江苏省自然科学基金(BK2005159)
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
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- 旋转式生物反应器内构建组织工程髓核被引量：6
- 2010年
- 目的 探讨旋转式生物反应器（RCCS）对体外构建的组织工程髓核的影响.方法 将兔髓核细胞体外扩增至第3代,以3×107/ml的浓度接种于聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）无纺网支架上.实验组在RCCS内培养,对照组静态培养.培养4周后取出细胞与支架复合物,行大体标本观察、扫描电镜、组织学和免疫组织化学染色观察、定量测定糖胺聚糖（GAG）及DNA含量.结果 旋转式生物反应器下构建的组织工程髓核的厚度、大小及组织弹性好于对照组,实验组GAG、DNA含量分别为（211.0±10.9,13.3±2.1）,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色面积百分比明显高于对照组（152.0±14.4,7.5±1.5）,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 旋转式生物反应器能促进椎间盘髓核细胞Ⅱ胶原及糖胺聚糖的合成分泌,有利于在体外构建组织工程髓核.
- 张文捷张亮赵春明张宁
- 关键词：椎间盘生物反应器生物医学工程
- 机械刺激对体外培养椎间盘细胞的影响
- 2007年
- 椎间盘组织和细胞的生长受多种因素的影响,机械刺激是其中之一。细胞三维培养体系希望模拟体组织中细胞所处的生理环境。在椎间盘组织中细胞存在复杂应力环境,如牵张力、压应力、振动等。近年来,随着机械作用细胞培养模型的建立,应力对体外培养椎间盘细胞作用的研究得以实现。
- 葛灵张宁任永信
- 关键词：椎间盘细胞体外培养机械刺激椎间盘组织三维培养体系细胞培养模型
- 离心力下构建组织工程纤维环的实验研究
- 2008年
- 目的探讨离心力对体外构建组织工程纤维环的影响。方法取兔胸腰段椎间盘纤维环组织，经胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶消化后细胞原代培养，体外扩增至第3代，5×10^7／mL的细胞悬液种植于聚乳酸．羟基乙酸（PLGA）无纺网支架上。实验组在离心力下培养（相对离心力：85．86×g，每天2次，每次离心15min），对照组静态培养。每组5个标本，培养4周后取出纤维环细胞与支架复合物．行大体标本观察，组织学和免疫组织化学染色，检测Ⅰ型胶原分泌情况。结果体外培养4周后，实验组与对照组均为类纤维环样组织，实验组纤维环厚度和组织弹性均优于对照组，Ⅰ型胶原免疫组织化学染色，实验组阳性染色面积为（45．39±6．78）％，对照组为（33．53±4．58）％，两者差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组细胞排列较对照组更具方向性。结论离心力刺激纤维环细胞增加Ⅰ型胶原的分泌，有利于在体外构建组织工程纤维环。
- 葛灵张宁任永信胡志毅宋李军秦晓东张亮
- 关键词：椎间盘离心法
- 离心应力下构建组织工程髓核被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨离心应力对髓核细胞功能表达和组织工程髓核结构的影响。方法:取兔胸腰段椎间盘髓核组织,经胰蛋白酶,Ⅱ型胶原酶消化分离出细胞,在含15%灭活胎牛血清的DMEM/F12培养基中体外扩增至第3代,以3×107/ml的细胞悬液种植于PLGA无纺网支架上。实验组在离心力下培养(实验1组相对离心力为134.16g,实验2组相对离心力为301.86g,每天2次,每次离心20min),对照组静态培养,每组4个标本,培养4周后取出髓核细胞与支架复合物,行大体标本,扫描电镜,组织学和免疫组织化学染色观察离心应力对组织工程髓核结构及Ⅱ型胶原分泌情况的影响。结果:离心应力下构建的组织工程髓核的厚度和直径大于对照组,细胞外基质明显多于对照组,Ⅱ型胶原免疫组化染色,实验1组阳性染色面积为(14.36±2.82)%,实验2组阳性染色面积为(18.71±2.14)%,对照组为(9.13±1.58)%,实验1组、实验2组与对照组差异有统计学意义(P<0.01),实验2组与实验1组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定范围的离心应力刺激髓核细胞增加Ⅱ型胶原的分泌,有利于在体外构建组织工程髓核。
- 张亮任永信葛灵张宁
- 关键词：髓核细胞
