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HPLC法测定黑莓种子中维生素E的含量被引量：2: 2013年; 黑莓种子中含有丰富的维生素E,采用超声波提取,结合反相高效液相色谱-紫外检测法对黑莓种子中维生素E的含量进行测定,确定体积比50∶50的乙腈∶甲醇作为流动相,以维生素E质量浓度X(μg/mL)对峰面积Y(mAU.min)进行线性回归,得回归方程Y=0.860 5X+0.596 6,相关系数为0.999 1,该方法维生素E的最低检出限为2 ng。通过本法对黑莓种子油稀释后样品进行测定,平均质量浓度1.820μg/mL,RSD=0.55%。得出黑莓种子中维生素E的含量为18.2 mg/100 g。VE平均加标回收率为99.88%,RSD<2%。结果证明,该方法具有简便、高效、结果准确、重复性好的特点。; 汤飞云方亮陈剑吕寒吴文龙李维林; 关键词：HPLC 维生素E

黑莓品种‘Arapaho’离体叶片不定芽诱导影响因素分析及再生体系建立被引量：6: 2012年; 以黑莓(Rubus spp.)品种‘Arapaho’无菌苗叶片为外植体,通过正交和单因素实验分别研究了基本培养基类型、6-BA和IBA质量浓度以及暗培养时间、外植体的叶位和接种方式对不定芽诱导的影响,并研究了IBA质量浓度对不定芽生根的影响;在此基础上,初步建立了黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系。正交实验结果表明:基本培养基类型对叶片不定芽诱导率及平均不定芽数的影响最大,而IBA质量浓度对叶片不定芽诱导率及6-BA质量浓度对平均不定芽数的影响较小;适宜‘Arapaho’叶片不定芽诱导的最佳培养基为含有2.0 mg.L-1 6-BA和1.0 mg.L-1 IBA的MS培养基。单因素实验结果表明:暗培养时间、外植体的叶位及接种方式对不定芽诱导率有显著影响;最适宜的暗培养时间为21 d;植株中、上部叶片的再生能力较强,其中第3和第4位叶的不定芽诱导效果最佳;叶面朝上接种更有利于不定芽的诱导。在含0.2 mg.L-1IBA的MS培养基中,不定芽生根率达100.0%,且根数多、长势良好。黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系为:以无菌苗的第3和第4位叶为外植体,经过适当修剪后叶面朝上接种于含有2.0 mg.L-16-BA和1.0 mg.L-1 IBA的MS培养基上,暗培养21 d后置于光照条件下培养30 d;将不定芽转接到含有0.5 mg.L-16-BA和0.3 mg.L-1 NAA的MS培养基上进行继代培养;当不定芽高约2 cm时转接到含有0.2 mg.L-1IBA的MS培养基上进行生根培养,最终获得完整植株。; 王鲁北张春红王小敏吴文龙李维林; 关键词：黑莓离体叶片不定芽诱导

黑莓品种‘Black Butte’的组织培养被引量：1: 2011年; 以黑莓品种‘Black Butte’的带芽茎段为外植体进行组织培养研究。结果表明,基本培养基的成分、激素种类和浓度对‘Black Butte’不定芽增殖和生长均有显著影响。综合分析认为,较适基本培养基是添加0.05mmol/L铁盐的MS培养基,较适增殖培养基为MS+0.05 mmol/L铁盐+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA,较适生根培养基为1/2 MS+0.05 mmol/L铁盐+0.01 mg/L NAA。; 胡淑英王小敏吴文龙李维林; 关键词：黑莓基本培养基激素

激素对黑莓‘Kiowa’叶片愈伤组织诱导的影响被引量：2: 2013年; 以黑莓品种‘Kiowa’无菌苗的叶片为外植体,研究了外源生长调节剂对愈伤组织诱导的影响。结果表明:不同激素种类、浓度及其配比诱导‘Kiowa’的叶片都可以产生愈伤组织,并且诱导率都为100%,但愈伤组织的状态和生长量有显著差异。其中添加2,4-D产生的愈伤组织质量较好,生长素和细胞分裂素组合使用时有抑制愈伤组织诱导的作用;添加1.0 mg/L 2,4-D的MS培养基诱导的愈伤组织多,质地疏松,呈嫩黄色颗粒状。; 汤飞云方亮王小敏张春红胡淑英李维林; 关键词：叶片愈伤组织

