广东省重大科技项目(2003A3080501)
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 相关作者：徐浩弓健张欣周天鸿李月琴更多>>
- 相关机构：暨南大学附属第一医院暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省重大科技项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 化学发光法测定健康成年男性血清CA125的正常参考值被引量：3
- 2011年
- 目的:建立健康成年男性血清肿瘤抗原125(CA125)正常参考值范围。方法:采用美国雅培公司生产的全自动化学发光免疫分析仪i2000检测203例健康成年男性血清CA125水平,计算第95百分位数(P95),建立正常参考值范围。结果:血清CA125呈偏态分布。血清CA125中位数为10.3 U/mL,最小值为1.3 U/mL,最大值为28.3 U/mL,95%位数为23.0 U/mL,75%受检者血清CA125低于15U/mL,93%受检者血清CA125低于20 U/mL,97%受检者血清CA125低于25U/mL。经过以10为底的对数转换后呈正态分布,均数为1.01,标准差为0.22。结论:正常成年男性血清CA125正常参考值的建立,对其在某些非肿瘤病理情况下(尤其是慢性心力衰竭)的临床应用提供基础。
- 郭斌吴秋莲弓健徐浩
- 关键词：正常值范围化学发光免疫分析
- hNIS转染介导鼻咽癌移植瘤放射性核素显像和治疗实验被引量：3
- 2012年
- 目的通过荷瘤裸鼠实验探讨hNIS基因转染介导^131I治疗鼻咽癌的可行性及其作用机制。方法利用转染hNIS的鼻咽癌CNE-2-hNIS细胞（实验组）和未转染hNIS的CNE-2细胞（对照组）分别建立荷鼻咽癌裸鼠模型，对裸鼠行^131I体内分布实验和^99Tc^m显像，观察^131I治疗前后实验组和对照组移植瘤体积变化。采用原位末端标记法（TUNEL）检测治疗前和治疗后第6天移植瘤细胞的凋亡率，以免疫组织化学法检测治疗前后移植瘤半胱氨酸蛋白酶3（caspase3）和细胞增殖相关核抗原Ki67的表达。用SPSS13．0软件对样本均数间差异行t检验。结果成功构建荷CNE-2-hNIS裸鼠移植瘤与荷CNE-2裸鼠移植瘤模型。实验组移植瘤摄取^131I能力增强，1h达高峰，摄取率达（20．284-0．15）％，^131I生物半衰期为1．56h。显像结果示实验组移植瘤有放射性浓聚，1．5～2h移植瘤摄取”Tc“0f达高峰，肿瘤显影清晰，而对照组移植瘤未见显影。实验组移植瘤治疗前体积为（0．44±0．04）cm^3，^131I治疗后第24天体积为（0．97±0．08）cm^3；而对照组相应值分别为（0．45±0．06）和（2．98±0．16）cm^3，治疗后实验组移植瘤体积与对照组比较，差异有统计学意义（t=19．46，P〈0．01）。^131I治疗后第6天实验组移植瘤凋亡率[（0．66±0．07）％]增高，caspase3阳性率[（0．56±0．14）％]增高，Ki67增殖指数[（0．22±0．10）％]降低，与治疗前[各指标依次为（0．08±0．06）％、（0．13±0．04）％和（0．65±0．11）％]比较差异有统计学意义（t值分别为10．89、5．12和5．01，均P〈0．05）。结论荷瘤裸鼠实验表明，hNIS转染鼻咽癌在体内可明显摄取^131I、^131I及^99Tc^m，可进行放射性核素显像和治疗；^131I能有效抑制hNIS转染鼻咽癌细胞的增殖，诱导其凋亡。
- 钟兴弓健郭斌黄力徐浩
- 关键词：肿瘤移植转染碘转运体近距离放射疗法
- 腺病毒介导生长抑素2型受体对裸鼠人胰腺癌移植瘤抑制作用的研究被引量：3
- 2007年
- 目的构建表达生长抑素2型受体(SSTR2)的重组腺病毒,探讨其对裸鼠人胰腺癌移植瘤生长的影响及机制。方法2004-06-01—2005-12-10,在暨南大学生物工程学系采用位点特异性重组方法构建和包装携带人生长抑素2型受体和报告基因LacZ的重组腺病毒Ad-SSTR2和Ad-LacZ。建立裸鼠人胰腺癌移植瘤模型,分别于瘤内注射生理盐水(阴性对照组)、Ad-LacZ(报告基因对照组)和Ad-SSTR2(实验组),观察肿瘤大小和重量变化。通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)鉴定SSTR2在裸鼠肿瘤组织中的表达,Western blot测定信号传导通路蛋白ERK2和ras的表达情况。结果获得滴度分别为6.0×1012pfu/L和6.5×1012pfu/L的重组腺病毒Ad-SSTR2和Ad-LacZ。Ad-SSTR2转染裸鼠胰腺癌移植瘤后SSTR2 mRNA和蛋白都得到有效表达,实验组对移植瘤生长具有明显的抑制作用,抑制率为48.2%。与阴性对照组和报告基因对照组相比,实验组ERK2和ras蛋白的表达量明显减少(P<0.01)。结论腺病毒介导的生长抑素2型受体对裸鼠人胰腺癌移植瘤的生长具有抑制作用,其作用机制可能与信号传导通路蛋白ERK2和ras的表达下调有关,提示其有可能成为胰腺癌基因治疗的一种有效方法。
