国家重点基础研究发展计划(G1999012007)
- 作品数：21 被引量：303H指数：12
- 相关作者：相建海孔杰刘萍孟宪红孙金生更多>>
- 相关机构：中国科学院中国水产科学研究院黄海水产研究所中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 河蟹眼柄神经分泌细胞钾离子通道的种类和特征被引量：3
- 2001年
- 用全细胞膜片钳技术对培养 12～ 2 4h不同形态河蟹眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)神经分泌细胞表达的钾离子通道进行了种类鉴别和特征研究。结果表明 :正常蟹种、 2龄成蟹和早熟河蟹眼柄MTXO中分布的A、B、C三种类型神经分泌细胞外向钾离子通道的种类和电压特征无明显区别 ,均表达对 4 AP敏感的快速激活、快速失活的瞬时钾离子通道电流 (IA)和对TEA敏感的缓慢激活、缓慢失活的慢钾离子通道电流 (Ik)。IA和Ik 的激活电压均为 - 4 0mV ,峰值电流与胞体大小成正比 ,并随刺激电压的升高而快速增加。IA 达到峰值的平均时间为 2 5± 0 6ms ,Ik 几乎至 80ms记录结束时达到峰值。
- 孙金生刘安西贺秉军陈家童相建海马维林
- 关键词：中华绒螯蟹甲壳动物神经分泌细胞钾离子通道
- 中国对虾5个地理群体的RAPD分析被引量：27
- 2004年
- 采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对取自辽东湾、渤海湾、海州湾、乳山湾及海洋岛5个群体的中国对虾共95个个体的遗传多样性进行分析。14个随机引物共检测出103个位点(200～2500bp),各群体的多态位点比例在31.07%～34.95%之间。遗传距离显示中国对虾群体间有一定遗传分化,其中辽东湾和乳山湾群体间的遗传距离最大(0.0742),而辽东湾和渤海湾群体间的遗传距离最小(为0.0243),群体间的遗传分化系数为0.2083。整体来看,中国对虾的遗传变异水平较低,遗传多态度为0.1621。用UPGMA对5个群体进行聚类分析,构建谱系关系图。
- 马春艳孔杰孟宪红刘萍张秀梅
- 关键词：中国对虾地理群体随机扩增多态DNA
- 用PCR法快速筛选中国对虾含微卫星的重组阳性克隆被引量：24
- 2001年
- 运用PCR法在中国对虾的小片段基因组文库中快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆。PCR中使用的引物为载体pGEM - 3zf(+)上多克隆位点两侧的T7/Sp6启动子引物和根据微卫星核心重复序列设计的STR引物 :STR1:5’ -ATATATATATATAT - 3’ ;STR2 :5’ -TCTCTCTCTCTCTC - 3’。直接使用含有重组克隆的菌液 ,在PCR反应前增加一段裂解细菌的高温。筛选出来的含有微卫星序列的重组阳性克隆经DNA测序验证。结果证明 ,采用PCR方法用菌液快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆完全可行 ,而且具有简便、快速、高效。
- 徐鹏周岭华相建海
- 关键词：中国对虾微卫星聚合酶链式反应重组阳性克隆PCR
- 中国明对虾抗白斑综合症病毒分子标记的筛选被引量：21
- 2005年
- 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对经过连续4代选育的抗白斑综合症病毒(WSSV)中国明对虾(Fennerope naeuschinensis)(XY4)及未经选育的与XY4来源相同的中国明对虾野生群体(HB)进行分析,以期筛选出与抗病性状相关的分子遗传标记,为进一步的基因定位以及中国对虾的种质资源保护和分子标记辅助育种提供有力的技术支撑和理论依据。共进行220个RAPD单引物和114对双引物的检测,产生标记数目共计2439个。依据标记在群体中出现的频率和变化规律,共筛选出5个可能与抗病相关的特异性标记,对这些特异性标记进行测序并将测序结果进行BLAST分析,发现测得片段的序列与数据库中序列的相似性较低,未能找到与所测序列同源性较高的功能基因。这与利用AFLP技术分析的结果一致。由于选育过程施加人工选择,推论这些特异性标记虽不是抗WSSV分子标记,但可能与抗病性状密切相关。
- 孟宪红孔杰刘萍马春艳李颖
- 关键词：中国明对虾RAPD白斑综合症病毒分子标记
- 中华绒螯蟹眼柄MTXO细胞GABA受体通道研究被引量：5
- 2003年
- 采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)三种类型神经内分泌细胞对 0 0 1～ 5mmol/Lγ氨基丁酸 (γ aminobutyricacid ,GABA)的反应 ,并结合选择性拮抗剂和激动剂的使用进行了GABA受体研究 .在电流钳模式下 ,依据不同NernstCl-电位 ,三种类型细胞均对GABA产生去极化或超级化反应 .在电压钳模式下 ,GABA激活Cl-通道电流 (IGABA) .IGABA在灌流GABA后约12 0 0ms内激活 ,80 0ms内达到峰值 ,没有明显的脱敏反应 ,反转电位接近NernstCl-电位 .IGABA幅值呈浓度依赖性 ,激活阈值为 0 0 1mmol/L ,约在 0 5mmol/L达到饱和 .药理学实验结果表明 ,中华绒螯蟹眼柄神经内分泌细胞GABA受体是Cl-通道蛋白 ,对Cl-离子通道阻断剂Picrotoxin和Niflumicacid敏感 ,但是对GABAA 受体拮抗剂Bicuculline和GABAC 受体激动剂cis 4 aminocrotonicacid (CACA)和trans 4 aminocrotonic (TACA)均不敏感 .
