黑龙江省自然科学基金(D01-04)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：姜洪池代文杰吕晓颖潘尚哈曲欣更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人源化绿色荧光蛋白基因真核表达载体的构建与表达检测被引量：1
- 2002年
- 目的 :构建人源化绿色荧光蛋白 (humanizedgreenfluorescentprotein ,hGFP)基因的真核表达载体pcDNA3GFP ,并观察其在MDCK细胞中的表达情况。方法 :以NotI切取GFP后插入真核表达载体pcDNA3,以BamHI为鉴定方向 ,以LipofectAMINEPLUSTM将pcDNA3GFP转染至培养的MDCK ,经G4 18筛选GFP阳性克隆 ,于荧光显微镜下观察。结果 :成功构建了含hGFPcDNA的真核表达载体pcDNA3GFP ,并成功转染MDCK细胞 ,在荧光显微镜下阳性克隆呈绿色。结论 :GFP基因可在MDCK细胞中成功表达 ,并发出绿色荧光 ,是一良好的报告基因和筛选标记。
- 代文杰吕晓颖周保国姜洪池曲欣
- 关键词：绿色荧光蛋白真核转染
- 小鼠共刺激分子B7-1的分子克隆、测序与真核表达载体的构建
- 2002年
- 目的 克隆小鼠共刺激分子B7-1基因,测序并构建其真核表达载体。方法 从小鼠脾组织中提取总RNA.,用RT-PCR方法将B7-1的DNA扩增出,克隆到真核表达载体pcDNA3中,测定其cDNA序列。结果 测序结果表明我们克隆的B7-1基因序列与CenBank中序列有1个碱基不同,所编码的氨基酸发生突变。结论 已成功构建小鼠B7-1的真核表达载体,为进一步应用B7-1进行肿瘤基因治疗打下基础。
- 周保国乔海泉代文杰潘尚哈姜洪池
- 关键词：共刺激分子真核表达载体B7-1逆转录聚合酶链反应
- 重组AAV—hIL10对慢性肝损伤的预防和治疗作用
- 2007年
- 目的人白细胞介素-10（interleukin 10，IL-10）是肝纤维化、肝硬化过程中的重要负性调节因子，通过AAV病毒基因转导方式，探讨hIL-10对慢性肝损伤的预防和治疗作用。方法以重组腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus，rAAV）转移质粒载体pTR-UF5为基础构建表达质粒pTR-UF5／hIL-10。采用本室构建的高效重组AAV包装系统，产生感染性重组AAV-hIL-10，滴度4．22×10^8／ml。以硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）复制大鼠慢性肝损伤模型。采用肌肉注射方式将rAAV-hIL10以等量分别注射于大鼠双侧后肢内侧肌肉中，观察预防性给药（总量为150ul／100g体重）和治疗性给药（总量为200ul／100g体重）前后对大鼠血清AST、ALT、ADH和透明质酸（hyaluronic acid，HA）、层连蛋白（laminin，LN）、Ⅲ型前胶原（procollagen Ⅲ，PCⅢ）的影响。结果成功构建重组AAV-hIL10系统。重组病毒感染后，预防性和治疗性给药后较给药前，大鼠血清AST、AL，T、ADH和HA、LN、PCⅢ水平均有显著下降（P〈0．05，或P〈0．01）。16周肝脏病理学分级和大鼠生存率均有显著差异。结论重组AAV-hIL10对TAA所致慢性肝损伤具有显著的预防和治疗作用。
- 代文杰武林枫吕晓颖胡震吴耀华潘尚哈姜洪池
- 关键词：肝损伤白细胞介素10重组腺相关病毒
