中央高校基本科研业务费专项资金(GK200902029)
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 相关作者：杨章民刘晓飞杜国俊裴剑竹王红军更多>>
- 相关机构：陕西师范大学哈佛大学西安回天血液制品有限责任公司更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 蛇毒合成的信号通路
- 2012年
- 蛇毒液产生的周期分为活跃期和静息期两个阶段,在这两个阶段中毒腺分泌细胞的形态学和生物化学方面存在着许多不同。蛇咬物排毒或人工取毒后其释放的去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)是分泌细胞中合成毒液所必需的,其中分泌细胞的α肾上腺素能受体(α-adrenoceptor,α-AR)和β肾上腺素能受体(β-adrenoceptor,β-AR)参与了这个过程。本文简要介绍在毒液产生周期的不同阶段中分泌细胞的变化,重点阐述了刺激α-AR和β-AR在引起毒液合成开始时所介导的相关细胞信号通路。最后简单探讨了其它刺激蛇毒腺引起毒液产生的可能因素及其调控机制。
- 张宏丽何艳琴杨章民
- 关键词：去甲肾上腺素Β肾上腺素能受体
- 蛇毒丝氨酸蛋白酶结构与功能关系
- 2012年
- 蛇毒丝氨酸蛋白酶(snake venome serine proteinases,SVSP)是分布于多种蛇毒中的一类蛋白质水解酶,它们与凝血及纤溶系统关系密切,具有一定的临床应用价值。本文主要介绍了几种空间结构已知的SVSP在结构上的特征,以及由此而产生的底物特异性及生化特性的差异,显示了天然SVSP中存在着与功能相关的结构变异多样性,这为进一步开发及医学利用SVSP提供了有益的信息。
- 裴剑竹杨章民
- 蛇毒舒缓激肽增强肽
- 2013年
- 舒缓激肽增强肽(bradykinin potentiating peptide,BPP)是广泛分布于蝰科(主要是蝮亚科)蛇毒中的一类小分子生物活性肽。BPP具有增强舒缓激肽以及抑制血管紧张素I转化酶(angiotensin-I converting enzyme,ACE)活性的双重毒理学作用,是造成被毒蛇咬伤时血压骤降的主要组分,也是降压药开博通(Captopril)的天然模式分子。本文简要综述了蛇毒BPP分布与种类、结构和生物学功能等方面的研究进展。
- 李旭慧权燕敏吴晓莎杨章民
- 关键词：蛇毒低血压
- 蛇毒蛋白原核表达包涵体复性研究进展被引量：7
- 2011年
- 外源基因在大肠杆菌中表达后常形成不溶性的无活性包涵体。包涵体的形成已经成为研究和应用活性蛋白质生产的主要障碍。然而,在合适的条件下,包涵体经过溶解、纯化、复性过程后可在体外重新折叠成有活性的蛋白质。迄今,已对蝰科、眼镜蛇科11种毒蛇的18个基因(包括金属蛋白酶、PLA2、β-银环蛇毒素、心脏素素、丝氨酸蛋白酶、神经生长因子、C-型凝集素等)成功进行了原核表达,采用稀释复性、透析复性和层析复性三种方法成功进行了包涵体复性。着重就蛇毒蛋白原核表达后包涵体复性所用的方法予以综述。
- 刘晓飞裴剑竹杜国俊杨章民
- 关键词：包涵体复性
- 蛇毒素蛋白毕赤酵母表达进展被引量：2
- 2010年
- 蛇毒是许多具有独特生物活性的蛋白质与酶的混合物,在基础科学研究和临床上有重大应用价值,但是通过从蛇毒中分离获取活性组分具有局限性。巴斯德毕赤酵母表达系统是最为常用的真核表达系统之一,其真核加工、折叠、翻译后修饰等能力使得所表达的重组蛋白具有与天然蛋白近似的生物活性,因而该系统在富含二硫键或糖基化的蛇毒素蛋白表达中被广为采用。迄今为止,已经有12个属的25种蛇毒素蛋白(包括蛇毒丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶/去整合素、L-氨基酸氧化酶、C-型凝集素和神经毒素、血管收缩因子、神经生长因子等家族)在毕赤酵母中获得成功表达,蛇毒富半胱氨酸蛋白、缓激肽增强肽(BPP)等至今尚未见酵母表达的报道。毕赤酵母表达蛇毒素蛋白失败的原因可能在于,有关密码子偏爱性、目的基因转录出的RNA二级结构特征、糖基化程度不均一及糖型差异、所表达毒素对酵母细胞的毒性等方面,并对解决的方法进行了讨论。
