广东省科技计划工业攻关项目(2010B031600145)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王慧赖克方罗炜刘利东任筱兰更多>>
- 相关机构：广州医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 百日咳鲍特菌BP283基因的实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3
- 2012年
- 目的探讨检测百日咳鲍特菌BP283基因片段的有效方法。方法以百日咳鲍特菌BP283序列为目的基因,设计探针和引物,构建质粒标准品;建立FQ-PCR体系,优化反应条件,并进行方法学评价。结果成功构建了重组质粒pCR2.1-BP283;建立了检测BP283基因片段的FQ-PCR方法:标准曲线相关系数为0.998,最低检测浓度为102copies/μL,对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线,批内及批间变异系数均<4%。结论FQ-PCR方法可成功检测百日咳鲍特菌BP283基因,该方法具有敏感性好、特异性高及重复性好等优点。
- 罗炜王慧刘利东任筱兰赖克方
- 关键词：百日咳鲍特菌实时荧光定量
- 实时荧光定量PCR快速检测百日咳鲍特菌方法学建立及评价被引量：1
- 2010年
- 目的建立实时荧光定量PCR检测百日咳鲍特菌的方法。方法以百日咳鲍特菌的重复插入序列IS481为目的基因,设计探针和引物,以克隆的IS481基因片段为DNA模板,在荧光定量PCR仪上建立实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线,并进行灵敏度、重复性、特异性实验。结果建立的定量标准曲线阈值循环数(Ct)与模板拷贝数呈良好线性关系(r=0.998);最低检测浓度为102 copies/μl;批内及批间变异系数均小于4%;对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线。结论实时荧光定量PCR法检测IS481基因可用于百日咳鲍特菌的快速检测,具有较好的灵敏度、特异性及重复性。
- 王慧罗炜赖克方
- 关键词：百日咳鲍特菌聚合酶链反应实时荧光定量
