中国博士后科学基金(2005038472)
- 作品数：15 被引量：86H指数：6
- 相关作者：王佐姜志胜周晓峰童中艺危当恒更多>>
- 相关机构：南华大学重庆大学常德职业技术学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金湖南省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
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- 基质细胞衍生因子1α促进大鼠骨髓源性内皮祖细胞血管样结构形成被引量：2
- 2010年
- 目的观察基质细胞衍生因子1α对体外培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞血管样结构形成的影响。方法微孔法获取大鼠骨髓内皮祖细胞,采用免疫荧光鉴定内皮祖细胞特异性标记物VEGFR-2/CD133。1、10和100μg/L基质细胞衍生因子1α以及100μg/L基质细胞衍生因子1α+CXCR4拮抗剂AMD3100共处理内皮祖细胞,采用细胞培养、MTT等方法检测内皮祖细胞血管样结构形成和细胞增殖能力。结果体外培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞出现典型铺路石形状及血管样结构,与此同时内皮祖细胞分化成熟,表达内皮细胞特异性标记物vWF。MTT法检测发现,10和100μg/L基质细胞衍生因子1α处理组的OD值(分别为0.813±0.056和1.029±0.078)与对照组(0.591±0.054)比明显升高(P<0.01),而100μg/L基质细胞衍生因子1α+AMD3100组OD值(0.607±0.077)与对照组比差异无显著性,与100μg/L基质细胞衍生因子1α组比较明显降低(P<0.01)。100μg/L基质细胞衍生因子1α处理组血管样结构长度是对照组的近6倍(10.890±0.360比1.930±0.279,P<0.01),100μg/L基质细胞衍生因子1α+AMD3100组血管样结构长度(2.030±0.443)与对照组比差异无显著性,与100μg/L基质细胞衍生因子1α组比差异有统计学意义(P<0.01)。
- 童中艺王佐李雪兰
- 关键词：基质细胞衍生因子1Α内皮祖细胞
- 微孔法分离大鼠骨髓内皮祖细胞被引量：13
- 2007年
- 用一种杂交瘤皿,根据内皮祖细胞集落形成单位(endothelial progenitor cells colony-forming units,EPCs-CFUs)的形态特征和EPCs表面特异性标记物分离EPCs.取大鼠股骨、胫骨骨髓,将全骨髓接种在聚苯乙烯制作的杂交瘤皿上,培养4～7天后出现CFUs,将这些集落分别挑选出来后,取单个集落的部分细胞免疫荧光鉴定EPCs表面特异性标记物CD133/VEGFR-2.CD133/VEGFR-2双阳性即为EPCs-CFUs.与此对应的余下一部分继续传代增殖,流式细胞术鉴定CD133/VEGFR-2/CD34,并把此方法命名为微孔法.发现接种后第4天,显微镜下可见明显的CFUs.免疫荧光鉴定大约7%的CFUs为CD133+/VEGFR-2+,进一步传代培养,流式细胞术鉴定CD133+/VEGFR-2+/CD34+细胞纯度达70%以上.传代细胞可在体外形成血管样结构,并表达内皮细胞特异性标记物vWF.结果表明通过微孔法能成功地从大鼠骨髓分离到EPCs.
