军队杰出人才基金(04J015)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
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- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院第四军医大学唐都医院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测被引量：3
- 2006年
- 目的:获得大量重组人α防御素(HDα)并检测其活性,为其深入研究提供必要的材料。方法:体外化学合成得到带有羟氨裂解位点编码序列的HDα基因片段,克隆入pBV220-IL-4表达载体构建重组表达载体pBV220-IL-4-HDα。测序正确后将重组质粒转入大肠杆菌DH5α中进行温度诱导表达。经羟氨裂解去除IL-4后,对所得蛋白进行纯化、复性,以SDS-PAGE和生物学活性检测鉴定其特性。结果:经温度诱导后,融合蛋白主要以包涵体的形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的20%;羟氨裂解切除IL-4后,所得目的蛋白的纯度约为99.8%。抑菌活性试验和克隆形成试验显示,所得HDα对细菌生长有明显的抑制作用。结论:成功地构建了HDα基因的重组表达质粒,获得稳定表达的工程菌,并建立了复性与纯化技术,为进一步对其进行功能研究与应用奠定了基础。
- 傅海燕张剑路凡蒲勤王孝功卢兹凡徐俊卿赵忠良
- 关键词：纯化生物学活性
- 人防御素-α克隆表达纯化及生物活性初步检测被引量：2
- 2005年
- 张剑傅海燕杨瑞静蒲勤王孝功路凡赵忠良
- 关键词：生物活性克隆表达纯化杀灭作用细菌感染
