广东省自然科学基金(06022695)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 相关作者：陆永建李明昌杜汉强袁忠民李珺更多>>
- 相关机构：广州医学院第二附属医院惠州市第一人民医院广州医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DLC1基因在人脑胶质瘤组织中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨抑癌基因DLC1在人脑胶质瘤组织中的表达和功能.方法 收集广州医学院第二附属医院神经外科自2007年1月至2009年6月手术切除的胶质瘤标本39例及同期行颅脑减压术治疗的颅脑损伤患者的正常脑组织10例,实时荧光定量PCR检测DLC1 mRNA的表达;将质粒pCS2-DLC1转染体外常规培养的人胶质瘤细胞株U251,同时用空载体pCS2-MT转染作为对照组,转染后36 h应用Western blot检测DLC1表达标签蛋白Mvc,应用MTT检测U251细胞增殖能力的变化.结果实时荧光定量PCR结果显示胶质瘤组织中DLC1 mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P=0.000）,且Ⅰ级胶质瘤组织DLC1 mRNA的表达水平高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级,差异有统计学意义（平均秩次分别为44.20、30.23、32.25、31.0,H=18.818,P=0.001）;Western blot检测结果显示DLC1标签蛋白Mvc在pCS2-DLCI转染组细胞呈过表达,在pCS2-MT转染组细胞无明显表达;MTT检测显示pCS2-DLC1转染组U251细胞吸光度值高于pCS2-MT转染组,差异有统计学意义（P=0.002）.结论 高表达的DLC1可能促进胶质瘤的形成和发展.
- 袁忠民李明昌杜汉强陆永建
- 关键词：细胞增殖
- 乙酰肝素酶基因在U251胶质瘤细胞株中的表达被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨乙酰肝素酶基因(HPSE)在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达水平。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法分别检测HPSE基因及其蛋白在U251细胞株中的表达。结果:U251细胞株中HPSE基因mRNA及蛋白阳性表达,蛋白定位于瘤细胞的细胞质中。结论:U251细胞存在HPSE基因的表达,HPSE可能对于维持U251细胞株的生物学特性具有重要作用;并可能是恶性胶质瘤基因治疗的一个良好靶点。
- 李珺李明昌陆永建
- 关键词：乙酰肝素酶反转录聚合酶链反应免疫细胞化学
- 肝癌缺失基因-1不同亚型在人神经胶质瘤组织中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨肝癌缺失基因-1(DLC-1)亚型(Isoform)1及2在人神经胶质瘤组织中的表达及其意义。方法:收集神经胶质瘤样本49例及对照脑组织14例,采用定量PCR检测DLC-1Isoform1、2的mRNA水平,比较两组差异。结果与结论:与对照脑组织比较,DLC-1Iso-form1在神经胶质瘤中低表达,而DLC-1Isoform2在神经胶质瘤中高表达,差异具有统计学意义(P<0.05);DLC-1Isoform1在Ⅱ,Ⅲ及Ⅳ级神经胶质瘤中的表达水平低于Ⅰ级神经胶质瘤,DLC-1Isoform2在I级神经胶质瘤中表达程度最高。DLC-1Isoform1在神经胶质瘤组织中低表达,而Isoform2高表达,提示DLC-1的功能可能具有组织特异性以及亚型特异性,DLC-1Isoform2是否可促进神经胶质瘤的生成,值得进一步行大样本研究。
- 袁忠民李明昌杜汉强陆永建
- 关键词：神经胶质瘤肝癌缺失基因-1
- 抑癌基因Deleted in Liver Cancer1在人胶质瘤细胞株中的作用及机制
- 2009年