- 王佐童中艺周晓峰姜志胜唐朝克宋砚明田永凤
- 关键词：大鼠骨髓内皮祖细胞
- 内皮祖细胞在动脉粥样硬化进程中的作用被引量：25
- 2007年
- 内皮祖细胞因参与再内皮化和血管新生,在动脉粥样硬化病变发生发展中可能起着举足轻重的作用,包括参与内皮损伤后修复与内膜增生,影响斑块发展与稳定以及对动脉粥样硬化性疾病严重程度的预测。动脉粥样硬化病变过程中若干危险因素影响了内皮祖细胞的数量和功能,从而削弱内皮祖细胞可能的血管保护作用并影响动脉粥样硬化进程,因而提出内皮祖细胞潜在的治疗作用。本文从再内皮化、斑块发展和血管新生、动脉粥样硬化的若干危险因素及内皮祖细胞的预测价值和治疗作用等方面对内皮祖细胞在动脉粥样硬化进程中的作用作一综述。
- 周晓峰王佐
- 关键词：病理学与病理生理学内皮祖细胞动脉粥样硬化
- AMD3100促进载脂蛋白E^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成被引量：2
- 2008年
- 目的探讨AMD3100对载脂蛋白E-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响及其可能机制。方法12只8周龄雄性载脂蛋白E-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/kg,隔天注射)和对照组(PBS 0.1mL,隔天注射),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,获取组织标本和骨髓细胞,石蜡切片HE染色检测小鼠主动脉根部动脉粥样硬化病变;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位和观察次级集落单位的大小与细胞密度检测内皮祖细胞的克隆形成能力;逆转录聚合酶链反应和Western blotting检测内皮祖细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达。结果AMD3100组小鼠主动脉窦横切面粥样斑块面积与管腔面积之比与对照组比较增加了38.8%(37.2%±3.6%比26.8%±2.5%,P<0.05);AMD3100组小鼠骨髓源内皮祖细胞的克隆形成能力显著低于对照组(初级内皮祖细胞集落单位个数为9.67±2.16比21.83±2.64,次级内皮祖细胞集落单位个数为1.67±0.31比4.11±0.65,P<0.01);AMD3100组CXCR4 mRNA和蛋白的表达均显著低于对照组(P<0.01)。结论AMD3100促进载脂蛋白E-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成,可能与抑制骨髓源内皮祖细胞的克隆形成并下调CXCR4表达相关。
- 周晓峰王佐
- 关键词：病理学与病理生理学AMD3100动脉粥样硬化CXCR4
- SDF 1α对大鼠骨髓源性内皮祖细胞克隆形成能力及增殖的影响被引量：7
- 2008年
- 目的观察基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)对体外培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)动员和增殖的影响。方法微孔法获取大鼠骨髓EPCs并采用荧光显微镜和流式细胞术鉴定EPCs特异性标记物。不同浓度SDF-1α处理EPCs后,采用细胞培养、MTT检测EPCs的克隆形成、细胞增殖。结果通过MTT法检测,对照组与(1、10、100μg/L)SDF-1α处理组的OD值分别为0.311±0.054、0.587±0.072、0.813±0.056、1.029±0.078,通过统计学方法分析,对照组与SDF-1α处理组比较差异均有统计学意义(n=5,P<0.05);100μg/LSDF-1α处理组次级内皮祖细胞集落单位数目是对照组近3倍(4.67±1.577比14.33±3.055,n=5,P<0.01)。结论SDF-1α剂量依赖性地促进EPCs增殖,并显著增强EPCs克隆形成能力。
- 夏艺萍危当恒童中艺吕运成姚峰周晓峰田永凤姜志胜王佐
- 关键词：基质细胞衍生因子-1Α内皮祖细胞增殖
- AMD3100对apoE^-/-小鼠骨髓源性内皮祖细胞增殖、迁移和黏附的影响被引量：5
- 2008年
- 探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/(kg·2d))和对照组(PBS0.1ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小鼠骨髓细胞,免疫荧光鉴定CD133/VEGFR-2双阳性细胞为内皮祖细胞;MTT比色法、Transwell、黏附试验分别检测细胞的增殖、迁移和黏附能力;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位,观察次级集落单位的大小及细胞密度,检测各组内皮祖细胞的克隆形成能力;RT-PCR和Westernblot检测内皮祖细胞上CXCR4mRNA和蛋白质表达水平.与对照组比较,AMD3100组骨髓源性内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力均显著低于对照组,其CXCR4mRNA和蛋白质表达均显著低于对照组.结果表明:持续注射AMD3100可抑制骨髓源内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力,并下调CXCR4的表达.
