国家自然科学基金(30400546)
- 作品数：5 被引量：18H指数：4
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- 相关机构：第三军医大学西南医院第三军医大学兰州军区兰州总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 真皮间充质干细胞的分离培养及其NOV基因的表达被引量：4
- 2008年
- 目的:分离培养大鼠真皮来源成体多能干细胞并研究其NOV基因表达。方法:分离培养新生大鼠真皮间充质干细胞,采用形态学观察及免疫组化法进行鉴定。用脂质体法将构建的NOV基因真核表达载体转染入大鼠真皮多能干细胞中,在荧光倒置显微镜下观察转染产物,RT-PCR法检测转染细胞中NOV基因表达。结果:新生大鼠真皮间充质干细胞86%处于G0/G1期,多向诱导后可分化为神经细胞及中胚层来源细胞。NOV重组质粒体外转染大鼠真皮多能干细胞后,转染细胞中检测到NOV基因。结论:大鼠真皮组织中存在着成体多能干细胞,具有多胚系分化潜能。该细胞可作为NOV基因表达的细胞载体。
- 刘雁平李露斯王涛罗晓红
- 关键词：真皮间充质干细胞转染NOV基因
- 脊髓损伤后真皮多能干细胞移植时机的选择被引量：4
- 2007年
- 目的:观察脊髓损伤后不同时间移植真皮多能干细胞对大鼠运动功能修复的影响。方法:实验于2006-06/2007-03在第三军医大学生理学教研室完成。①实验材料:实验动物2～4月龄SPF级SD大鼠,体质量(210±40)g,雌雄不限,由第三军医大学实验动物中心提供。真皮多能干细胞为第三军医大学防原医学系从SD大鼠真皮中提取和分离。②实验方法:将42只SD大鼠在L4水平制成脊髓全横断损伤模型。将动物随机分为对照组(n=6)、真皮多能干细胞移植组(n=36)。真皮多能干细胞移植组又分为6个时间点:损伤后1,4,7,10,14,21d移植组,每组6只。各移植组于伤处移植大鼠真皮多能干细胞,而对照组于损伤后7d注射等量磷酸盐缓冲液。③实验评估:分别于移植后1d、1周、4周、8周、12周对各组大鼠进行动物行为学和脊髓诱发电位检测。结果:42只实验大鼠均进入结果分析,无脱落。①动物行为学评分:4周以后各组动物行为学评分比较差异有显著性意义(P<0.05),移植组明显高于对照组(P<0.05),各移植组间比较,以损伤后7,10d移植组动物行为学评分改善最显著。②各组大鼠脊髓诱发电位检查:体感诱发电位和运动诱发电位潜伏期和波幅值于移植后8,12周后明显高于对照组(P<0.05),各移植组间比较,以损伤后7,10d移植组体感诱发电位和运动诱发电位潜伏期和波幅值改善最显著。结论:脊髓损伤后7～14d进行真皮多能干细胞移植可明显改善大鼠后肢的运动功能。
- 王涛李露斯刘雁平屈纪富徐海伟
- 关键词：真皮多能干细胞脊髓损伤
- 真皮来源间充质干细胞的分离培养及成神经分化的研究被引量：5
- 2008年
- 目的:研究真皮来源间充质干细胞的分离培养方法及其向神经细胞分化的条件及可行性。方法:取大鼠真皮组织,采用贴壁传代培养筛选法,分离培养真皮间充质干细胞,流式细胞术检测细胞周期,经β-巯基乙醇诱导,倒置显微镜下观察细胞形态变化,免疫细胞化学方法对分化细胞进行鉴定。结果:分离的早期贴壁的真皮来源间充质干细胞经过连续传代培养至第4代,细胞形态较为均一,86%的细胞处于G0/G1期,细胞表面波形蛋白表达阳性,但因子Ⅷ和角蛋白表达阴性。经β-巯基乙醇诱导,真皮间充质干细胞可向神经细胞分化,细胞突起增多,具有神经元的形态学特征,分化后的细胞表达神经元标志物——神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经微丝(NF-200)。结论:大鼠真皮组织中存在着成体多能干细胞,一定条件下可分化为神经元。提示真皮可能是成体多能干细胞的又一来源,有望在神经组织修复和再生中发挥作用。
- 刘雁平李露斯王涛罗晓红李自方
- 关键词：真皮间充质干细胞分化神经细胞
- NOV在真皮来源大鼠间充质干细胞中的表达及活性检测
- 2008年
- 目的:检测肾母细胞瘤过度表达(NOV)基因在真皮来源大鼠间充质干细胞(DMSCs)中的表达及活性。方法:NOV基因重组质粒转染DMSCs,在荧光倒置显微镜下观察转染产物,RT-PCR法检测转染细胞中NOV基因表达。收集NOV基因修饰DMSCs的条件培养液(简称NOV-CM),作用于对照组DMSCs及转染了NOV基因的DMSCs(简称NOV-DMSCs),检测NOV基因及其分泌蛋白在DMSCs分化中的活性作用。结果:NOV重组质粒体外转染入大鼠真皮多能干细胞后,转染细胞中检测到NOV基因。免疫荧光检测结果显示,NOV基因修饰及NOV-CM培养DMSCs时,DMSCs向神经元方向分化的比例增高,且细胞突起较长。结论:NOV基因可在DMSCs中稳定表达,可能具有促进DMSCs向神经元分化的作用。
- 刘雁平李露斯王涛
- 关键词：NOV基因真皮间充质干细胞分化
- 真皮多能干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的实验研究被引量：7
- 2007年
- 目的:观察真皮多能干细胞(dMSCs)移植对脊髓损伤大鼠运动功能的修复作用。方法:32只SD大鼠在L4水平制成脊髓全横断损伤模型,并随机分为真皮多能干细胞移植组(A组)及损伤对照组(B组),每组10只大鼠。伤后1w,移植组于伤处移植大鼠真皮多能干细胞(dMSCs),而对照组仅注射等量PBS。分别于移植后1d、1w、8w、12w对两组大鼠进行动物行为学(BBB)评分和脊髓诱发电位(SEP和MEP)检测,并于移植后12w进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测。结果:BBB评分4w以后组间比较差异有统计学意义(P<0.05),移植组明显高于对照组(P<0.05);SEP和MEP潜伏期和波幅值在8、12w后组间比较差异有统计学意义(P<0.05);移植后12w,移植组损伤脊髓结构的修复明显优于对照组。结论:移植治疗脊髓损伤,能明显改善其运动功能和神经形态,dMSC对脊髓损伤大鼠有治疗作用。
- 王涛李露斯刘雁平屈纪富徐海伟
- 关键词：真皮多能干细胞脊髓损伤
