国际科技合作与交流专项项目(2010DFR30620-2)
- 作品数：2 被引量：20H指数：2
- 相关作者：孙桂枝王学敏李玉坤王赞高洪文更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 东方山羊豆脱水蛋白基因的克隆及初步分析被引量：6
- 2012年
- 采用SMART RACE方法,从东方山羊豆盐诱导抑制性差减杂交cDNA文库中分离到了一个脱水蛋白(GoDHN)基因。该基因cDNA全长1 169bp,开放阅读框843bp,编码281个氨基酸,编码的蛋白质分子量为28.71kDa。经实时荧光定量PCR分析,GoDHN基因在东方山羊豆的茎和叶中表达量明显高于根中表达量,并且基因表达受ABA、NaCl和PEG的诱导,随着诱导时间的增加,表达量呈持续增长趋势。这些结果表明,DHN基因在东方山羊豆的抗逆性中可能起到重要的调控作用。本研究成功构建了pCAMBIA1302-DHN植物表达载体,为下一步转基因研究奠定了基础。
- 李玉坤王学敏王赞李俊Vladimir CNikolay D孙桂枝高洪文
- 关键词：东方山羊豆基因克隆实时荧光定量PCR植物表达载体
- 东方山羊豆Cu/ZnSOD基因的克隆及表达分析被引量：14
- 2012年
- 超氧化物歧化酶是一种广泛存在于真核生物中的金属酶类,在植物的抗逆性中起到重要的作用。文章采用RACE方法,从东方山羊豆中克隆了Cu/ZnSOD基因,并对其进行了初步分析。该基因cDNA序列全长935 bp,开放阅读框600 bp,编码199个氨基酸,蛋白质分子量为20.35 kDa。通过实时荧光定量PCR结果分析,该基因在东方山羊豆叶中表达量最多,茎中次之,根中最少。在NaCl和PEG诱导下,Cu/ZnSOD基因表达量先上调后下降。NaCl诱导24 h后,该基因的表达量显著低于对照。ABA胁迫抑制了该基因的表达。亚细胞定位结果表明,Cu/ZnSOD蛋白定位于叶绿体中。实验结果证明,Cu/ZnSOD基因主要在东方山羊豆的绿色组织中表达,在抵抗渗透性胁迫方面起到一定作用。
- 李玉坤王学敏高洪文仁爱琴王赞孙桂枝
- 关键词：东方山羊豆基因克隆实时荧光定量PCR亚细胞定位