- 孙金生高春蕾相建海
- 关键词：中华绒螯蟹眼柄GABA受体视神经节神经内分泌细胞
- 中国对虾黄渤海沿岸群亲本及子一代RAPD分析被引量：30
- 2000年
- 1997年 3月从山东海阳市近海捕获中国对虾 ,取两尾单独暂养 ,产卵后培育出子代 ,用随机扩增多态性 DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)技术对亲本和子代的基因组 DNA进行多态性研究 ,目的是在分子水平上了解亲本与子一代之间的遗传结构 ,比较了两个家系的遗传差异。结果表明 ,使用 OPG系列 2 0个引物 ,有 16个引物获得了谱带清晰且重复性好的产物 ,扩增的多态性片段分子量大小在 2 6 0 0～ 2 2 0 bp之间。家系 A检测 78个位点 ,其中多态位点数为 14个 ,占17.95% ,家系 B检测 88个位点 ,其中多态位点数为 18个 ,占 2 0 .4 5%。家系 A父本对其子代的遗传距离为 0 .0 4 50± 0 .0 0 93,母本对其子代的遗传距离为 0 .0 570± 0 .0 0 87,30个个体之间的遗传距离为 0 .0 2 83± 0 .0 0 95;家系 B父本对其子代的遗传距离为 0 .0 52 3± 0 .0 12 4 ,母本对其子代的遗传距离为 0 .0 6 4 1± 0 .0 132 ,2 8个个体之间的遗传距离为 0 .0 384± 0 .0 155。研究结果进一步证实 ,子代之间的遗传距离比其父、母与子代之间更小 ,遗传变异程度更低。另外 ,发现了与性别有关的 12 0 0 bp的片段。
- 刘萍孔杰石拓刘志鸿邓景耀庄志猛徐怀恕韩玲玲
- 关键词：中国对虾RAPD分析
- 中国明对虾基因组串联重复序列分析被引量：7
- 2005年
- 串联重复序列包括微卫星和小卫星重复序列, 前者的重复单位长度为1～6 bp, 后者的重复单位长度在7 bp以上. 通过对中国明对虾884 kb总长度的随机基因组DNA序列的分析, 从中共找到了2159个串联分布的重复序列, 其中微卫星序列1714个, 占总重复序列的79.4%, 小卫星序列445个, 占总重复序列的20.6%. 这些重复序列的总长度为116685 bp, 占总序列的比例为13.2%, 其中微卫星序列长度占9.78%, 小卫星序列长度占3.42%. 依据重复序列数目的多少, 前20种重复序列类型依次是: AT(557个)、AC(471个)、AG(274个)、AAT(92个)、A(56个)、AAG(28个)、ATC(27个)、ATAG(27个)、AGG(18个)、ACT(15个)、C(11个)、AAC(11个)、ACAT(11个)、CAGA(10个)、AGAA(9个)、AGGG(7个)、CAAA(7个)、CGCA(6个)、ATAA(6个)、AGAGAA(6个). 其中两碱基重复序列, 无论是在数目还是在序列长度上, 都占有绝对的优势, 而五碱基重复序列的数目和种类都很少, 只发现了AGAGA, GAGGC, AAAGA 3种; 同时发现由7, 11, 13等数学上称为质数的长度重复单位所组成的重复序列的数目和种类都要比其两边的重复序列的种类和数量要少.
- 孔杰高焕
- 关键词：中国明对虾基因组串联重复序列DNA序列微卫星序列小卫星
- 养殖期中国对虾抗菌肽的表达被引量：14
- 2004年
- 利用半定量RT-PCR方法 ,根据中国对虾(Fenneropenaeuschinensis)抗菌肽的cDNA序列 ,设计一对特异引物 ,首次对中国对虾养殖期 (PL11期仔虾～稚虾 )抗菌肽的表达进行了研究。结果在各时期样本所提取的总RNA中 ,均扩增出一条长度约为200bp的特异性条带 ,表明中国对虾养殖期不同阶段均有抗菌肽的表达 ,提示中国对虾抗菌肽基因为组成型表达 ,并可能是中国对虾抵抗微生物感染的一个重要分子基础。
- 郭振宇董波焦传珍相建海
- 关键词：中国对虾抗菌肽半定量RT基因组成型
- 生物信息学现状及我国海洋生物信息学应用展望被引量：6
- 2004年
- 董波相建海
- 关键词：生物信息学生命科学信息处理
- 四种鳕鱼的形态学研究被引量：25
- 2002年
- 本文对蓝鳕 (Micromesistius poutassou)、远东宽突鳕 (Eleginusgracilis)、大西洋鳕(Gadusmorhua)和太平洋鳕 (G. macrocephalus)等 4种经济鳕鱼类进行了细致的观察 ,对其分节及量度特征进行了测定分析 ,发现所测数据与国内外资料存在一些差异 ;并补充描述了各种的鼻孔、牙齿等形态特征。统计检验表明 :蓝鳕的第 1臀鳍鳍条数、鳃耙数与其他鳕鱼存在显著差异 ;远东宽突鳕的脊椎骨数与其他鳕鱼存在显著差异 ;大西洋鳕和太平洋鳕在上述性状上的差异不明显 ,但 2者的体色有明显差异。从形态特征聚类分析图得知宽突鳕属与鳕属亲缘关系近 ,而蓝鳕属与鳕属亲缘关系远。
- 高天翔武云飞张秀梅王丹王迎宾李朝秀
- 关键词：鳕形目形态学
