检测Sal C对人肿瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡,Giemsa染色进行细胞有丝分裂的形态学观察,微管蛋白聚合实验检测Sal C对微管蛋白聚合活性的影响,比色法检测细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性。结果丹酚酸C能抑制多种人肿瘤细胞增殖,其中对HepG2细胞的抑制作用较明显。流式细胞术分析发现Sal C使HepG2细胞阻滞于G2/M期并随作用时间延长出现明显的凋亡峰,细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性升高。Gi-emsa染色提示HepG2细胞发生有丝分裂阻滞。Sal C能明显抑制微管蛋白的聚合。结论 Sal C具有抗肿瘤细胞增殖活性,通过抑制微管蛋白聚合诱导细胞有丝分裂阻滞从而诱导凋亡。; 杨华程金建梁钢; 关键词：抗肿瘤药有丝分裂微管蛋白凋亡

丹参素对胃癌MGC803细胞周期的影响及凋亡诱导作用被引量：16: 2010年; 目的研究丹参素的体外抗肿瘤细胞增殖作用及其分子机制。方法 MTT法检测丹参素对人肿瘤细胞的抗增殖作用,流式细胞术检测细胞周期分布的改变及细胞凋亡,Western blot检测细胞周期素CyclinB1蛋白的表达,比色法测定Caspase-3和Caspase-6的活性。结果丹参素可诱导MGC803细胞出现G2/M期阻滞并诱导细胞凋亡。细胞中CyclinB1蛋白表达下调,Caspase-3和Caspase-6的活性显著升高。结论丹参素具有抗肿瘤细胞增殖作用,通过抑制细胞周期素CyclinB1表达诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。; 杨华程金建; 关键词：抗肿瘤药丹参素细胞周期细胞凋亡

人肝癌细胞2-DE实验技术条件优化: 2012年; 双向凝胶电泳（two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）是目前比较蛋白质组学研究中最常用蛋白质的技术,通过利用蛋白质的等电点与分子量特性将蛋白质分离,与质谱技术（mass spectrometry,MS）联用,已被广泛应用于分析细胞或组织样品中整体蛋白质表达的差异情况〔1-2〕。然而实验操作过程中,; 韦艳张海英梁钢; 关键词：双向凝胶电泳人肝癌细胞

EGCG乙酰化衍生物对肝癌细胞细胞毒增敏作用被引量：3: 2012年; 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)乙酰化衍生物(AcEGCG)是否对人肝癌细胞SMMC-7721有细胞毒增敏作用。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测EGCG和AcEGCG分别联合柔红霉素(DNR)对人肝癌细胞SMMC-7721的毒性作用,实验设35、100、160μmol/L EGCG及AcEGCG组、35、100、160μmol/L EGCG及AcEGCG分别联合柔红霉素DNR(0.9μmol/L)组,金正均法计算q值,判断两药相互作用。结果 35、100μmol/L AcEGCG联合DNR对人肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒增敏作用较相同剂量的EGCG强(67.0%对48.1%,78.9%对65.0%),差异具有统计学意义(P<0.05),160μmol/L AcEGCG联合DNR对人肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒增敏作用比EGCG稍弱(P>0.05)。结论在一定剂量范围内,AcEGCG联合DNR对人肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒增敏作用较EGCG强。; 欧冰凝韦海梁钢唐艳霞; 关键词：EGCG 肝癌细胞细胞毒增敏

八角莲含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用研究被引量：5: 2012年; 目的:观察八角莲提取物(DVE)含药血清的体外抗肝癌作用。方法:以Wistar大鼠含药血清为药物,用MTT法观察DVE含药血清对人肝癌细胞(SMMC-7721细胞)增殖的抑制作用。结果:DVE组对SMMC-7721细胞有较强的抑制作用,与索拉菲尼组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DVE含药血清体外有较强的抑制SMMC-7721细胞增殖作用。; 欧冰凝王金妮梁钢孙悦文; 关键词：八角莲肝癌细胞抗肿瘤

表没食子儿茶素没食子酸酯全乙酰化衍生物的体内抑瘤作用研究被引量：5: 2012年; 目的初步了解表没食子儿茶素没食子酸酯全乙酰化衍生物(AcEGCG)在体内的抑瘤作用。方法建立移植瘤模型,接种BEL-7402/5-FU的裸小鼠随机分为:对照组、5-FU组、AcEGCG组(AE组)、AcEGCG联合5-FU组(AEF组)和EGCG联合5-FU组(EF组)。接种14 d后开始给药,隔日称重、测量肿瘤的大小至给药20 d结束。处死老鼠,取瘤组织,称瘤块重量,计算抑瘤率,绘制肿瘤生长曲线。免疫组化法观察瘤块的病理切片。结果 AEF组的抑瘤率为40.53%,与EF组(30.87%)相比,具有显著性差异(P<0.05)。与5-FU组相比,AEF组裸鼠体重增加,具有显著性差异(P<0.05)。而EF组裸鼠与5-FU组相比减重较少,具有显著性差异(P<0.05)。与EF组相比,AEF组裸鼠体重变化具有显著性差异(P<0.05)。结论 AcEGCG联合5-FU的抑瘤作用比EGCG联合5-FU的增强,且毒性降低。; 欧冰凝周焕第梁钢孙悦文; 关键词：抑瘤作用

表没食子儿茶素没食子酸酯全乙酰化衍生物的合成及急性毒性试验被引量：5: 2012年; 目的合成表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的全乙酰化衍生物(AcEGCG),并研究EGCG和AcEGCG对小鼠的急性毒性作用。方法 EGCG为反应底物,乙酸酐为酰化剂,吡啶为催化剂,在乙酸乙酯中反应过夜,反应液经酸洗、碱洗及水洗后干燥得到AcEGCG,高效液相色谱法(HPLC)检测其纯度,1H-NMR和13C-NMR鉴定其结构。取昆明种小白鼠,灌胃给药,连续14 d观察其急性毒性症状。采用改进寇氏法计算半数致死量(LD50)。结果合成的EGCG乙酰化衍生物经1H-NMR和13C-NMR鉴定为AcEGCG,HPLC测定纯度为99%。EGCG组小鼠给药后第1～5天出现死亡,中毒表现开始为多动,不安定,随后缩成一团,嗜睡,呼吸急促,最后痉挛,死亡。LD50=761.5 mg/kg。AcEGCG组小鼠无死亡,病理检查与正常对照组无差异。最大耐受量为8 300 mg/kg。结论 EGCG有一定的毒性,而AcEGCG无明显毒性反应。; 王金妮欧冰凝梁钢; 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯小鼠急性毒性试验最大耐受量

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