- 目的探讨抑癌基因DLC1表达的isoform1及isoform2两个亚型在人胶质瘤细胞株中的表达、功能及机制。方法RT-PCR方法检测体外培养的胶质瘤细胞株U87-MG和SHG-44中DLC1isoform1,2的mRNA水平;10μM5-aza-2'-de-oxycytidine(5'-AZA)或者共含有500nMtrichostatinA(TSA)处理细胞36h,检测DLC1isoform1,2的表达;MTT方法检测转染DLC1isoform2及没有GAP活性的isoform2突变体DLC1-K714E表达质粒对胶质瘤细胞株U87-MG和SHG-44增殖的影响。结果在U87-MG细胞株中没有检测到DLC1isoform1;在SHG-44中检测到微量的DLC1isoform1,5'-AZA或者共含有TSA处理使其表达上调;DLC1isoform2在上述细胞株都能检测到,5'-AZA或者共含有TSA处理细胞未改变其表达水平;过表达DLC1isoform2及其突变体DCL1-K714E促进U87-MG和SHG-44细胞株增殖。结论DLC1isoform1在胶质瘤细胞株中不表达或低表达,可能原因是由于不转录或者启动子发生甲基化。DLC1isoform2有一定的表达水平,高表达的DLC1isoform2促进胶质瘤细胞增殖,且不依赖GAP活性。
- 袁忠民李明昌杜汉强陆永建
- 关键词：胶质瘤细胞株
- 靶向乙酰肝素酶的小干扰RNA对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨靶向乙酰肝素酶（HPSE）的小于扰RNA（siRNA）对人脑胶质瘤细胞株U251恶性生物学行为的影响。方法针对HPSEmRNA序列设计并合成3条siRNA．利用脂质体Lipofectemine2000作为载体将siRNA转染U251细胞，采用反转录聚合酶链反应（RT-PCRl和免疫细胞化学方法分别检测转染前后U251细胞中HPSE基因mRNA及蛋白的表达水平，同时利用MTT法和Mitragel法检测细胞增殖率和侵袭力的变化。结果转染靶向HPSE基因siRNA后的U251细胞HPSE基因mRNA及蛋白表达水平降低，同时细胞增殖率和侵袭力均受到抑制。结论靶向HPSE基因的siRNA能通过抑制U251细胞中HPSE基因的表达降低U251细胞恶性生物学行为。
- 李明昌李珺任天剑陆永建苏杭
- 关键词：乙酰肝素酶神经胶质瘤细胞生理学
- 代谢型谷氨酸受体5亚型介导U251细胞增殖及机制的研究被引量：2
- 2014年
- 目的通过观察代谢型谷氨酸受体5亚型（mGluR5）的特异性拮抗剂2-甲基-6-苯基乙炔嘧啶（MPEP）对人胶质瘤细胞U251的影响间接探讨mGluR5对U251增殖的影响并对其机制进行分析。方法体外常规培养人胶质瘤细胞株U251，噻唑蓝（MTT）检测100μmol／LMPEP、20μmol/LSP600125（JNK特异性拮抗剂）、400感染复数（MOI）Ad-△169（c-Jun负显性病毒1作用48h后U251细胞增殖的变化；Westernblotting检测5、10、20、50、100μmol／LMPEP作用24h及100μmol／LMPEP作用4、8、12、24h后U251细胞表达磷酸化C-Jun及磷酸化JNK的变化。结果100μmol／LMPEP、20μmol／LSP600125、400MOIAd—A169处理48h后U251细胞的吸光度值均明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．051；5、10、20、50、100μmol／LMPEP处理人胶质瘤细胞U25124h后的磷酸化C-Jun、磷酸化JNK表达量均明显低于对照组，而且随着用药浓度的增加，u251细胞磷酸化C-Jun、磷酸化JNK的表达越低，差异有统计学意义伊〈0．05）；100μmol／LMPEP处理U251细胞4、8、12、24h后磷酸化C-Jun、磷酸化JNK表达量均降低，而且随着用药时间的延长，U251细胞磷酸化c-Jun、磷酸化JNK的表达越低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论mGluR5特异性拮抗剂MPEP能抑制人胶质瘤细胞U251增殖，其机制可能与JNK通路中磷酸化c—Jun及磷酸化JNK的表达水平改变有关，并且MPEP引起的这种改变表现出浓度及时间依赖性。
- 赵冬青陆永建
- 关键词：神经胶质瘤U251细胞增殖
