国家自然科学基金(81000810)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：张莉卢世璧刘舒云许文静郭全义更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院山西医科大学佳木斯大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划解放军总医院科技创新苗圃基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐带Wharton胶间质干细胞的免疫特性研究被引量：2
- 2011年
- 目的 对人脐带Wharton胶间质干细胞（human umbilical cord Wharton＇s Jelly-derived MSC,hWJMSC）进行免疫特性的体外和体内研究,探讨其应用于临床的可行性.方法 取人脐带并分离Wharton胶,组织块法培养hWJMSC,通过细胞表面干细胞标志和多向分化实验对其进行鉴定;通过流式细胞术、免疫组织化学及RT-PCR等实验方法体外检测hWJMSC的主要组织相容性抗原（HLA-ABC和HLA-DPDQDR,即MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ）、表面共刺激分子（CD40、CD80、CD86）和免疫抑制分子（HLAC、IDO、PGE2）等的表达;通过细胞因子蛋白芯片和Western blot实验检测并验证hWJMSC中与免疫抑制相关的细胞因子（IL-10、TGF-β、VEGF、HGF）的表达;另外,还构建了hWJMSC-支架复合体,将其埋人家兔背部皮下,观察其在体内的免疫反应.结果 从人脐带Wharton胶中分离、培养获得长梭形细胞,经流式细胞术及多向分化实验鉴定其为间质干细胞;流式细胞术及免疫组化等检测显示所分离的hWJMSC不表达MHC-Ⅱ,表达MHC-Ⅰ,阳性表达免疫抑制因子HLA-G、IDO、PGE2以及免疫抑制相关细胞因子IL-10、TGF-β、VEGF、HGF,表明其具有低免疫原性和诱导免疫耐受的能力;hWJMSC-支架埋人家兔皮下未引起免疫反应.结论 hWJMSC的免疫原性低,具有抑制免疫排斥、诱导宿主免疫耐受的能力,可应用于异体移植.
- 刘舒云卢世璧袁玫张莉侯克东郑希福赵斌眭翔许文静郭全义
- 关键词：脐带间质干细胞免疫耐受
- 细胞因子和生长因子在人脐带Wharton胶间质干细胞的表达谱被引量：1
- 2013年
- 目的观察细胞因子和生长因子在人脐带Wharton胶间质干细胞（WMSCs）的表达，了解其生物学特性，为其临床应用提供实验依据。方法取人足月妊娠新生儿脐带，分离MSCs，应用成纤维细胞集落形成实验验证其干细胞特性，流式细胞术鉴定其表面分了特性，蛋白芯片方法观察细胞因子和生长因子的表达。结果所检测的79种因子除白介素（IL）-13表达痕量外，其他均表达于WMSCs，表达从多到少（OD值〉0．800）依次为IL-8、生长相关癌基因（GRO）、IL-6、IL-1β、IL-1α和GRO—α；它表达6种免疫抑制功能的因子和肿瘤生长抑制因子，这对减少MSCs用于异体移植时的免疫排斥及瘤变的可能性起一定作用，而其表达的金属蛋白酶抑制因子TIMP-1、TIMP-2将对其应用于作内移植时起到保护自身的作用；多种神经生长因子（脑源性神经生长因子、神经生长素-3、神经生长素-4、胶质细胞源性神经生长因子）的表达表明WMSCs易于血神经细胞诱导分化。结论 人脐带WMSCs踢十扶得，表达的细胞因子有利于其应用于异体移植，减少免疫排斥及恶变，并保护其自身在体内分化生长．是一个很有前景的新型种子细胞，可应用于再生医学及构建组织工程组织或器官。
- 许文静侯克东袁玫张莉彭江刘舒云郭全义卢世璧
- 关键词：脐带细胞因子类
- 自体脂肪间充质干细胞复合人脐带Wharton胶支架修复兔膝关节软骨缺损被引量：6
- 2012年
- 背景:脐带Wharton胶富含透明质酸,糖胺多糖及胶原等,成分与天然软骨细胞外基质类似,因此由人脐带提取的Wharton胶很可能是一种较为理想的软骨组织工程支架材料。目的:评价自体脂肪间充质干细胞复合人脐带Wharton胶支架修复兔膝关节软骨缺损的效果。方法:将终浓度为1010L-1、成软骨方向诱导后的兔自体脂肪间充质干细胞与人脐带Wharton胶支架复合,继续培养1周构建组织工程软骨,对兔膝关节全层软骨缺损进行修复(实验组),并与单纯支架修复的对照组及空白组进行比较。术后3个月对修复组织行大体观察、组织学检测、糖胺多糖、总胶原定量检测及生物力学测定。结果与结论:实验组的缺损多为透明软骨修复,对照组以纤维组织修复为主,空白组无明显组织修复。提示脂肪间充质干细胞作为软骨组织工程种子细胞具有可行性;实验构建的组织工程软骨能有效的修复关节软骨缺损,人脐带Wharton胶可作为软骨组织工程良好的支架材料。
- 韩爽卢世璧刘强张莉黄靖香汪爱媛刘舒云赵斌许文静郭全义
- 关键词：脂肪间充质干细胞软骨缺损
- 软骨细胞外基质对脐带Wharton胶间充质干细胞生物学性状的作用被引量：3
- 2013年
- [目的]探讨软骨细胞外基质微环境对源于人脐带Wharton胶的间充质干细胞增殖的影响,观察该微环境促进干细胞向软骨细胞方向分化的潜能。[方法]①取3%(w/v)猪关节软骨细胞外基质和2.4%(w/v)海藻酸盐为原料,按体积比1∶1的比例充分混合,将其用带16 G针头的1 ml注射器匀速滴入氯化钙溶液制作软骨细胞外基质/海藻酸盐混合凝胶微球,通过扫描电镜观察该微球内部结构。②将人脐带Wharton胶中间质干细胞(WJMSCs)混于软骨细胞外基质/海藻酸混合液,滴入氯化钙溶液形成复合干细胞的混合凝胶微球进行培养,设为实验组;同理WJMSCs混合于单纯藻酸盐凝胶并形成微球作为对照组。③通过扫描电镜和FDA-PI染色观察上述两组微球内细胞的生长粘附情况,体外培养4周,经组织学和DNA测定观察干细胞的表型及增殖情况。[结果]①构建的软骨细胞外基质/海藻酸盐混合凝胶微球呈半透明乳白色,内部具有较多不规则的孔隙结构,具有三维立体培养细胞的环境特点。②比较实验组和对照组不同细胞培养时间段细胞增殖量,发现实验组细胞增殖率高于对照组,第28 d时两组细胞DNA含量的差异有统计学意义,(P﹤0.05)。③实验组中细胞呈圆形或椭圆形,形成明显的软骨陷窝样的结构,有大量细胞外基质分泌,对照组中细胞呈圆形,陷窝样的结构不明显。④组织学染色观察发现:实验组中培养的干细胞明显有向软骨细胞方向分化的趋势。[结论]软骨细胞外基质微环境不仅利于人脐带Wharton胶中间质干细胞的增殖,而且具有将WJMSCs向软骨细胞方向诱导分化的潜能。
- 赵鹏刘舒云卢世璧杨建华袁玫张莉黄靖香赵斌眭翔许文静郭全义
- 关键词：藻酸盐软骨组织工程
