国家高技术研究发展计划(2003AA205181)
- 作品数:6 被引量:25H指数:2
- 相关作者:段华新程腊梅卢光琇更多>>
- 相关机构:中南大学广州市第一人民医院广州医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 两种内皮祖细胞成血管能力的比较被引量:2
- 2007年
- 目的:比较高增殖潜能内皮祖细胞(HPP-EPCs)和循环成血管细胞(CACs)两种内皮祖细胞的成血管能力。方法:利用基质胶上毛细血管样结构的形成实验比较两种细胞的体外成血管能力;利用免疫缺陷的无胸腺裸鼠建立后肢缺血模型评价两种细胞移植后体内促进新生血管形成的能力;并利用荧光标记示踪的方法研究移植的内皮祖细胞能否整合入新生的毛细血管中。结果:HPP-EPCs形成的毛细血管样结构数明显高于CACs(28.6±15.8vs4.7±3.4,P<0.01)。内皮祖细胞移植能增加肢体的保留比例,减少肢体脱失率,促进缺血肢体的血流恢复,而且HPP-EPCs移植组的增加程度较CACs移植组的为高。HPP-EPCs和CACs移植组的毛细血管密度均高于对照组(P<0.001),且HPP-EPCs高于CACs移植组(P<0.01)。结论:HPP-EPCs较CACs具有更强的成血管能力。
- 段华新卢光琇程腊梅
- 关键词:内皮祖细胞血管形成缺血细胞移植
- 比较两种内皮祖细胞增殖、抗凋亡和集落形成能力被引量:2
- 2007年
- 比较两种内皮祖细胞的增殖潜能、抗凋亡和集落形成能力。方法:本研究用增殖曲线、倍增水平、倍增时间的计算及MTT增殖实验等方法比较两种内皮祖细胞的增殖特点;用单个细胞的集落形成实验比较两种细胞的集落形成能力;并用流式细胞术检测两种细胞凋亡发生率。结果:循环成血管细胞(CACs)只能达到4-6个倍增,而高增殖潜能内皮祖细胞(HPP-EPCs)能达到60多个倍增。HPP-EPCs的累计倍增水平是CACs的9.53倍。MTT实验的结果也支持HPP-EPCs增殖明显快于CACs。来自CACs的单个细胞不能形成集落。但是,HPP-EPCs的单个细胞中45%在14 d的培养期间形成了集落,并且来自二级集落的96个单个细胞中有5个三级集落形成。HPP-EPCs显示比CACs具有更强的抗凋亡能力。结论:HPP-EPCs比CACs具有更强的增殖能力、集落形成能力和抗凋亡能力。
- 段华新卢光琇程腊梅
- 关键词:内皮祖细胞增殖能力凋亡集落形成
- LFA-1和VLA-4参与人高增殖潜能内皮祖细胞与血管内皮的黏附和跨内皮迁移被引量:7
- 2008年
- 为了了解淋巴细胞功能相关抗原1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)和极迟反应抗原4(very late antigen 4,VLA-4)在高增殖潜能内皮祖细胞(high proliferative potential endothelial progenitor cells,HPP-EPCs)归巢过程中与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中的作用,利用流式细胞术检测HPP-EPC中整合蛋白β1和β2的表达以及小鼠骨髓内皮细胞相应的受体的表达。利用体外黏附和迁移实验研究经过功能级别的中和抗体阻断VLA-4和LFA-1后HPP-EPC黏附和迁移细胞数目的变化。结果表明,HPP-EPC表达整合蛋白β1和β2,活化后小鼠骨髓内皮细胞表达细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1);加CD11a抗体组黏附细胞或CD49d抗体组黏附和迁移细胞均较同型对照抗体组少,而且加CD11a和CD49d两种抗体联用组黏附和迁移细胞明显减少,其细胞数较任何单一抗体组少。结论:LFA-1和VLA-4在HPP-EPC与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中发挥了重要的作用。