- 王佐周晓峰王仁童中艺姜志胜王贵学
- 关键词：AMD3100内皮祖细胞增殖
- 基质细胞衍生因子1α—CXCR4趋化THP-1细胞迁移及氧化型低密度脂蛋白的影响被引量：7
- 2007年
- 目的探讨基质细胞衍生因子1α对单核细胞趋化作用、氧化型低密度脂蛋白对基质细胞衍生因子1α趋化单核细胞的影响及其对THP-1细胞表达CXCR4的影响。方法用Transwell迁移实验检测基质细胞衍生因子1α对单核细胞的趋化作用，逆转录聚合酶链反应检测CXCR4 mRNA的表达，Westem blot检测CXCR4蛋白的表达，并观察氧化型低密度脂蛋白对THP-1细胞CXCR4表达的剂量和时间效应。结果基质细胞衍生因子1α呈浓度依赖性诱导单核细胞迁移，加入CXCR4抗体可明显抑制这种作用。经不同浓度氧化型低密度脂蛋白处理48h后的THP-1细胞再用10μg/L基质细胞衍生因子1α进行趋化时，氧化型低密度脂蛋白呈浓度依赖性地增加单核细胞的迁移，50mg／L氧化型低密度脂蛋白组迁移的细胞数是对照组的11倍。THP-1细胞有基础水平的CXCR4表达，50mg／L氧化型低密度脂蛋白可使CXCR4的表达上调4．5倍。CXCR4上调最早在6h内发生，12h达峰值。结论基质细胞衍生因子1α--CXCR4参与趋化单核细胞迁移，其作用被氧化型低密度脂蛋白加强；氧化型低密度脂蛋白上调CXCR4表达。
- 吕运成王佐危当恒姜志胜万炜李国华童中艺王贵学
- 关键词：病理学与病理生理学基质细胞衍生因子氧化型低密度脂蛋白
- 苦瓜蛋白MD28对Caco-2细胞胆固醇转运及三磷酸腺苷结合盒转运体5和8表达的影响
- 2009年
- 王佐宋砚明张晓蕾
- 关键词：胆固醇转运
- 基质细胞衍生因子1α通过上调CXCR4表达促进单核—内皮细胞粘附被引量：4
- 2008年
- 目的研究基质细胞衍生因子1α对CXCR4表达及THP-1单核细胞与内皮细胞粘附的影响。方法逆转录聚合酶链反应检测CXCR4 mRNA的表达,免疫印迹检测其蛋白表达变化;用0、50、100和200μg/L基质细胞衍生因子1α处理内皮细胞30min后,将THP-1单核细胞与内皮细胞共孵育后洗脱检测THP-1与内皮细胞的粘附,并加用10mg/L的CXCR4抗体阻断。结果100μg/L基质细胞衍生因子1α显著上调THP-1单核细胞上CXCR4的表达(P<0.05),基质细胞衍生因子1α能促进内皮细胞与THP-1单核细胞的粘附,且随着作用浓度的增加粘附细胞数也增加,但可被CXCR4抗体所抑制。结论基质细胞衍生因子1α可上调THP-1单核细胞上CXCR4表达,并能促单核细胞与内皮细胞粘附,其机制与上调单核细胞CXCR4表达有关。
- 田国平李国华邹正生曾均发王佐涂玉林
- 关键词：病理学与病理生理学氧化型低密度脂蛋白基质细胞衍生因子1ΑCXCR4粘附
- 基质细胞衍生因子1α对大鼠血管平滑肌细胞与单核细胞粘附的影响被引量：12
- 2006年
- 目的探讨基质细胞衍生因子1α对大鼠血管平滑肌细胞与单核细胞粘附的影响。方法原代培养的大鼠血管平滑肌细胞与50mg/L氧化型低密度脂蛋白孵育48h,将单核细胞与平滑肌细胞共孵育后洗脱检测粘附功能,并用基质细胞衍生因子1α抗体阻断。结果经氧化型低密度脂蛋白处理的血管平滑肌细胞基质细胞衍生因子1α上调5倍,单核细胞粘附增加29倍,但可被基质细胞衍生因子1α单抗所阻断。结论基质细胞衍生因子1α参与单核细胞与大鼠血管平滑肌细胞的粘附过程。
- 王佐吕运成危当恒姜志胜李国华姚峰刘录山王贵学
- 关键词：病理学与病理生理学基质细胞衍生因子1Α氧化型低密度脂蛋白血管平滑肌细胞单核细胞