悬钩子属植物肌动蛋白基因片段的克隆与表达被引量：5: 2011年; 目的:克隆悬钩子属植物肌动蛋白基因(actin),为研究该物种中其他基因的表达和调控提供内标基因。方法:利用一对特异性引物从黑莓、悬钩子杂种和树莓品种中克隆actin cDNA片段,对其进行序列分析和半定量RT-PCR表达分析。结果:从3个品种中均获得一条783 bp actin cDNA片段,编码260个氨基酸,3条actin片段与其他植物核苷酸序列的同源性都在82%以上,与其他植物氨基酸序列同源性也均在95%以上;树莓和悬钩子杂种品种的actin核苷酸和氨基酸序列同源性均达99%,系统进化分析也发现两者亲缘关系较近些;表达分析发现actin基因在各品种不同组织中均有一定的表达量。结论:首次克隆了悬钩子属植物肌动蛋白基因actin,将来自黑莓和树莓品种的序列登录在GenBank,登录号分别为HQ439556和HQ439557。; 张春红王小敏王鲁北吴文龙李维林; 关键词：悬钩子肌动蛋白克隆半定量RT-PCR

利用简并引物克隆黑莓、树莓肌动蛋白基因片段及表达分析被引量：4: 2011年; 采用同源克隆法,利用设计的一对肌动蛋白(actin)基因简并引物,从黑莓、树莓和悬钩子杂种3个悬钩子植物品种均得到一条743 bp的actin cDNA片段,推测编码247个氨基酸。序列比对发现,克隆的actin基因推导的氨基酸序列和其他植物的肌动蛋白氨基酸序列具有高度保守性,经数据库搜索后将来自黑莓和树莓品种的actin cDNA片段在GenBank中登录,登录号分别为HQ439558和HQ439559。不同来源的植物actin蛋白系统进化树的聚类结果表明,树莓和悬钩子杂种亲缘关系较为密切。actin基因在3个悬钩子植物品种不同组织中的RT-PCR分析结果表明,其在检测的不同组织中均有一定程度的表达量,可能都属于组成型表达的肌动蛋白基因。研究结果为利用actin基因作为内参进一步研究黑莓和树莓其他基因的丰度奠定基础。; 张春红王小敏王鲁北吴文龙李维林; 关键词：悬钩子肌动蛋白基因半定量RT-PCR

培养基成分对黑莓Kiowa叶片和叶柄愈伤组织诱导的影响被引量：3: 2013年; 为获得适于悬浮培养的优质愈伤组织,以黑莓品种Kiowa无菌苗的叶片、叶柄为外植体,研究了不同种类培养基、不同种类糖、不同蔗糖浓度、不同水解酪蛋白浓度对叶片、叶柄愈伤组织诱导的影响。结果表明,不同培养条件下诱导Kiowa的叶片和叶柄都可以产生愈伤组织,并且诱导率都为100%,但愈伤组织的状态和生长势各不相同。以MS作为基本培养基,25 g/L蔗糖作为碳源,200 mg/L的水解酪蛋白诱导效果最佳,愈伤组织为质地疏松颗粒状嫩黄色愈伤,生长势好。; 汤飞云方亮王小敏张春红胡淑英李维林吴文龙; 关键词：黑莓叶片叶柄愈伤组织

“Arapaho”黑莓叶片与叶柄愈伤组织的诱导被引量：6: 2011年; 以黑莓品种"Arapaho"无菌苗的叶片、叶柄为外植体,研究了植物生长调节剂、基本培养基和光照条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明,在MS培养基中单加NAA、2,4-D、6-BA或者TDZ,都可以使黑莓"Arapaho"的叶片、叶柄产生愈伤组织,但是植物生长调节剂及其浓度不同,使出愈时间、愈伤组织诱导率以及愈伤组织大小和形态等有差异;基本培养基类型和光照时间长短对黑莓叶片、叶柄愈伤诱导无明显影响。; 王鲁北张春红王小敏胡淑英李维林吴文龙; 关键词：黑莓叶片叶柄愈伤组织

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国家自然科学基金(31000753)

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