- 杜国俊刘晓飞王红军杨章民
- 关键词：蛇毒蛋白家族毕赤酵母表达
- 中介蝮蛇毒L-氨基酸氧化酶基因的生物信息学分析被引量：1
- 2015年
- 采用生物信息学方法,对中介蝮蛇毒L-氨基酸氧化酶（GI-LAO）基因进行了分析。结果表明：GI-LAO基因所包含的开放阅读框为1 515bp,编码504个氨基酸残基;GI-LAO一级结构与白眉蝮GH-LAO的相似性最高,达99%;N-端的18个氨基酸残基为信号肽,成熟肽含486个氨基酸残基,相对分子质量为55.1kDa,理论等电点为6.55;该蛋白含有两个结构域：FAD结合域（56-123位氨基酸残基）和催化结构域（61~499位氨基酸残基）;与白眉蝮GH-LAO序列比对发现,有4个氨基酸位点存在差异（分别是20、56、99和467位氨基酸残基）,用SIFT软件分析表明,这四个位点对其功能无影响;该基因编码的氨基酸序列有2个活性位点（H242和R343）,2个N-糖基化位点（N190和N379）,5个位点（R108、H241、Y390、G482和W483）与底物结合有关,4个保守半胱氨酸残基形成两对二硫键（C28—C191和C349—C430）;三维结构建模结果表明,GI-LAO形成同源二聚体,每个单体由22个α-螺旋,22个β-折叠股和一些无规则卷曲、转角等形成三个结构域：FAD结合域,底物结合域以及α-螺旋域;在GI-LAO蛋白的进化分析中,中介蝮GI-LAO与白眉蝮GHLAO的亲缘关系最近。
- 张翠郭积芳孙悦王芳霞杨章民
- 关键词：中介蝮L-氨基酸氧化酶基因生物信息学
- 中介蝮毒腺C-型凝集素样蛋白基因的cDNA克隆和序列分析
- 2015年
- C-型凝集素样蛋白是一类钙离子依赖型的具有糖结合活性的非酶蛋白,可结合凝血因子及血小板而影响人体的凝血系统稳态,具有抗凝作用。本研究基于中介蝮(Gloydius intermedius)蛇毒C-型凝集素样蛋白α链和β链的部分核苷酸序列,设计了2对PCR引物,通过RT-PCR技术从中介蝮毒腺中克隆出的α和β链(Gi-CTLPα,Gi-CTLPβ)的全长c DNA,克隆入T载体后,对所获克隆进行了测序,并进行了生物信息学分析。结果表明,Gi-CTLPα、Gi-CTLPβ的开放阅读框(ORF)分别为477 bp和462 bp,分别编码158个和153个氨基酸,信号肽分别为21个和23个氨基酸。蛋白质一级结构同源性分析表明,Gi-CTLPα和Gi-CTLPβ之间的序列相似度为29%,Gi-CTLPα和β分别与日本蝮(Gloydius blomhoffi)的Mamushiginα亚基和β亚基的同源性最高(90%和93%),Gi-CTLPα和Mamushigin的α亚基氨基酸序列的差异主要有13个,Gi-CTLPβ和Mamushigin的β亚基氨基酸序列的差异主要有7个。用蛋白功能预测软件SIFT在线分析表明,Gi-CTLPα中第47和136位的氨基酸差异使得Gi-CTLPα与Mamushiginα的功能明显不同,而Gi-CTLPβ和Mamushiginβ亚基的功能没有明显差异。由于Gi-CTLPα和β链会像Mamushigin那样通过二硫键形成异二聚体,这些一级结构的差异会影响其与靶蛋白的结合特性,这一结果为下一步研究Gi-CTLP的功能及利用奠定了理论基础。
- 陈毓张卫柱刘玲玲杨玉娥杨章民
- 关键词：中介蝮CDNA生物信息学
