国家自然科学基金(30400579)
- 作品数：6 被引量：57H指数：4
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- 下瘀血汤含药血清对脂多糖诱导活化的RAW264.7细胞表达MMP2,9/TIMP1,2的调控作用被引量：3
- 2010年
- 目的:观察下瘀血汤药物血清对脂多糖(LPS)诱导活化后RAW 264.7细胞表达基质金属蛋白酶(MMP-2,9)及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1,2)的影响,以探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:100 g/L LPS刺激RAW264.7细胞,ELISA法分别测定0.5 h,1 h,2 h,4 h,6 h,12 h细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,选择模型时间点;生化法测定RAW264.7细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,分析10%和20%的正常大鼠血清和下瘀血汤药物血清的细胞毒性;Western blot法检测RAW 264.7细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的蛋白表达。结果:与10%浓度的正常大鼠血清相比,10%下瘀血汤药物血清对RAW264.7细胞的无毒性作用。LPS刺激细胞培养1 h时,细胞培养上清中TNF-α含量开始增加;4 h时达到最高;6 h时开始下降。与相应时间点正常组相比,4 h、6 h模型组RAW 264.7细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白表达均显著升高(P<0.01);与相应时间点模型组相比,4 h、6 h下瘀血汤药物血清组上述指标均降低,其中6 h组RAW 264.7细胞MMP-2蛋白表达、4 h与6 h细胞MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:下瘀血汤可能通过抑制枯否细胞(KCs)活化,抑制其MMP2,9/TIMP1,2的表达而发挥抗肝纤维化的作用。
- 都广礼陈德兴韩琳张艳
- 关键词：下瘀血汤基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制剂抗纤维化
- 猪血清致大鼠免疫性肝纤维化的动态观察被引量：10
- 2007年
- [目的]通过对猪血清致大鼠免疫性肝纤维化模型的动态观察,探讨免疫性肝纤维化的形成机制。[方法]采用腹腔注射猪血清0.5 ml,每周2次;大鼠按体重随机分为正常对照组和模型组,在1、2、4、8和12周分别处死大鼠并取材,观测肝组织病理学、肝功能、羟脯氨酸(Hyp)水平。[结果]苏木精-伊红染色,随着刺激因素持续时间的延长,汇管区炎性细胞浸润增多和肝细胞损伤,肝星状细胞(HSC)数量增多并部分活化;天狼猩红染色,4周模型组纤维间隔明显,假小叶初步形成,8和12周模型组胶原增生明显,肝小叶形成;血清总蛋白(TP)和球蛋白(Glb)水平,1、2、4、8和12周模型组均较正常组显著升高(P<0.01);血清清蛋白(Alb)水平,与正常组相比,1、2、4、8周无差异,12周模型组显著降低(P<0.01);血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,与正常组相比,2、4周模型组差异有统计学意义(P<0.05),1、8和12周模型组无差异;Hyp水平,与正常组相比,1、2周模型组差异无统计学意义,4、8和12周模型组均有显著升高(P<0.01)。[结论]①腹腔注射猪血清4周时,肝纤维化初步形成,8周模型复制已经成功;②猪血清作为异种抗原侵入,刺激机体产生免疫反应,免疫球蛋白增加,是主动性的肝纤维化;③免疫反应激活HSC的活化,分泌合成胶原增生明显,从而形成肝纤维化。
- 张艳都广礼陈德兴陈少丽
- 关键词：免疫肝纤维化猪血清
- 肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9及其抑制因子1基因表达的动态变化及下瘀血汤对其影响被引量：10
- 2010年
- [目的]研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9(MMP-9 mRNA)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1 mRNA)基因表达的动态变化及下瘀血汤对其影响,探讨下瘀血汤抗肝纤维化的机制。[方法]猪血清腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型,造模8周后灌胃给予下瘀血汤流浸膏干预治疗,用药4周后和造模过程中的1、2、4、8周动态处死大鼠,获取标本,检测指标。[结果]与正常组相比,模型组1、8、12周MMP-9 mRNA表达明显降低(P<0.05,<0.01),2周MMP-9 mRNA表达显著升高(P<0.01),4周表达无明显变化。与模型组12周相比,下瘀血汤组MMP-9 mRNA表达明显升高(P<0.05)。与正常组相比,1、2、4、8和12周模型组TIMP-1 mRNA表达均有显著升高(P<0.05,<0.01))。与12周模型组相比,下瘀血汤组TIMP-1 mRNA表达显著降低(P<0.01)。[结论]大鼠猪血清免疫性肝纤维化存在着MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA的动态变化,下瘀血汤可通过促进MMP-9 mRNA表达和抑制TIMP-1 mRNA表达而发挥抗肝纤维化的作用。
- 都广礼陈德兴张艳韩琳
- 关键词：肝纤维化基质金属蛋白酶9基质金属蛋白酶组织抑制因子1基因表达下瘀血汤
- 猪血清肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-9/13和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1/2表达的动态变化及下瘀血汤对其影响被引量：20
- 2009年
- 目的:研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9/13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1/2表达的动态变化及下瘀血汤对其影响,探讨下瘀血汤抗肝纤维化的机制。方法:猪血清腹腔复制大鼠肝纤维化模型,造模8周后ig下瘀血汤的流浸膏,用药4周后和在造模过程中的1、24、、8周动态处死大鼠,获取标本,检测指标。结果:MMP-2/9的高活性和TIMP-1的高表达贯穿于本模型的始终。MMP-9/13蛋白表达在肝纤维化发生发展过程中有先抑制后升高,再次抑制而后升高的反复过程,并受TIMP-1/2表达影响;下瘀血汤可以提高MMP-9活性,促进MMP-9/13而抑制TIMP-1,2表达。结论:该模型有MMP-9/13和TIMP-1/2表达的失衡;下瘀血汤可通过调控MMp-9/13和TIMP-1/2的表达,降解过度沉积的细胞外基质而发挥抗肝纤维化的作用。
- 都广礼刘平王磊谭善忠龙爱华慕永平王春树
- 关键词：肝纤维化猪血清
- Kupffer细胞在肝纤维化作用中的研究进展被引量：4
- 2007年
- 韩琳都广礼陈德兴
- 关键词：肝纤维化KUPFFER细胞
- 下瘀血汤抗猪血清免疫性肝纤维化方证相关的药效学研究被引量：24
- 2007年
- 目的:研究下瘀血汤抗大鼠猪血清肝纤维化方-证相关的药效学机制。方法:猪血清腹腔注射复制肝纤维化模型,造模8周后继续造模的同时以下瘀血汤、茵陈蒿汤、黄芪汤、二至丸和小柴胡汤进行干预治疗。测定大鼠血清ALT、AST、ALP和GGT活性,Alb、TP和TBil含量;Jamall法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清ALT和AST活性增高、Alb和TP含量显著下降(P<0.05),ALP和GGT活性及TBiL含量虽有升高但无显著性差异(P>0.05);与模型组比较,下瘀血汤、茵陈蒿汤和小柴胡汤组大鼠血清肝功能有一定的改善,以下瘀血汤组为最佳;与正常组比较,模型组大鼠肝组织Hyp含量显著增加(P<0.05);与模型组比较,下瘀血汤组大鼠肝组织Hyp含量显著降低(P<0.05),其它各药物组无改善作用(P>0.05)。结论:下瘀血汤可有效的抑制大鼠猪血清免疫性肝纤维化,提示本模型病理阶段的证候为瘀血阻络。
- 都广礼刘平王磊王春树龙爱华慕永平
- 关键词：下瘀血汤肝纤维化猪血清