- 徐彬徐浩李月琴曹忠健张欣周天鸿
- 关键词：胰腺肿瘤腺病毒
- 携带人生长抑素2型受体的腺病毒载体的构建和表达被引量：2
- 2006年
- 目的:构建表达SSTR2的重组腺病毒载体,用于胰腺癌的基因治疗。方法:构建重组腺病毒穿梭质粒pDC316-SSTR2,通过脂质体与腺病毒骨架质粒pBHG lox(delta)E1,3Cre共转染293细胞,经位点特异性重组获得重组腺病毒Ad-SSTR2。通过PCR鉴定Ad-SSTR2。经293细胞扩增,纯化制备高滴度病毒感染液。以病毒感染液感染人胰腺癌细胞capan-2,应用免疫印迹检测SSTR2蛋白的表达。结果:成功构建腺病毒穿梭质粒pDC316-SSTR2,与pBHG lox(delta)E1,3Cre共转染293细胞获得了重组腺病毒Ad-SSTR2,以Ad-SSTR2基因组DNA为模板同时扩增出了人SSTR2 cDNA基因片段和腺病毒骨架基因片段。Ad-SSTR2感染capan-2 48 h后,免疫印迹检测到SSTR2蛋白的表达。结论:表达人SSTR2的重组腺病毒载体构建成功,并在胰腺癌细胞中得到正确表达,为SSTR2基因治疗胰腺癌奠定了基础。
- 徐彬徐浩李月琴曹忠健张欣周天鸿
- 关键词：腺病毒科基因疗法
- hNIS转染介导放射性核素显像和治疗鼻咽癌及其机制研究
- 目的建立hNIS基因转染介导核索显像和治疗鼻咽癌的技术,为鼻咽癌放射性核素报告基因显像和基因治疗提供一种新治疗策略;并以调控肿瘤凋亡相关基因为靶点,探讨hNIS转染介导核素治疗鼻咽癌的作用机制。方法(1)体
- 钟兴徐浩弓健郭斌
- 生长抑素2型受体在12株肿瘤细胞中的表达
- 2006年
- 目的研究多种肿瘤细胞是否广泛表达生长抑素2型受体(SSTR2),以期探讨生长抑素类似物应用于各种肿瘤治疗的可能性。方法分别提取肺癌、鼻咽癌、宫颈癌、肝癌、乳腺癌及胰腺癌6种肿瘤,共12株细胞的总RNA,用反转录PCR检测SSTR2 mRNA的表达,同时制备12株细胞的总蛋白样品,经免疫印迹检测SSTR2蛋白的表达。结果除1株肺癌细胞外,其余11株细胞都表达SSTR2 mRNA;有1株肺癌细胞,2株胰腺癌细胞不表达SSTR2蛋白。结论除胰腺癌外,生长抑素2型受体在多种肿瘤细胞中的表达有较大的普遍性。
- 徐彬徐浩李月琴曹忠健张欣初彦辉周天鸿
- 关键词：生长抑素2型受体肿瘤细胞基因表达免疫印迹
- hNIS转基因介导^(131)碘对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:克隆人的甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)基因,研究其转导在鼻咽癌细胞内的功能,以及131碘对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到hNIS的可编码区基因,并克隆到pcDNA3.1(+)-FLAG载体,获得重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hNIS-FLAG。采用脂质体转染的方法,将pcDNA3.1(+)-hNIS-FLAG质粒导入到鼻咽癌细胞株CNE2,G418筛选得到稳定表达hNIS鼻咽癌细胞系CNE2-hNIS,体外培养条件下检测其对放射性碘的摄取和外流情况。CCK8试剂盒检测131碘对鼻咽癌细胞增殖的作用,AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞技术(FCM)检测131碘作用后鼻咽癌细胞凋亡情况。结果:成功克隆hNIS基因,并建立能稳定表达hNIS的鼻咽癌细胞系CNE2-hNIS。CNE2-hNIS对125碘的吸收量比CNE2高约15倍,但在无碘的环境中,细胞内滞留的碘外流迅速,有效半衰期约8min。131碘在72 h后对CNE2-hNIS的增殖产生抑制作用,细胞早期凋亡率增加,并随着131碘浓度的增加,作用逐渐增强(P<0.01)。结论:从Graves病人的甲状腺组织中克隆的hNIS基因转染鼻咽癌细胞后,能使鼻咽癌细胞发挥高水平吸碘功能,131碘能够抑制转染hNIS的鼻咽癌细胞的增殖,促进细胞凋亡。
- 钟兴弓健曾祥凤徐浩
- 关键词：基因转染碘放射性同位素
