陕西省教育厅科研计划项目(2010JK493)
- 作品数：6 被引量：29H指数：4
- 相关作者：李敏张冰刘小青刘欣李连珍更多>>
- 相关机构：陕西中医药大学北京中医药大学陕西中医药大学附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省教育厅科研计划项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于L02细胞CYP3A变化的辛热药附子、仙茅药性表达研究被引量：7
- 2010年
- 观察辛热药附子、仙茅水提物对正常人肝脏细胞L02细胞药物代谢酶细胞色素P4503A(Cytochrome P4503A,CYP3A)的影响,进而探讨体内cAMP-PKA信号通路与药性表达的相关性。方法:200μg生药/mL的附子、仙茅水提物作用于L02细胞,以cAMP-PKA信号通路激动剂8-Br-cAMP作为阳性对照。应用免疫组化法检测各组细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)表达,应用Western blot法检测孕烷X受体(pregnane x receptor,PXR)表达,应用红霉素-N脱甲基法检测CYP3A活性。结果:与空白对照组比较,附子、仙茅水提物组细胞的PKA、PXR表达增强,CYP3A活性增加。结论:附子、仙茅可增强CYP3A活性,调控cAMP-PKA信号通路是其药性表达机制之一。
- 李敏张冰刘小青
- 关键词：附子仙茅L02细胞细胞色素P4503A
- 仙茅对L02细胞代谢功能的影响
- 2012年
- 目的:探讨仙茅对体外培养肝细胞代谢功能的影响。方法:应用仙茅水提物大(400μg生药/ml)、中(200μg生药/ml)、小剂量(100μg生药/ml)作用于体外培养的正常人肝细胞株L02细胞,收集细胞培养液,应用氧化酶终点法检测葡萄糖(GLU);终点法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC);双缩脲终点法检测总蛋白(TP);氧化酶法检测乳酸(LAC);酶标比色法测乳酸脱氢酶(LDH)。结果:仙茅水提物大(400μg生药/ml)、中剂量(200μg生药/ml)时可使L02细胞培养液中GLU、TP、LDH含量增加,TG、LAC含量降低,与空白组比较有显著差异。结论:仙茅可提高L02细胞糖、脂、蛋白的代谢及能量代谢。
- 李敏杨红莲王斌
- 关键词：仙茅L02细胞代谢功能
- 仙茅对类虚寒大鼠物质代谢及内分泌水平影响的实验研究被引量：13
- 2012年
- 目的观察仙茅对类虚寒动物模型的物质代谢和内分泌影响,探讨仙茅辛热药性的表达。方法应用糖皮质激素氢化可的松塑造类虚寒动物模型,仙茅水提物干预类虚寒动物模型,放射免疫法检测三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、皮质酮、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP);氧化酶终点法检测葡萄糖;终点法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC);双缩脲终点法检测总蛋白(TP);溴甲酚绿终点法检测白蛋白(Alb),探讨仙茅对类虚寒动物物质代谢和内分泌影响水平。结果与空白对照组比较,虚寒模型组葡萄糖、总胆固醇、总蛋白、白蛋白、促甲状腺素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、皮质酮降低,甘油三酯升高,有统计学意义(P<0.05,P<0.01);仙茅大剂量干预后,葡萄糖、总胆固醇、总蛋白、促甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、皮质酮显著升高,甘油三酯降低。结论仙茅可改善类虚寒动物物质代谢、内分泌及环核苷酸水平,体现辛热药性。
- 李敏张冰刘小青
- 关键词：仙茅内分泌物质代谢促甲状腺素总蛋白
- 苔黑酚葡萄糖苷对L02细胞肝药酶CYP3A的调控作用研究被引量：5
- 2012年
- 目的观察苔黑酚葡萄糖苷对体外培养的正常肝细胞株L02中CYP3A的影响,探讨苔黑酚葡萄糖苷是否通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的活性。方法分别用cAMP-PKA信号通路中蛋白激酶A(PKA)激动剂环腺苷酸(cAMP)类似物8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)及其抑制剂H-89、苔黑酚葡萄糖苷干预L02细胞,MTT法检测细胞活力,完整细胞免疫组化法检测PKA蛋白表达,红霉素-N-脱甲基法检测CYP3A活性,Western blotting检测细胞中孕烷X受体(PXR)蛋白表达。结果与对照组(加入不含药的无血清培养基)相比,苔黑酚葡萄糖苷处理后的细胞CYP3A的活性增强,PKA、PXR蛋白表达增强,与8-Br-cAMP的作用相似。结论苔黑酚葡萄糖苷可通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的表达,表明其可能是仙茅表现出辛热药性的主要成分之一。
- 李敏张冰刘小青
- 关键词：盐酸巴马汀
- 辛热药仙茅作用于药物代谢酶CYP3A的药性表达研究被引量：7
- 2010年
- 目的在观察仙茅对虚寒大鼠神经内分泌功能改善基础上,探讨辛热药仙茅对虚寒状态动物肝脏药物代谢酶的影响及在辛热药性表达中的意义。方法将SD大鼠随机分为空白对照组,虚寒模型组,仙茅大、中、小剂量组。以氢化可的松(3.75 mg/kg)肌肉注射复制虚寒大鼠模型,辛热药仙茅以30、20、10 g/kg干预,红霉素-N脱甲基法检测动物肝脏代谢酶细胞色素P4503A(CYP3A)活性,放免法检测动物血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量,Western blot法检测动物肝脏孕烷X受体(PXR)蛋白表达,免疫组化法检测动物肝脏蛋白激酶A(PKA)蛋白表达。结果虚寒大鼠肝脏药物代谢酶活性降低,PXR表达减少,cAMP、cGMP水平降低,PKA表达减少,仙茅各剂量组可提高CYP3A活性和cAMP含量,增强PXR、PKA表达,对cGMP影响不大。结论仙茅可能通过调节cAMP-PKA信号通路改善虚寒状态的代谢功能低下症状,从而表明辛热药的部分药性实质。
- 李敏张冰刘小青刘欣李连珍
- 关键词：仙茅细胞色素P4503A孕烷X受体
- cAMP-PKA信号通路对L02细胞药物代谢酶CYP3A的调控作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨cAMP-PKA信号通路对细胞色素P4503A(CYP3A)在正常肝细胞L02表达中的作用。方法 L02细胞中分别加入8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)10μmol.L-1及抑制剂H-89 10μmol.L-1,培养48 h,分别采用完整细胞免疫组化法、Western印迹法和红霉素-N-脱甲基法检测细胞中PKA、孕烷X受体(PXR)及CYP3A的表达。结果与正常对照组PKA蛋白表达(211±20)、PXR蛋白表达(0.45±0.14)及CYP3A的活性〔(0.38±0.02)μmol.min-1.g-1蛋白〕相比,8-Br-cAMP 10μmol.L-1处理后,细胞PKA蛋白表达(296±18)升高、PXR蛋白表达(0.69±0.21)升高、CYP3A的活性〔(0.43±0.01)μmol.min-1.g-1蛋白〕增强;H-89 10μmol.L-1处理后细胞中PKA蛋白表达(176±14)降低,PXR蛋白表达(0.47±0.13)及CYP3A的活性〔(0.39±0.05)μmol.min-1.g-1〕减弱,无统计学差异。结论 cAMP-PKA信号通路可能是药物代谢酶CYP3A的调控途径之一。
- 李敏张冰刘小青
- 关键词：环AMP依赖性蛋白激酶类L02细胞细胞色素P-450CYP3A