- 段华新卢光琇程腊梅
- 关键词:LFA-1VLA-4
- 脐血来源的两种内皮祖细胞的分离、培养和鉴定被引量:14
- 2008年
- 为了建立从人脐血分离培养两种内皮祖细胞的方法和培养体系,从脐血分离单个核细胞,在含有内皮细胞条件培养液的体系中培养得到两种细胞,利用摄取乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low-density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)和结合欧洲荆豆凝集素(Ulex European Agglutinin1,UEA-1)进行鉴定,并进一步用免疫细胞化学、RT-PCR、流式细胞术对它们进行内皮细胞相关的表型检测。结果表明,这两种细胞均能摄取DiI-Ac-LDL和结合UEA-1,表达内皮细胞的标志如CD31、CD144和血管假性血友病因子(von Willebrand Factor,vWF),有CD31、酪氨酸激酶受体(kinase tyrosine insert domain receptor,KDR)、CD144和内皮一氧化氮合成酶(endothelial NO synthase,ENOS)的基因转录。但是,它们的增殖能力明显不同,分别称为循环成血管细胞和高增殖潜能内皮祖细胞。流式细胞计数结果显示,这两种细胞在一些表面标志表达方面也存在明显的差异。结论:利用含内皮细胞条件培养液的培养体系,成功地从脐血分离的单个核细胞中培养得到了两种内皮祖细胞。
- 段华新卢光琇程腊梅
- 关键词:内皮祖细胞脐血细胞培养
- VLA-4和LFA-1参与HPP-EPC体内向缺血组织的归巢被引量:1
- 2008年
- 目的研究极迟反应抗原(VLA-4)和淋巴细胞功能抗原(LFA-1)参与高增殖潜能内皮祖细胞(HPP-EPC)体内向缺血组织的归巢的情况。方法结扎股动脉构建裸鼠后肢缺血模型,移植经功能级别的VLA-4(或CD49d)和LFA-1(或CD11a)中和抗体阻断后的HPP-EPCs,观察肢体坏死长度和肢体脱失情况,用放射性核素方法检测缺血肢体血流恢复程度,组织学方法计数毛细血管密度和归巢到缺血区肌肉组织的荧光标记的内皮祖细胞数目。结果CD11a抗体组、CD49d抗体组及两种抗体联用组的肢体坏死长度都较同型对照抗体组为高(P<0.05)。而且,两种抗体联用组比任一种抗体组的肢体坏死长度都要高(P<0.05)。各抗体阻滞组血流恢复、毛细血管密度和归巢HPP-EPC细胞数目均较同型对照抗体封闭组低(P<0.05)。而且,两种抗体联用组比任一种抗体组的肢体血流、毛细血管密度和归巢HPP-EPC细胞数目改善都明显(P<0.05)。结论LFA-1和VLA-4参与了HPP-EPC体内向缺血组织的归巢过程。
- 段华新卢光琇程腊梅
- 关键词:归巢
- 脐血来源的不同增殖能力的两种内皮祖细胞
- 2008年
- 目的比较两种脐血来源内皮祖细胞的增殖和抗凋亡能力。方法采用Annexin V/PI的凋亡检测比较两种细胞抵抗凋亡的能力;用增殖实验等方法比较两种内皮祖细胞的增殖特点;用集落形成实验比较两种细胞的集落形成能力。结果发现高增殖潜能内皮祖细胞(HPP-EPCs)显示比循环成血管细胞(CACs)具有更强的抗凋亡能力。CACs只能达到4~6个倍增,而HPP-EPCs能达到60多个倍增。CACs的单个细胞不能形成集落,HPP-EPCs的单个细胞中能在14d的培养期间形成了次级集落和三级集落。结论HPP-EPCs比CACs具有更强的抗凋亡能力、增殖能力和集落形成能力。
- 段华新卢光琇程腊梅
- 关键词:内皮祖细胞增殖凋亡集落形成