重庆市自然科学基金(2011BB5028)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：王惠明颜奇丁国华杨玓倪兵更多>>
- 相关机构：武汉大学第三军医大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞MⅠCs分子异常表达及其机制
- 2014年
- 目的:了解系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类链相关分子(MⅠCs)、IL-15表达水平变化及其潜在机制。方法:收集20例SLE患者及20例健康志愿者外周血,分离单核细胞及血清,采用流式细胞术检测单核细胞表面MⅠCs及mIL-15的表达,EILIS法检测血清中干扰素-γ(INF-γ)、干扰素-α(INF-α)浓度,并对单核细胞表面MⅠCs表达水平与血清INF-γ浓度作相关性分析。进一步以SLE患者血清与健康志愿者单核细胞体外孵育,在有或无抗INF-γR存在的情况下,检测单核细胞表面MⅠCs分子的表达情况。结果:SLE患者血清IFN-γ浓度与健康对照组相比有显著性差异,其中IFN-γ在SLE患者为(429.7±145.0)pg/ml[健康对照为(73.8±18.9)pg/ml],二者有显著性差异(P<0.01);单核细胞MⅠCs及mIL-15的阳性率分别为(37.0±18.1)%和(36.0±7.3)%,而健康志愿者单核细胞MⅠCs及mIL-15的阳性率为(7.2±2.4)%和(7.6±2.5)%。SLE患者MⅠCs及mIL-15阳性率显著高于健康志愿者(P<0.01);SLE患者单核细胞MⅠCs分子表达水平与血清INF-γ浓度呈正相关;SLE患者血清中高浓度的IFN-γ可以刺激正常人单核细胞表达高水平的MⅠCs及mIL-15。结论:SLE患者血清INF-γ浓度异常升高,导致外周血单核细胞表面MⅠCs及IL-15异常高表达。
- 王惠明杨玓倪兵
- 关键词：系统性红斑狼疮单核细胞白细胞介素-15干扰素-Γ
- 支架蛋白JLP调控B细胞上CD40诱导的MAPK信号通路活化及细胞增殖
- 2014年
- 目的对支架蛋白JLP在小鼠B细胞上CD40诱导信号通路活化及细胞增殖中的作用进行研究,探索支架蛋白JLP在CD40诱导小鼠B细胞信号通路及后续生物学效应中的作用。方法磁珠分选法分选出jlp野生型和jlp基因敲除小鼠模型脾脏B细胞,使用免疫印迹法检测在接受CD40配体(CD40L)刺激后jlp野生型和jlp基因敲除型小鼠脾脏B细胞p38、Erk和Jnk MAPK,磷酸化c-Jun以及NF-κB信号通路及的活化情况,并使用CFSE检测两种基因型小鼠B细胞在接受CD40L刺激后细胞增殖情况。结果 jlp基因敲除小鼠B细胞在受到CD40L刺激后其p38、Erk、Jnk MAPK信号通路以及c-Jun活化情况均较jlp野生型小鼠B细胞明显减弱,而NF-κB信号通路的激活情况在两种基因型B细胞中并无明显差异,jlp基因敲除小鼠B细胞中CD40诱导的细胞增殖水平较jlp野生型B细胞明显降低。结论支架蛋白JLP参与调控B细胞上CD40诱导的MAPK信号通路活化及细胞增殖。
- 颜奇王惠明丁国华
- 关键词：B细胞MAPK信号通路细胞增殖
- 支架蛋白JLP对树突状细胞CD40分子跨膜穿梭转运的调控作用被引量：1
- 2014年
- 目的:了解支架蛋白JLP分子在树突状细胞(DC)中的表达及其在CD40分子跨膜穿梭转运中的作用。方法:以GM-CSF诱导骨髓干细胞分化为骨髓来源的DC(BMDC)。给予BMDC不同刺激和处理后,通过Western blot检测BMDC中JLP的表达情况。采取慢病毒介导的shRNA干扰技术抑制BMDC中JLP表达,给予BMDC不同刺激或处理后,通过流式细胞技术检测细胞表面及细胞总CD40分子表达水平变化。通过胞内因子染色技术检测不同处理后细胞内IL-12分子的表达。结果:幼稚BMDC表达低水平JLP,Poly I∶C刺激可上调未成熟BMDC表达JLP,但细菌脂多糖(LPS)刺激则不能上调JLP表达。LPS诱导成熟后的BMDC进一步给予抗CD40抗体刺激则可诱导JLP表达。CD40与配体结合导致LPS活化的DC表面CD40分子表达水平明显下调,但细胞总CD40表达水平无变化。在JLP基因敲除的情况下,LPS处理的DC表面CD40分子表达明显减少,但细胞总CD40分子表达水平无变化。CD40抗体或CD40L处理成熟DC后可介导CD40分子内化,在JLP缺失情况下CD40分子内化明显减低。结论:支架蛋白JLP分子参与了BMDC中CD40分子的跨膜穿梭转运。
- 王惠明颜奇丁国华
- 关键词：支架蛋白树突状细胞CD40囊泡转运
