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p21^waf1-p27^kip1基因联合转染对乳腺癌细胞增殖和中心体复制的影响被引量：2: 2009年; 目的探讨外源性p21^waf1-p27^kip1基因联合转染对人乳腺癌细胞细胞增殖及中心体复制的影响和意义。方法应用脂质体介导法分别将构建的pIRES-p21^waf1、pIRES-p27^kip1、pIRES-p21^waf1-p27^kip1真核表达载体，转染入常规培养的人乳腺癌细胞系MCF-7，未转染组、转染空质粒组细胞做对照，Western免疫印迹法验证转染前后p21^waf1、p27^kip1基因蛋白表达情况；噻唑蓝（MTT）法绘制细胞生长曲线；流式细胞仪检测细胞周期DNA分布变化；免疫荧光技术检测转染前后中心体复制的变化情况。结果Western免疫印迹法证实p21^waf1、p27^kip1、p21^waf1-p27^kip1基因转染24h后，其蛋白表达量明显增多（P〈0.01），与对照组比较，各转染实验组细胞生长明显受抑制（P〈0.01），细胞周期大部分停滞于G1期，各实验组G1期和S期细胞比例依次为：（69.52±3.21）％、（18.38±2.51）％，（60.83±3.02）％、（24.52±1.89）％，（78.37±2.83）％、（15.27±1.74）％，对照组则为（47.28±2.25）％、（33.52±1.97）％，中心体复制异常的乳腺癌细胞数较转染前（13.47±0.33）％明显减少：（5.07±0.38）％，（6.28±0.35）％，（3.47±0.23）％，两两比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论外源性p21^waf1和p27^kip1基因转染可抑制人乳腺癌细胞的增殖及中心体的异常复制，二者联合转染时效果显著。提示，乳腺癌的发生、发展是多基因、多因素共同参与的过程，p21^waf1和p27^kip1在调控细胞增殖及中心体复制方面具有协同作用，对于p21^waf1、p27^kip1基因失活、低表达或不表达的乳腺癌，联合转染外源性p21^waf1、p27^kip1基因不失为一种有效的治疗手段。; 姜丹丹李福年刘相萍; 关键词：中心体细胞增殖 P21^WAF1基因 P27^KIP1基因

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山东省自然科学基金(2007C134)

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