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江苏省自然科学基金(BK2005140)

作品数:4 被引量:7H指数:2
相关作者:张双全刘平刘海峰李楠楠王小花更多>>
相关机构:南京师范大学山西师范大学更多>>
发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省教育厅自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生农业科学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 2篇抗菌肽
  • 2篇抗菌肽CM4
  • 2篇活性
  • 2篇基因
  • 1篇增殖
  • 1篇融合基因
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞增殖
  • 1篇小鼠
  • 1篇小鼠脾脏
  • 1篇淋巴
  • 1篇淋巴细胞
  • 1篇淋巴细胞增殖
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫反应
  • 1篇免疫应答
  • 1篇抗菌
  • 1篇抗菌活性
  • 1篇可溶性
  • 1篇克隆

机构

  • 4篇南京师范大学
  • 1篇山西师范大学

作者

  • 4篇张双全
  • 2篇刘海峰
  • 2篇刘平
  • 1篇王小花
  • 1篇陈龙
  • 1篇单潇潇
  • 1篇张超
  • 1篇杨筱曼
  • 1篇刁振宇
  • 1篇陈舒劼
  • 1篇曹鹏
  • 1篇李楠楠

传媒

  • 1篇Curren...
  • 1篇中国应用生理...
  • 1篇南京师大学报...
  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 2篇2008
  • 2篇2007
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
抗菌肽CM4与人可溶性B淋巴细胞因子hsBAFF在大肠杆菌中的融合表达被引量:3
2008年
为进一步探讨抗菌肽CM4的原核表达及其生物学功能,研究了抗菌肽CM4与人可溶性B淋巴细胞刺激因子hsBAFF的融合表达及抗菌肽CM4的生物学活性。运用PCR把B淋巴细胞因子hsBAFF和家蚕抗菌肽CM4进行基因融合,构建了融合表达载体pET28a(+)/CM4-hsBAFF,并在大肠杆菌中获得高可溶性表达的融合靶蛋白,且存在于超声破碎后的上清,经分子筛Sephadex G-75纯化后的重组融合蛋白用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定.SDS-PAGE分析表明:可以通过分子筛一步纯化得到融合蛋白,该重组融合蛋白的分子量约22.0kDa。Western blot结果显示该重组蛋白能与鼠抗人hsBAFF的抗体发生特异性反应.运用基因工程的方法获得CM4-hsBAFF重组融合蛋白,并具有很好的抑菌生物学活性。
刘海峰王小花刘平张双全
关键词:抗菌肽CM4纯化
中国三黄鸡可溶性B淋巴细胞刺激因子基因的克隆、表达和活性研究
2007年
通过逆转录-聚合酶链式反应,从中国三黄鸡脾组织细胞中扩增得到459bp的鸡可溶性B淋巴细胞刺激因子(CycsBAFF)基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3)后高效表达了带有His6标签的包涵体形式重组蛋白,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫转印检测鉴定。表达产物经Ni2+-NTA纯化后,经透析复性得到活性目的蛋白,通过单独刺激以及与PMA共刺激体外培养的鸡法氏囊B细胞,均有明显的促法氏囊B细胞存活的效应。
陈舒劼刁振宇张超张双全
关键词:基因克隆
hsBAFF对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖与免疫应答及胞内Ca^(2+)水平的影响被引量:1
2007年
目的:探讨大肠杆菌表达的人源可溶性B淋巴细胞激活因子hsBAFF对小鼠脾脏B淋巴细胞免疫反应及其对胞内游离Ca2+信号变化的影响。方法:选择20只健康ICR小鼠,雌雄各半,随机分成两组(n=10):①对照组;②hsBAFF实验组。实验组小鼠腹腔注射含hsBAFF(0.1mg/kgbw)的PBS溶液,对照组注射同等剂量的PBS溶液,连续8d。用MTT法检测小鼠脾脏B淋巴细胞的增殖及其对LPS刺激的免疫反应,并用激光共聚焦显微镜分析脾脏B淋巴细胞胞内钙离子水平([Ca2+]i)变化。结果:hsBAFF注射小鼠的脾脏B淋巴细胞增殖和对LPS刺激的免疫反应均明显高于对照组(P<0.05);hsBAFF注射组[Ca2+]i荧光强度维持在相对稳定的高水平上波动,平均荧光强度显著高于对照组(P<0.01),且荧光强度变化率小于对照组。结论:大肠杆菌表达的hsBAFF能促进B淋巴细胞的增殖和免疫应答,从而增强机体免疫功能。hsBAFF激活小鼠脾脏B淋巴细胞可能与[Ca2+]i升高有关。
杨筱曼单潇潇陈龙曹鹏张双全
关键词:小鼠B淋巴细胞免疫反应CA^2+
家蚕抗菌肽CM4和人可溶性BAFF融合基因的克隆、表达及活性鉴定被引量:3
2008年
采用PCR法从含有人可溶性BAFF基因的pET30a(+)扩增得到人sBAFF基因,通过rPCR将抗菌肽Cecropin CM4基因的2条单核苷酸链进行扩增得到CM4基因,再采用over-lap PCR法通过linker将hsBAFF与Cecropin CM4融合基因相连接.经纯化和鉴定后,定向插入到原核表达载体pET30a(+)中,然后转化E.coliBL21(DE3),通过实验确定了表达该融合基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为1.0mmol/L,诱导时间为5h,温度为30℃,其表达量占全菌蛋白的40%.表达产物经SDS-PAGE分析,得到相对分子质量约为22000的重组蛋白并且存在超声裂解后的上清中.重组蛋白经Western blot检测,结果显示重组蛋白可被鼠抗人可溶性BAFF的抗体识别.采用分子筛Sephadex G-75对重组融合蛋白进行纯化,并经SDS-PAGE对其鉴定.通过对其生物学功能的检测得知,纯化后的重组融合蛋白对大肠杆菌K12D31和真菌有明显的抑菌能力.
刘海峰刘平李楠楠张双全
关键词:抗菌肽CM4抗菌活性融合基因
共1页<1>
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