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广东省自然科学基金(06022679)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：李逊曾国华何朝辉何永忠吴文起更多>>
相关机构：广州医学院第一附属医院广州医学院港湾医院南昌大学第二附属医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇凋亡
  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛素
  • 1篇胰岛素样
  • 1篇胰岛素样生长...
  • 1篇胰岛素样生长...
  • 1篇神经元
  • 1篇神经元凋亡
  • 1篇腺相关病毒
  • 1篇高糖
  • 1篇高糖诱导

机构

  • 1篇广州医学院第...
  • 1篇南昌大学第二...
  • 1篇广州医学院港...

作者

  • 1篇雷鸣
  • 1篇杨炜青
  • 1篇鲁雄兵
  • 1篇吴文起
  • 1篇何永忠
  • 1篇何朝辉
  • 1篇曾国华
  • 1篇李逊

传媒

  • 1篇中华生物医学...

年份

  • 1篇2009
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
腺相关病毒介导胰岛素样生长因子I对高糖诱导神经元凋亡的保护作用
2009年
目的研究重组腺相关病毒（AAV）载体介导胰岛素样生长因子I（IGFI）在体外神经元表达的情况，及其对高糖诱导神经元凋亡的保护作用。方法利用分子克隆技术将大鼠IGFI基因克隆到pSNAV2．0质粒上，构建包含重组质粒pSNAV2．0-IGFI的杂合型重组AAV载体rAAV2／1-IGFI。将人神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞分为正常组（A组）、无血清组（B组）、无血清高糖组（C组），无血清高糖＋rAAV2／1-IGFI组（D组），其中A组不做任何处理；B组使用无血清培养基培养；C组用含100mmol／LD．葡萄糖的无血清培养基培养；D组则先用rAAV2／1-IGFI病毒载体感染后再用含100mmol／LD．葡萄糖的无血清培养基处理。干预24h后应用RT—PCR和Western免疫印迹检测各组IGFI基因和蛋白的表达情况；应用Hoechst 33342荧光染色法、AnnexinV—FITC／PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。观察rAAV2／1-IGFI感染后对高糖诱导SH—SY5Y细胞凋亡的保护作用。结果成功构建rAAV2／1-IGFI重组AAV载体。感染SH-SY5Y细胞后，RT—PCR显示SHSY5Y能表达大鼠IGFI基因；Western免疫印迹检测发现D组IGFI蛋白的表达水平（0．44±0．04）显著高于其他3组（A组0．29±0．02，B组0．17±0．02，C组0．08±0．02，均P〈0．05）。rAAV2／1-IGFI能明显降低高糖诱导细胞凋亡的凋亡率：Hoechst33342荧光染色检测总凋亡率分别为A组（2．71±1．03）％，B组（9．17±1．72）％，C组（25．63±1．81）％，D组（14．50±2．27）％，各组间差异均有统计学意义（P〈0．05）；流式细胞仪分析结果表明Annexin V-FITC^＊／PI^-的早期凋亡细胞加上Annexin V—FITC^＊／PI^＊的晚期凋亡细胞的总细胞凋亡率A组为（5．01±1．17）％，B组为（9．87±1．38）％，C组为（27．56±2．25）％，D组为（17．34±2．08）％，各组间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论rAAV2／1-IGFI感染体外神经元SH—SY5Y细胞能
杨炜青李逊鲁雄兵吴文起雷鸣曾国华何永忠何朝辉
关键词：胰岛素样生长因子I神经元腺相关病毒高糖
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